The cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) gene from Bacillus stearothermophilus NO2 was expressed in Saccharomyces cerevisiae 2805 under the adhl promoter. The CGTase was purified from S. cerevisiae 2805/pVT-CGTS. The purified enzyme exhibited a optima of activity around pH 7.0 and $65^{\circ}C$. Thermal stability of the enzyme was increased fairly as compared with the CGTase of B. stearothermophilus NO2. The conversion yield of cyclodextrin (CD) and the production ratio of $\alpha$-, $\beta$,-, ${\gamma}$-CD from starch were showed similarly aspect to the CGTase of B. stearothermophilus NO2.
The gene ADH encoding NAD-dependent alcohol dehydrogenase from Bacillus stearothennophilus was cloned and overexpressed as a GST fusion protein at a high level in Escherichia coli. The expressed fusion protein was purified simply by glutathione affinity chromatography. GST fusion protein was then cleaved by thrombin, while soluble enzyme was further purified by glutathione affinity chromatography. The recombinant enzyme had the same elctrophoretic mobility as the native enzyme from Bacillus stearothennophilus. The recombinant enzyme catalyzed the oxidation of a number of alcohols and exhibited high activities towards secondary alcohols. The $K_m\;and\;V_{max}$ values of the recombinant enzyme for ethanol were 5.11 mM and 61.35 U/mg, respectively. Pyridine and imidazole notably inhibited the enzymatic activity. The activity of the recombinant enzyme optimally proceeded at pH 9.0 and $70^{\circ}C$. The midpoint of the temperature-stability curve for the recombinant enzyme was approximately $68^{\circ}C$, and the enzyme was not completely inactivated even at $85^{\circ}C$. The recombinant enzyme showed a high resistance towards denaturing agents (0.05% SDS, 0.1 M urea). Therefore, due to its stability and relatively broad substrate specificity, the recombinant enzyme could be utilized in bio-industrial processes and biosensors.
In this study, the discharging effluents from have been 9 municipal wastewater treatment plants surveyed for 1 year-period. Statistics including probability distribution, cumulative occurrence concentration and other statistical parameters were presented. In addition, treatment performance and its stability were also discussed. Most of the plants, have an operational problem of high soluble organic content in the secondary effluent which may be associated with the integrated treatment of human and livestock manures. Nitrogen concentration in the effluents were usually higher during the period of summer and winter. It was found that this is mainly due to lack of the proper C/N ratio during the summer, or/and the effects of low temperature and less dilution by dry weather during the winter. Phosphorus concentration is sharply increased in June. Discussion with plant operators told that it is due to the dissolution of phosphate from the sludge accumulated in the primary settling tanks from the early spring to june. During this period, usually, sludge treatment line is highly overloaded with flush-outs of the sediments also stored in the bottom of combined sewer due to the low flow during winter season. Most of the plants can meet new effluent discharge limits of the nitrogen and phosphorus, and total coliform without further treatment.
Photoreactive polymers as a color filter resist containing both photoreactive acrylate and cinnamate double bonds were synthesized usin two step reactions. The chemical structures of the synthesized polymers were confirmed by $^1H$-NMR and FT-IR spectroscopy. The photoreactive polymers were quite soluble in most common organic solvents and produced excellent quality thin films by spin-coating. The photocuring kinetics of the acrylate and cinnamate double bonds were examined by FT-IR and UV- Vis spectroscopy, which confirmed the excellent photoreactivity of both the acrylate and cinnamate double bonds in the polymers. Upon UV irradiation, photocuring was almost completed within approximately 5 min, irrespective of the type of the prepolymers. The polymers also exhibited superior thermal stability, showing little change in transmittance in the visible region even after heating to $250^{\circ}C$ for one hour. Photolithographic micropatterns could be obtained with a resolution of a few microns.
