• Applied Biological Chemistry
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• 제33권1호
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• pp.8-13
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• 1990

우리나라에서 생산되는 장려품종 중 팔달, 단엽, 장백, 백운, 장엽콩과 재래종 중 검정콩, 갈색아주까리콩 등 7품종을 대상으로 형태적 특성과 표피의 색, 고형분 및 단백질의 추출 수율, 콩의 색소용출속도 등을 조사하였다. 그 결과 콩 개체의 무게는 갈색아주까리콩이 가장 높고 단엽, 장백이 가장 낮은 값을 보였다. 표피의 색에서는 'L'값은 장백이 가장 높았으며 팔달, 백운, 장엽, 단엽 등도 비교적 높은 'L'값을 나타내었다. 'a', 'b'값에서는 장엽이 높았고 검정콩과 갈색아주까리콩이 비교적 낮은 'b'값을 보였다. 콩을 마쇄하여 물로 추출할 때 고형분과 단백질의 수율은 3회까지 대부분이 추출되었으며 이때 이들의 수율은 각각 73.2 %, 83.2 %이었다. 콩 표피의 색소의 용출은 추출온도와 시간에 따라 큰 영향을 받았다. 평형에 도달한 흡광도(A)와 추출온도(T)와의 관계는 A=aT+b의 관계로 표시할 수 있었으며, 색소용출 속도와 온도와의 관계는 $60^{\circ}C$를 중심으로 두개의 직선관계가 있었다. 이 관계에서 계산된 활성화에너지는 고온보다 저온이 더 높았고, Local 1과 Local 2가 가장 높은 활성화에너지 값을 보여 주었다.

• 한국식품과학회지
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• 제24권4호
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• pp.387-392
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• 1992

미역 추출액의 고형분과 단백질의 수율 및 농도를 증가시키기 위하여 HCl, 설탕, 소금, EDTA, SHMP를 첨가하여 추출액의 품질 특성에 미치는 영향을 조사하였다. 추출액은 분말 미역을 첨가하여 2시간 끓인 후 원심 분리하였다. $0.1{\sim}0.5N$ HCl를 첨가하였을 때 고형분과 단백질 수율 및 상징액율은 현저히 증가하였다. 산처리를 하지 않는 대조구의 고형분과 단백질 수율 23.20%와 4.87%에서 각각 52.48%와 36.73%로 증가하였으며 점도는 450 cps에서 20 cps 이하로 감소하였다. 설탕, 소금, SHMP, $Na_2EDTA$를 $0.5{\sim}3.0%$ 첨가하였을 때 고형분 농도와 수율은 $Na_2EDTA-SHMP-sucrose-NaCl$ 순으로 현저히 증가하였으며, $Na_2EDTA$ 3% 첨가하였을 때 고형분 수율은 55%로 가장 높았고 점도와 탁도는 SHMP와 $Na_2EDTA$ 첨가시 감소하였다.

• KSBB Journal
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• 제18권6호
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• pp.500-505
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• 2003

재조합 대장균에서 내포체 형태로 발현시킨 LK68을 생물학적 활성을 가진 native한 단백질로 재생시키기 위해서 PBA 크로마토그래피와 EBA 크로마토그래피를 이용한 고체상 재접힘을 수행하였다. 내포체와 세포파쇄액을 시작물질로 하여 재접힘 공정을 수행하였으며 총 단백질 회수율과 재접힘 수율을 비교한 결과, EBA 공정이 기존의 액상 재접힘이나 PBA를 이용한 재접힘 공정에 비하여 우수함을 확인하였다. 또한 Iysine binding, RP-HPLC, SEC-HPLC, Ellman method 등을 사용하여 분석한 결과 재접힘된 LK68이 native LK68와 동등함을 확인하였다. 본 연구를 통해 EBA 크로마토그래피를 이용한 재접힘 방법은 재접힘 단계의 수율을 향상시킬 뿐 아니라 공정 단계, 시간 등을 감소시켜 공정 성능을 전체적으로 향상시킬 수 있음을 제시하였다.

