DNA-based discrimination of species is a powerful way for morphologically otherwise similar species, like centric diatoms. Here, the author sequenced long-range nuclear ribosomal DNAs, spanning from the 18S to the D5 region of the 28S rDNA, of Stephanodiscus, particularly including a Korean isolate. By comparisons, high DNA similarities were detected from the rDNAs of nine Stephanodiscus (>99.4% in 18S rDNA, >98.0% in 28S rDNA). Their genetic distances, however, were significantly different (Kruskal-Wallis test, p < 0.01) compared to two related genera, namely Cyclotella and Discostella. In addition, genetic distances of 18S rDNAs were significantly different (Student’s t-test, p = 0.000) against those of the 28S rDNAs according to individual genera (Cyclotella, Discostella, and Stephanodiscus). Phylogenetic analyses showed that Stephanodiscus and Discostella showed a sister taxon relationship, and their clade was separated from a cluster of Cyclotella (1.00 PP, 100% BP). This suggests that Stephanodiscus has highly conserved sequences of both 18S and 28S rDNA; however, Stephanodiscus is well-separated from other freshwater centric diatoms, such as Cyclotella and Discostella, at the generic level.
Lee, Dae-Seong;Nam, Youngwoo;Choi, Won Il;Park, Young-Seuk
Korean Journal of Ecology and Environment
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v.50
no.4
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pp.374-380
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2017
Pine wilt disease (PWD) is one of the hazardous pine tree diseases in whole world. In Korea, PWD has been spreading since it was first observed in Busan in 1988. Dispersion of PWD is mainly mediated by its vectors such as Japanese pine sawyer. In this study, we characterized environmental condition including meteorological factors, geographical factors, and land use factors influencing on the occurrence of PWD. The occurrence data of PWD were collected at 153 sites where were the initial occurrence sites of PWD in local government regions such as city, Gun, or Gu scale. We used Akaike Information Criterion (AIC) to evaluate the relative importance of environmental variables on the discrimination of occurrence or absence of PWD. The results showed that altitude, slope, and distance to road were the most influential factors on the occurrence of PWD, followed by distance to building. Finally, our study presented that human activities highly influenced on the long term dispersal of PWD.
Padmavathi, M.;Srinivas, K.P.;Reddy, Ch. V. Subba;Ramesh, B.;Navodayam, K.;Krishnaprasadji, J.;Babu, P. Ratan;Sreenivasulu, P.
The Plant Pathology Journal
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v.27
no.1
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pp.33-36
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2011
The genome of a potyvirus isolate associated with chlorotic spots and vein banding symptoms on Spathiphyllum spp., in Andhra Pradesh state, India was amplified by RT-PCR using degenerate potyvirus primers, amplicons cloned, and sequence (1.6 kb) analyzed. This virus isolate shared maximum identity of 74.8% and 80.2% at coat protein (CP) gene nucleotide (906 nucleotides) and amino acid (302 amino acids) levels, respectively with Dasheen mosaic virus (DsMV)-M13 isolate reported from China. But its 3'-UTR (258 nucleotides) had maximum identity of 62.5% with DsMV-Vietnam isolate. The deduced molecular weight of CP is 33.57 kDa and it contained DAG triplet in its N-terminal region. In CP amino acid based phylogenetic analysis, this virus isolate represented a separate branch but closer to DsMV isolates cluster. Based on the molecular criteria set for the discrimination of species and genus in the Potyviridae family, the present virus isolate was identified as a distinct virus species in the genus Potyvirus and proposed the name Spathiphyllum chlorotic vein banding virus (SCVbV).