Methyl 2,4-di-(2'-hydroxyethoxy)benzylidenecyanoacetate (3) was prepared and polymerized with terephthaloyl chloride to yield a novel Y-type polyester 4 containing 2,4-dioxybenzylidenecyanoacetate groups as NLOchromophores, which constituted parts of the polymer backbone. The resulting polymer 4 is soluble in common organic solvents such as acetone and N,N-dimethylformamide. Polymer 4 showed thermal stability up to 280 ${^{\circ}C}$ in thermogravimetric analysis with glass-transition temperature obtained from differential scanning calorimetry near 108 ${^{\circ}C}$. The second harmonic generation (SHG) coefficient ($d_{33}$) of poled polymer films at the 1064 nm fundamental wavelength was around $3.54\;{\time}\;10^{-9}$ esu. The dipole alignment exhibited a thermal stability up to near $T_g$ and no significant SHG decay was observed below 100 ${^{\circ}C}$ due to the partial main-chain character of polymer structure, which is acceptable for NLO device applications.
Biodiesel is methyl and ethyl esters of long-chain fatty acids produced from vegetable oils or animal fats. Lipase enzymes have occasionally been used for the production of this biofuel. Recently, biodiesel production using immobilized lipase has received increased attention. Through enhanced stability and reusability, immobilized lipase can contribute to the reduction of the costs inherent to biodiesel production. In this study, methanol-tolerant lipase M37 from Photobacterium lipolyticum was immobilized using the cross-linked enzyme aggregate (CLEA) method. Lipase M37 has a high lysine content (9.7%) in its protein sequence. Most lysine residues are located evenly over the surface of the protein, except for the lid structure region, which makes the CLEA preparation yield quite high (~93%). CLEA M37 evidences an optimal temperature of $30^{\circ}C$, and an optimal pH of 9-10. It was stable up to $50^{\circ}C$ and in a pH range of 4.0-11.0. Both soluble M37 and CLEA M37 were stable in the presence of high concentrations of methanol, ethanol, 1-propanol, and n-butanol. That is, their activities were maintained at solvent concentrations above 10% (v/v). CLEA M37 could produce biodiesel from olive oil and alcohols such as methanol and ethanol. Additionally, CLEA M37 generated biodiesel via both 2-step methanol feeding procedures. Considering its physical stability and reusability, CLEA M37 may potentially be used as a catalyst in organic synthesis, including the biodiesel production reaction.
A Softgel is an oral dosage form for medicine similar to capsules and softgel dosage form offers several advantages over other oral dosage forms, such as delivering a liquid matrix designed to solubilize and improve the oral bioavailability of a poorly soluble compound as a unit dose solid dosage form, delivering low and ultra-low doses of a compound. This study aimed to qualify a proprietary vegetable soft capsule which contains modified starch and carrageenan as capsule shell components compare to the conventional gelatin softgel. Four kinds of samples were prepared with vegetable and gelatin capsule shell, respectively. Morphology of capsule shell, mechanical strength of capsule, and hygroscopic properties were studied for comparing the quality attributes of softgel. Short-term stability against heat and moisture was also investigated in this study. Vegetable capsule shell showed better mechanical strength, physical stability and disintegration time for temperature and humidity than those of conventional gelatin capsule shell with four different filling materials used frequently as soft capsule form. Conclusively, this vegetable capsule shell polymer system can replace easily gelatin-shell systems and additionally allows encapsulation of lipid fills at high temperatures that are semisolid or solid-like at room temperature.