• 한국자기공명학회논문지
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• 제18권2호
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• pp.58-62
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• 2014

Human transmembrane proteins (hTMPs) are closely related to transport, channel formation, signaling, cell to cell interaction, so they are the crucial target of modern medicinal drugs. In order to study the structure and function of these hTMPs, it is important to prepare reasonable amounts of proteins. However, their preparation is seriously difficult and time-consuming due to insufficient yields and low solubility of hTMPs. We tried to produce large amounts of Syndecan-4 transmembrane domain (Syd4-TM) that is related to the healing wounds and tumor for a long time. In this study, we performed the structure determination of Syd4-TM combining the Polarity Index at Slanted Angle (PISA) wheel pattern analysis based on $^{15}N-^1H$ 2D SAMPI-4 solid-state NMR of expressed Syd4-TM and Molecular Dynamics (MD) simulation using Discovery Studio 3.1.

• KSBB Journal
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• 제16권2호
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• pp.146-152
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• 2001

rhGH-GST 융합단백질을 사용하여 재조합 대장균 세포 파쇄액으로부터 직접적으로 내포체의 solid-phase 재접힘을 수행할 수 있는 새로운 공정을 개발하였다. 그것은 고체 업자를 제거하는 동시에 초기에 목적딴백질을 흡착 포집할 수 있 는 expanded bed adsorption 크로마토그래피의 장점을 이용한 것이다. 세포 파쇄액 내 용해훤 내포체로부터의 풀린 융합단백질은 expanded bed adsorption 원리에 의해 STREAMLINE DEAE resin에 흡착되고 세포 찌꺼기 등 고체 입자물들은 위 방향 흐름에 의해 효과적으로 제거된다. Urea를 접차적으로 제거함으로써 융합단백질은 고체 matrix 표면에서 재접힘 된 후 염 놓도 구배에 의해 용출된다. 이 새로운 EBA-mediat$\xi$d 재접힘 방법은 응집현상을 획기적으로 줄이고 공정수율윤 향상시킬 뿐 아나라 공정단계 수를 줄일 수 있다. 이 공정은 우리가 알고 있는 한 세계에서 최초로 개발된 공정이며, 현재 single-chain polypeptide, affinity-tagged protein 등과 갈은 다른 행태의 단백질에 EBA를 사용한 재접힘 공정올 적용시키가 위한 연구가 진행되고 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제20권3호
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• pp.433-440
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• 1988

천연 멸치추출액의 수율과 관능적 품질의 향상을 위하여 마른 중멸치를 0.3N NaOH알칼리 용액으로 마쇄하고 $60^{\circ}C$에서 1시간, 3시 간, 5시간 처리한 뒤 중화시켜 알칼리성 및 중성단백질 분해효소로 4시간 동안 가수분해 시켰다. 알칼리 처리한 시료를 효소반응 시간별로 멸치 마쇄용액을 취하여 원심 분리시킨 상등액에 함유된 가용성 고형분, 단백질, 무기질 그리고 맛과 냄새에 대한 관능적 품질을 평가하였다. 그 결과 고형분의 수율은 0.3N NaOH로 5시간 처리한 시료에 alkaline protease로 1시간 반응시켰을때, 최고 76.4%가 회수되어 물로만 추출한 대조구보다 약 4배의 수율이 향상되었고. 조단백질의 수율은 최고 65.3%로 약 3.2배 였으며, 회분의 수율은 30-47%의 회분 수율범위를 보여 12.9%였던 대조구에 비하여 현저하게 증가하였다. 또한 맛이나 냄새와 같은 관능적 품질에서도 그 강도가 2-3배의 향상효과가 있었으며 효소를 처리한 시료의 기호도가 현저히 향상됨이 밝혀졌다. 이상의 결과에서 고형분, 단백질 및 회분수율과 관능적 품질을 고려할때 알칼리처리 3시간후 단백질분해 효소로 1-3시간 처리함이 멸치 추출액의 수율과 관능적 품질에 가장 좋은 것으로 평가되었다.

