본 연구에서는 해삼속의 폴리페놀과 플라보노이드의 생리활성물질을 추출하기 위한 용매분획의 수율을 확인하고자 연구를 시도하였다. 이미 보고된 사례에서 50%에탄올 추출 용매분획은 해삼 항산화 물질의 높은 수율 결과로 확인되었다. 해삼의 항산화물질 추출량을 결정짓는 것은 추출에 적용된 추출 용매분획의 결과로 확인되었다. 또한 '추출용매에 따라 해삼생리활성 항산화물질 추출함량이 크게 차이가 있다.'는 선행연구를 통해 용매분획추출에 관한 필요성의 결과를 얻었다. 50%에탄올 추출 용매분획의 해삼추출물에 포함된 페놀물질의 높은 항산화성분 추출 결과가 증명되었다. 추출용매분획 연구사례에서 수율이 가장 저조한 아세트산에틸 용매분획은 다른 용매분획에 비해 높은 페놀함량을 수확하여 항산화효과가 확인되었다. 이에, 추출 용매분획물의 적용에 따른 수율변화를 통해 항산화추출물의 높은 수율에 미치는 영향을 확인 하였다. 따라서 본 연구를 통해 50%에탄올 용매의 최적화된 해삼생리활성물질 추출 용매분획으로 검증되었다.
The antioxidant activity of solvent extracts isolated from barley leaves was investigated by measuring peroxide value. The fractions of methanol extract obtained from preparative TLC was also studies, with UV-Visible spectrum, total phenol contents and hydrogen donating ability(HDA) The antioxidant activity of various solvent extracts was, in decreasing order, methanol> ethyl ether> methylene chloride $\geq$ ethyl acetate $\geq$acetone> hexane. The antioxidant activity of the fractions of methanol extract was, in decreasing order, fraction 2> fraction 3> fraction 1 and their activity was all superior to that of tocopherol at 500 ppm level. All fraction(1, 2 and 3) exhibited a strong UV absorption at 280 m which would be specifically produced by phenolic compound. UV absorption at 280 m of fraction 2 was greater than those of fraction 1 and 3. In the visible spectrum of these fractions, the maximum .absorption wavelengths of fraction 1, 2 and 3 were 660, 460 and 460 m, respectively. Antioxidant activity of barley leaves seemed to be due to the flavonoids containing phenolic group by UV spectrum and total phenol content.
Boo, Hee Ock;Park, Jeong Hun;Kim, Hag Hyun;Kwon, Soo Jeong;Lee, Moon Soon
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.292-292
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2017
This study was conducted to evaluate the effect of anti-obesity and antioxidant enzyme activities in vitro by different solvent fractions from the roots of Codonopsis lanceolata. The cytotoxicity of different solvent fractions of C. lanceolata on 3T3-L1 preadipocytes were evaluated using the MTT assay, the rate of cell survival progressively decreased in a dose-dependent manner. Butyl alcohol fraction at $200{\mu}g/mL$ exhibited a pronounced cytotoxic effect (75.73%) on 3T3-L1 cell comparable to that of the hexane fraction (79.82%), methylene chloride fraction (84.02%), ethyl acetate fraction (87.62%) and DW fraction (86.30%) at the same concentration. The Oil Red O solution was used to determine whether different solvent fractions of C. lanceolata induce adipocyte differentiation in 3T3-L1 preadipocytes. Confluent 3T3-L1 cells were treated with $50{\mu}g/mL$ concentration of solvent fraction extracts from C. lanceolata. Inhibitory degree of lipid accumulation against solvent fraction extracts showed a significant level compared with the control. Both lipid accumulation and adipocyte differentiation showed relatively high effect on methyl chloride fraction. The root extract of C. lanceolata had the highest SOD enzyme activity of 84.5% in ethyl acetate partition layer and while water partition layer of diploid showed the lowest SOD enzyme activity of 57.9%. The activity of CAT, APX and POD showed a significantly higher activity in ethyl acetate partition layer compared with the other fraction. These results suggested that the roots of C. lanceolata may assist in the potential biological activity on anti-obesity and antioxidant capacity.