Eclipta prostrata and E. alba are annual herbal medicinal plants and have been used as Chinese medicinal tonics. Both species are widely distributed in tropical and subtropical regions as well as in Korea. Both species have similar morphological features but E. alba has smoother leaf blade margins compared with E. prostrata. Although both species are utilized as oriental medicines, E. prostrata is more widely used than E. alba. Morphological semblances have confounded identification of either species. Here, we report the complete chloroplast genomes of both species to provide an authentication system between the two species and understand their diversity. Both chloroplast genomes were 151,733-151,757 bp long and composed of a large single copy (83,285-83,300 bp), a small single copy (18,283-18,346 bp), and a pair of inverted repeats (25,075-25,063 bp). Gene annotation revealed 80 protein coding genes, 30 tRNA genes and four rRNA genes. A phylogenetic analysis revealed that the genus Eclipta is grouped with Heliantheae tribe species in the Asteraceae family. A comparative analysis verified 29 InDels and 58 SNPs between chloroplast genomes of E. prostrata and E. alba. The low chloroplast genome sequence diversity indicates that both species are really close to each other and are not completely diverged yet. We developed six DNA markers that distinguish E. prostrata and E. alba based on the polymorphisms of chloroplast genomes between E. prostrata and E. alba. The chloroplast genome sequences and the molecular markers generated in this study will be useful for further research of Eclipta species and accurate classification of medicinal herbs.
Kim, Sang-Sook;Lee, Sang-Hyo;Rhyu, Mee-Ra;Kim, Young-Jin
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.30
no.3
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pp.473-479
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1998
Identification of rice species was attempted by three side (top, side and front) images of brown rice. Nine parameters of each image were area, aspect ratio, maximum diameter, minimum diameter, perimeter, roundness and red (R), green (G) and blue (B) pixel values of an image. Forty rice samples consisted of 19 species used for the study and total 27 image characteristics for a kernel were measured. For calibration and confirmation, 105 and 20 brown rice kernels per each sample were used respectively. For best identification of rice species, 24 image characteristics were selected for discriminant analysis. Average percentages for correct identification of rice species were 84.75% and 84.93% for calibration and confirmation data set, respectively. The highest and lowest percentage for correct identification were 99.05% for Nongan and 50.63% for Hwaseung respectively in calibration data. The confirmation data showed that the correct identification of Nongan or Paalgong was 100%, while that of Hwaseung was 47.62%. The result of the study showed that three side (top, side and front) image of brown rice was not suitable for identification of rice species suggesting that additional techniques are required for better discrimination of rice species.
Le, Duc Dat;Nguyen, Duc Hung;Zhao, Bing Tian;Min, Byung Sun;Woo, Mi Hee
Natural Product Sciences
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v.25
no.3
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pp.275-283
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2019
In this study, we described the new developed method to simultaneously discriminate two herbal drugs of Artemisiae Argyi Folium and Artemisiae Iwayomogii Herba using eight marker compounds (1 - 8) on an HPLC-PDA system. The developed method was applied to quantify the major components of two herbal drugs. The pattern analysis successfully discriminated and evaluated different components between Artemisiae Argyi Folium and Artemisiae Iwayomogii Herba. Results were used for classification of different species from collected samples.
Dried parts of the two species are difficult to distinguish morphologically, thus Codonopsis radix has been sold instead of Adenophorae radix in herbal medicine market. Therefore, this study was conducted to develop the genetic marker through the examination of the phylogenetic relationships between two Adenophora triphylla(Thunb.) A. DC. var. japonica Hara, two Adenophora radiatifolia Nakai, five Codonopsis lanceolata(Sieb. et Zucc)Trautv. using RAPD analysis. Fifty decarmer oligonucleotide primers were screened for the RAPD analysis, and four primers generated distinct RAPD markers specific to Adenophorae radix and Codonopsis radix. Based on the RAPD patterns, the genetic relationships between three herbal medicine were analyzed by UPGMA method. As a result, Adenophorae radix and Codonopsis radix were classified into two major subgroups on the basis of the genetic similarity coefficient. The specific RAPD patterns generated by the selected primers were reproducible from dried materials. Furthermore, the specific RAPD patterns were produced from the mixture of dried roots of A. triphylla and C. lanceolata. These results prone the usefulness of the RAPD analysis for the discrimination of pure materials from the mixtures of A. triphylla and C. lanceolata.