LEE Byeong-Ho;LEE Kang-Ho;YOU Byeong-Jin;SUH Jae-Soo;JEONG In-Hak;JUNG Woo-Jin;KANG Jeong-Oak
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.18
no.5
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pp.401-408
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1985
In order to develop new types of product which can offer a sanitary and preservative duality, and convenience to consumers in marketing and cooking particularly in urban area, two processing methods of ready-to-cook food materials with dark fleshed fishes like sardine and mackerel were investigated. A method applied, in this work, is processing of ready-to-cook sardine meat "surimi" in which sardine meat is treated with alkaline solution to stabilize myofibrillar proteins, washed thoroughly with water to remove soluble components, and added with a proper amount of polyphosphate and sorbitol to enforce the functional property of meat such as water holding capasity, elasticity, and gel strength. The textural properties of fish meat paste made from the "surimi" meat were greatly dependent upon the stability of myofibrillar proteins and the elimination of water soluble components. The salt soluble proteins of sardine meat were so unstable in post-mortem stage that the gel forming ability was lost within 3 days at $5^{\circ}C$ storage and 2 to 3 weeks even at $-20^{\circ}C$ although the freshness was well kept for a week at $5^{\circ}C$ and several months of storage at $-20^{\circ}C$. A proper way of treatment to keep the proteins stable was that fish meat must be washed with $0.4\%$ sodium bicarbonate solution followed by 3 to 4 times washing with water. This resulted in removal of $80\%$ water soluble proteins and 50 to $60\%$ lipids. The addition of polyphosphate and sorbitol affected the stability of proteins during the storage of "surimi" meat. When phosphate and sorbitol were added in the ratio of $0.3\%:\;0.3\%,\;0.6\%:\;3\%,\;0.6\%:\;6\%,\;0:\,0.3\%\;and\;0.3\%:\;0$, the gel forming ability terminated in 35 days, 21 days, 14 days, 14 days, and 14 days of storage at $-30^{\circ}C$, respectively, while that of the control was 7 days. And it was also noteworthy that at least 8.0 mg/g of salt soluble protein nitrogen content was required for gel formation.
The nylon (poly 6, 10) microcapsules containing ${\beta}-galactosidase$ were obtained by the interfacial polymerization of 1, 6-diaminohexane and sebacoyl chloride with ${\beta}-galactosidase$ from Escherichia coli. They were generally spherical and had a mean diameter of $80{\mu}$ with 45 % of the activity recovery. In particular, there was no transport hamper of lactose through the membrane of microcapsules. The characteristics of the microencapsulated enzyme were similar to those of soluble enzyme optimal pHs, $7.0{\sim}7.2$ for the soluble and $7.3{\sim}7.5$ for the microencapsulated ; optimal temperatures, $50^{\circ}C$ for both ; apparent $K_m,\;3.33{\times}10^{-4}(on ONPG),$$2.86{\times}10^{-3}$ M(on lactose) for the soluble and $5.28{\times}10^{-4}$ (on ONPG), $4.25{\times}10^{-3}$ M (on lactose) for the microencapsulated ; activation energies, 8.94 for the soluble and 9.78 Kcal/mole for the microencapsulated enzyme. Using this microencapsulated ${\beta}-galactosidase$, hydrolyses of lactose and milk lactose were carried out and 80 % of 5 % lactose solution and 70 % of lactose in skim milk were hydrolyzed in 40 hr at $27^{\circ}C$. The reusability and operational stability showed that the remaining activity was 50 % of the original activity after 5 runs and 120 hr of total operating time at $27^{\circ}C$.
Surface layers of stone cultural properties including the soluble salt need consolidation because they are mostly very weak. There is a lot of research on the penetration depth of consolidant in stone and the effect of consolidant on mechanical stability of deteriorated structure. But some conservation experiences show that consolidation with silicic acid ester is not successful on salt contaminated stone cultural properties. In this study, in order to assess the influence of soluble salts$(CaSO_4\;2H_2O,\;NaNO_3)$ on the efficiency of consolidation on the deteriorated stone cultural properties(Nationalgalerie, Berlin, Germany) sandstone samples have been soaked with the salts solution. The impregnation of consolidant based on ethyl filicate have been afterwards carried out on these samples. As a result, it confirms that the soluble salts act as a preventer or consolidation. They fill up the pores in the stone and prevent that sufficient amount of consolidant enter deeply into the stone. According to this result, if use silicic ethyl ester as a consolidant for the research object which is built by Nebra sandstone, desalination is necessary before the treatment with consolidant. But it is also reported by other researches that some soluble salts improve the consolidation effect. Therefore it should be necessary to pre-study about salt and its harmfulness before the consolidation treatment. In order to consolidate without the aggravative damage in salt contaminated stone cultural heritage, we must first of all study the relations among salt, stone and consolidant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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