배추김치, 갓김치, 부추김치의 용매획분 추출물을 제조한 뒤 항산화관련 물질들의 함량을 측정한 결과 카로테노이드는 갓김치의 hexane층에서, 클로로필 함량은 부추김치의 hexane층에서 가장 높았고, 비타민 C함량은 갓김치의 EtOAc층과 BuOH층에서 가장 높게 나타났다. 총 폐놀화합물은 부추김 치의 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 갖김치 EtOAc층과 CH$_2$Cl$_2$층에 많이 함유되어 있었다. DPPH법을 이용한 유리기 소거능을 조사한 결과 부추김치 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 갓김치 EtOAc층에서 효과가 큰 것으로 나타났다. 김치종류별 용매획분을 hairless mouse의 피부균질액에 첨가하여 자외선 B를 조사한 후 지질과산 화물 함량을 측정한 결과 부추김치의 CH$_2$Cl$_2$층과 EtOAc층, 배추김치, 갓김치의 EtOAc층에서 낮게 나타나 항산화성이 높은 획분에서 피부의 광산화 억제효과가 큰 것을 알 수 있었고 김치 용매획분을 크림에 첨가하여 hairless mouse의 등에 직접 도포한 후 자외선 B를 조사하였을 때 대조군에 비해 갓김치의 hexane층, 부추김치의 hexane층과 BuOH층을 제외한 모든 용매획분이 피부홍반의 생성을 억제하였고 특히 갖김치 EtOAc층, 배추김치 CH$_2$Cl$_2$층, 부추김치 물층에서 피부보호효과가 큰 것으로 나타났다.
The antioxidant effects of dichloromethane, ethylacetate or water fraction of kimchi added to the 1% cholesterol diet were studied. Six New Zealand white rabbits in each group were fed either control diet (basal diet containing 1% cholesterol) or experimental diet containing dichloromethane (CH$_2$Cl$_2$), ethylacetate (EtOAc) or water ($H_2O$) fraction of kimchi in the control diet for 16 weeks. The amount of each solvent fraction of kimchi added to the experimental diet was equivalent to 5% of freeze-dried kimchi. Levels of hepatic lipid oxidation expressed as TBARS or peroxide value for the experimental groups were lower than that of control (p<0.05). Liver homogenated of the experimental group containing dichloromethane fraction of kimchi inhibited LDL oxidation in the presence of Cu++ by 46% (p<0.05). The activities of catalase, Glutathione peroxidase (GSH-Px), Cu, Zn-superoxide (Cu, Zn-SOD) and Mn-superoxide (Mn-SOD) of experimental groups were lower than those of control group. Low enzyme activities observed from the kimchi solvent fraction groups might be due to the level of lipid oxidation progressed less in these groups. The most significant antioxidant effects were observed from dichloromethane fraction of kimchi among the experimental groups. The major fatty acids of hepatic phospholipid of rabbit were C18:2 and C18:0. But the major fatty acid profile was changed into C16:0, C18:0, C18:1, and C18:2 when rabbit was fed 1% cholesterol diet for 16 weeks, and this profile was almost the same as in rabbit fed diet containing kimchi solvent fraction. The ratio for unsaturated fatty acid to saturated fatty acid decreased by cholesterol induced diet and it was not corrected by kimchi solvent fractions.
As a part of ongoing research to elucidate and characterize antioxidant and anti-inflammatory nutraceuticals, solvent-partitioned fractions from Spergularia marina were tested for their ability to scavenge radicals and suppress inflammation. The results of the 2',7'-dichlorofluorescein diacetate assay indicate that solvent-partitioned fractions from S. marina scavenged intracellular radicals in $H_2O_2$-stimulated mouse macrophages. The tested fractions decreased the generation of nitric oxide (NO) and the expression of inflammation mediators, namely, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and interleukin (IL)-6, by lipopolysaccharide (LPS)-induced mouse macrophages, indicating that S. marina decreases inflammation. Among all tested fractions [i.e., $H_2O$, n-buthanol (n-BuOH), 85% aqueous methanol (aq. MeOH), and n-hexane], the 85% aq. MeOH fraction showed the strongest antioxidant and anti-inflammatory response. The 85% aq. MeOH fraction scavenged 80% of the free radicals produced by $H_2O_2$-induced control cells. In addition, NO production was 98% lower in 85% aq. MeOH fraction-treated cells compared to LPS-induced control cells. The mRNA expression of iNOS and IL-6 was also suppressed in 85% aq. MeOH fraction-treated cells. The results of the current study suggest that the phenolic compound components of S. marina are responsible for its antioxidant and anti-inflammatory effects.