Follicular cystic ovary (FCO) is one of the most frequently diagnosed ovarian diseases and is a major cause of reproductive failure in mammalian species. However, the mechanism by which FCO is induced remains unclear. Genetic alterations which affect the functioning of many kinds of cells and/or tissues could be present in cystic ovaries. In this study, we performed a comparison analysis of gene expression in order to identify new molecules useful in discrimination of bovine FCO with follicular cystic follicles (FCFs). Normal follicles and FCFs were classified based on their sizes (5 to 10 mm and $\geq25mm$). These follicles had granulosa cell layer and theca interna and the hormone $17{\beta}$-estradiol ($E_2$)/ progesterone ($P_4$) ratio in follicles was greater than one. Perifollicular regions including follicles were used for the preparation of RNA or protein. Differentially expressed genes (DEG) that showed greater than a 2-fold change in expression were screened by the annealing control primer (ACP)-based PCR method using $GeneFishing^{TM}$ DEG kits in bovine normal follicles and FCFs. We identified two DEGs in the FCFs: ribosomal protein L15 (RPL15) and microtubule-associated protein 1B (MAP1B) based on BLAST searches of the NCBI GenBank. Consistent with the ACP analysis, semi-quantitative PCR data and Western blot analyses revealed an up-regulation of RPL15 and a down-regulation of MAP1B in FCFs. These results suggest that RPL15 and MAP1B may be involved in the regulation of pathological processes in bovine FCOs and may help to establish a bovine gene data-base for the discrimination of FCOs from normal ovaries.
Accurate methods for the identification of closely related species or breeds in raw and processed meats must be developed in order to protect both consumers and producers from mislabeling and fraud. This paper describes the development of DNA markers for the discrimination and improvement of Korean native pig (KNP) meat. The KIT gene is related to pig coat color and is often used as a candidate marker. A 538 bp fragment comprising intron 19 of the pig KIT gene was amplified by PCR using specific primers, after which the PCR amplicons of a number of meat samples from KNP and three major improved breeds (Landrace, Duroc and Yorkshire) were sequenced in order to find a nucleotide region suitable for PCR-RFLP analysis. Sequence data showed the presence of two nucleotide substitutions, g.276G>A and g.295A>C, between KNP and the improved pig breeds. Digestion of KIT amplicons with AccII enzyme generated characteristic PCR-RFLP profiles that allowed discrimination between meats from KNP and improved pig. KNP showed three visible DNA bands of 264/249, 199, and 75 bp, whereas DNA bands of 249, 199, and 90 bp were detected in the three improved pig breeds. Therefore, the 75 bp DNA fragment was specific only to KNP, whereas the 90 bp DNA fragment was specific to the improved breeds. The breed-specific DNA markers reported here that target the KIT gene could be useful for the identification of KNP meat from improved pig meats, thus contributing to the prevention of falsified breed labeling.
Kim, Eiseul;Cho, Eun-Ji;Yang, Seung-Min;Kim, Hae-Yeong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.31
no.2
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pp.280-289
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2021
Genetic markers currently used for the discrimination of Lactobacillus delbrueckii subspecies have low efficiency for identification at subspecies level. Therefore, our objective in this study was to select novel genetic markers for accurate identification and discrimination of six L. delbrueckii subspecies based on pangenome analysis. We evaluated L. delbrueckii genomes to avoid making incorrect conclusions in the process of selecting genetic markers due to mislabeled genomes. Genome analysis showed that two genomes of L. delbrueckii subspecies deposited at NCBI were misidentified. Based on these results, subspecies-specific genetic markers were selected by comparing the core and pangenomes. Genetic markers were confirmed to be specific for 59,196,562 genome sequences via in silico analysis. They were found in all strains of the same subspecies, but not in other subspecies or bacterial strains. These genetic markers also could be used to accurately identify genomes at the subspecies level for genomes known at the species level. A real-time PCR method for detecting three main subspecies (L. delbrueckii subsp. delbrueckii, lactis, and bulgaricus) was developed to cost-effectively identify them using genetic markers. Results showed 100% specificity for each subspecies. These genetic markers could differentiate each subspecies from 44 other lactic acid bacteria. This real-time PCR method was then applied to monitor 26 probiotics and dairy products. It was also used to identify 64 unknown strains isolated from raw milk samples and dairy products. Results confirmed that unknown isolates and subspecies contained in the product could be accurately identified using this real-time PCR method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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