• BMB Reports
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• 제41권3호
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• pp.194-203
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• 2008

Nitrosative modifications regulate cellular signal transduction and pathogenesis of inflammatory responses and neuro-degenerative diseases. Protein tyrosine nitration is a biomarker of oxidative stress and also influences protein structure and function. Recent advances in mass spectrometry have made it possible to identify modified proteins and specific modified amino acid residues. For analysis of nitrated peptides with low yields or only a subset of peptides, affinity 'tags' can be bait for 'fishing out' target analytes from complex mixtures. These tagged peptides are then extracted to a solid phase, followed by mass analysis. In this review, we focus on protein tyrosine modifications caused by nitrosative stresses and proteomic methods for selective enrichment and identification of nitrosative protein modifications.

• 한국식품과학회지
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• 제24권4호
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• pp.382-386
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• 1992

열수출시 미역 추출액의 품질 특성에 미치는 온도의 영향을 조사하였다. 추출액의 고형분, 단백질의 농도와 수율은 초기추출시간 동안 추출 온도 $50^{\circ}C$에서 $100^{\circ}C$로 증가할수록 높아졌다. 그러나 상징액율은 $50^{\circ}C$와 $100^{\circ}C$에서 가장 낮은 값을 보였으며 $100^{\circ}C$에서 1시간 추출할 때 고형분과 단백질 수율은 각각 21.56%와 4.76%였다. 점도는 $100^{\circ}C$에서 2시간 추출할 때 가장 높았으며 다른 온도의 추출액 점도에 비해 $2.5{\sim}4.0$배 높았다. 탁도는 추출 1시간 이후 차츰 감소하였으며 고형분과 단백질의 초기 추출속도에서 계산된 활성화에너지는 1.18과 3.9 Cal/mole이었다.

• KSBB Journal
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• 제18권4호
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• pp.306-311
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• 2003

융합단백질의 절단을 위해 EK를 고정화하여 액상 절단반응과 같은 80％의 절단수율을 얻을 수 있었다. 그리고 니켈 친화칼럼을 이용하여 간단한 정제공정을 구축하였다. 공유결합한 EK의 경우 니켈친화 결합한 EK보다 높은 재접힘 수율을 나타내었고 풀림과 재접힘을 이용하여 효소의 초기 활성을 회복함에 따라서 반복사용을 통한 경제적인 절단공정을 구축할 수 있게 되었다. 그러나 고정화 과정에서 효소의 활성이 감소하는 문제점과 고정화 수율을 높이기 위한 연구가 필요하다.

• 한국균학회지
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• 제22권2호
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• pp.184-189
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• 1994

구름 버섯균(C. versicolor)를 고체배양(solid-substrate culture)하여 단백다당류를 생산하기 위한 각종조건을 검토하였다. 여러가지 고체재료가 이용될 수 있으나 배양 후 단백다당류의 열수추출 과정에서의 부적합성 등의 이유로 인하여 실질적으로 zeolite나 난 재배용 토양이 이용 가능한 천연고체 재료라고 볼 수 있다. Zeolite와 난 재배용 토양을 이용한 고체발효에서 단백다당류 생산에 미치는 탄소원의 영향을 검토한 결과 glucose, sucrose 및 starch에서 단백다당류 생산량이 높게 나타났으며, 질소원중에서는 bactosoytone과 peptone이 고체발효에 의한 단백다당류 생산에 가장 적합한 질소원으로 확인되었다. 단백다당류 생산을 위한 고체발효에서 최적 pH범위는 5-6이었고, 고체재료 100 g당 조단백다당류 생산량이 5-6 mg에 이르렀다. 배지조성별 단백다당류의 생산성 시험의 결과 C. versicolor의 최적배지 조성인 CVM에서 최고의 생산성을 보였으며, 종합적으로 균사성장에 적합한 조건에서 단백다당류의 생산성도 높다고 하겠다.