Solvent and TLC-fractionations of the root of Salvia miltiorrhiza have yielded the results as follows ; Solvent fractions Petr. ether Ether Ethy1 acetate Water Control 100uL 0 0.2 35.1 41.9 43.0 50ul 0.7 3.7 37.2 42.0 TLC-fractionation and the Cytotoxic activity Fractions I II III IV V VI Petr. ehter Control 100uL13.0 7.1 16.8 1.2 30.9 23.2 0.5 48.3 50uL 37.1 26.1 30.0 20.1 45.7 27.2 29.7 Among the solvent fractions the petroleum ehter fraction corresponding to the concentration of 20ug/ml has showed the strongest Cytotoxic activity. (no cell survived) A double dilution of the fraction(10ug/ml) still showed strong activity.(0.2 cells survived) The ether fraction contained strong activity. Of the fraction which have veen obtained by a prcparative silicagel TLC I, II, III & IV were cytotoxic, but V and VI were inactive Howevcr, it is worthwhile to note that no one of these has no strong Cytotoxicity as the pertoleum ether fraction itself. This observation says that the active fractions could be additive or synergic to each other. The most active fraction, IV, was scrached out from the TLC and its UV-spectrum taken. The absorption maxima were 207 and 272 nm, indicating the presence of a flavanone strucuture.
This study was designed to determine the antioxidant activity of solvent fractions of broccoli sprouts grown by controlling the growing environment at the plant factory system. Fractionation was achieved with chloroform, n-hexane, ethyl acetate, butanol, water by 70% EtOH extract of the broccoli sprouts. Each solvent fraction was put through TLC and HPLC to separate active components. Higher antioxidant activities were observed for the butanol and ethyl acetate layers. Further evaluation of each of the 5 layers (LH1 to LH5) of the butanol fraction showed that the refined LH3 extract had a high antioxidant effect. Components with similar Rf values from TLC had the same retention times and peaks in the HPLC analysis. It was also determined that the sulforaphane content was high at the chloroform and butanol layers and the sulforaphane was responsible for, the high antioxidant activity. Thus, to use for functional materials, the butanol extract/layer of broccoli sprouts is recommended as the most effective.
비파 부위별 추출물의 항균성과 항산화 활성을 조사한 결과는 다음과 같다. 과피 및 종자의 추출수율은 부탄을 분획물에서 각각 4.95%와 4.42%로 높게 나타난 반면, 잎, 씨를 제거한 과실과 과육은 물분획물에서 각각 5.10%, 23.60% 및 21.10%로 높게 나타났다. 항균활성은 잎과 씨를 제거한 과실의 경우 clear zone이 각각 Staphylococcus aureus에서 19 mm, 15mm, Escherichia coli에서 15 mm, 16 mm로 에칠 아세테이트 분획물에서 항균활성이 높게 나타났다. 비파의 메탄을 추출물을 극성과 비극성 용매로 순차별로 분획한 수소공여 능은 잎에서 82%, 씨를 제거한 과실 74%, 종자 68%, 과피 52% 및 과육 30%로 에칠 아세테이트 분획물에서 가장 높았다.
The antioxidative effects of solvent fractions of kimchi on LDL oxidatiojn in vitro as well as hypolipidemic effects of these fractions in rabbit fed atherogenic diet were studied. Methanol extract of deffated kimchi was fractionated sequentially with dichloromethane, ethylacetate, butanol and water. All solvent fractions of kimchi inhibited Cu2+-induced LDL oxidation. Among these fractions, the dicholoromethane fraction at the concentration of 25$\mu\textrm{g}$/mL showed the highest antioxidant effects against LDL oxidation in the aspect of inhibiting TBARS production by 28.03% or prolonged lag phase duration 2-fold compared to those of control. Based on the results from in vitro study, New Zealand White Rabbits grouped six each were fed for 8 weeks either basal diet containing 1% cholesterol or experimental diet containing dichloromethane, ethylacetate or water fraciton added to the basal diet. The amount of solvent fraction of kimchi added to the experimental diet was equivalent to 5% of freeze-dried kimchi. The hypolipidemic effects was observed from all experimental gropus, especially from dichloromethane fraction added group. The plasma and LDL cholesterol levels of this group were decreased by 49% and 47%, respectively while that of HDL increased by 91% compared to those of control. The calculated atherogenic index for the dichloromethane group was the lowest among groups. However, TG lowering effect of experimental group was not observed since solbent fraction of kimchi was used instead of freeze-dried kimchi. The TBARS concentration of LDL isolated from rabbit fed dichloromethane fraction was decreased 21% than that of control. These results indicate that active principles responsible for inhibiting LDL oxidation and lowering plasma cholesterol may present abundantly in dichloromethane fraction of kimchi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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