A photosynthetic bacterium strain P17 having high growth rate and assimilating ability of organic acids was isolated from several soil samples, which was identified as Rhodospirillum rubrum. Cultural conditions of the strain P17 were examined for the production of starter culture used in the treatment of organic waste water. The addition of organic acids mixture as carbon source containing 0.2% Na-acetate, 0.1% Na-propionate and 0.2% Na-lactate and 0.1% of yeast extract as growth factor stimulated the cell growth. The maximal cell production was obtained at $30^{\circ}C$, pH 7.0, 2,500 lux of illumination and $50{\sim}100\;rpm$ of agitation. Under the optimal conditions of batch and fed-batch culture systems in a Jar fermentor, 5.17 g/l and 7.93 g/l of cells were obtained after S days of cultivation, respectively. In continuous culture system, the cell productivity was 0.206 g/l/h at a dilution rate of 0.21 $h^{-1}$. When R. rubrum P17 was cultivated in a soybean curd waste water, initial COD level(3,240 mg/l) of the waste water was reduced to 250 mg/l after 4 days of cultivation.
A strain YB-9 was isolated from soil as a producer of the extracellular ${\beta}-D-galactosidase$, which catalyzes the hydrolysis of lactose. The strain YB-9 was identified as Streptomyces sp. on the basis of its cultural, morphological and physiological properties. After treating culture supematant of the isolate with ammonium sulfate $(15{\sim}70%)$, the precipitated protein was used as a crude ${\beta}-galactosidase$ for analyzing its reaction properties with $para-nitrophenyl-{\beta}-D-galactoside$$(pNP-{\beta}Gal)$ and lactose as substrates. The {\beta}-galactosidase showed its maximal activity at pH $6.0{\sim}6.5$ and $60^{\circ}C$. The hydrolyzing activity of ${\beta}-galactosidase$ for both $pNP-{\beta}Gal$ and lactose was decreased by galactose. Its hydrolyzing activity for lactose was slightly decreased by glucose, but the activity for $pNP-{\beta}Gal$ was increased to 1.3-folds by glucose. Especially, its hydrolyzing activity was not affected for lactose and was increased to 1.6-folds for $pNP-{\beta}Gal$ by xylose.
For the development of a multifunctional biocontrol agent, the siderophore-producing strain GL7 was isolated from a rhizosphere on chrome azurol S agar. The GL7 was identified as a strain of Pseudomonas fluorescents on the basis of their reactions to standard physicochemcial tests from Bergey's manual, API diagnostic test, and fatty acid analysis. P. fluorescents GL7 considerably inhibited spore germination and hyphal growth of phytopathogenic fungus Funsarium solani in a dual culture. In pot trials of bean with P. fluorescens GL7, the disease incidence was significantly reduced down to 5% from 70% of incidence in the untreated control. P. fluorescens GL7 also enhanced plant growth to nearly 1.5 times than that of the untreated control, promoting elongation and development of the roots. These results suggest that the plant growth-promoting P. fluorescens GL7 can play an important role in the biological control of soil-borne plant disease in a rhizosphere.
Actinomycetes, Gram positive soil bacteria, are valuable microorganisms which produce useful secondary metabolites including antibiotics, antiparasitic substances, anti-cancer drugs, and immunosuppressants. Although a major family of actinomycetes, known as streptomycetes, has been intensively investigated at the molecular level for several decades, a potentially valuable and only recently isolated non-streptomycetes rare actinomycetes (NSRA) family has been poorly characterized due to lack of proper genetic manipulation systems. Here we report that a PCR-based genome screening strategy was performed with approximately 180 independently isolated actinomycetes strains to isolate potentially valuable NSRA strains. Thanks to this simple PCR-based genome screening strategy we were able to identify only seven NSRA strains, followed by 16S rRNA sequencing for confirmation. Through further bioassays, one potentially valuable NSRA strain (tentatively named Nocardiopsis species MMBL010) was identified which possessed both antifungal and antibacterial activities, along with the presence of polyketide synthase and non-ribosomal peptide synthase genes. Moreover, Nocardiopsis species MMBL010, which was intrinsically recalcitrant to genetic manipulation, was successfully transformed via E. coli-driven conjugation. These results suggest that PCR-based genome screening, followed by the establishment of an E. coli-driven conjugation system, is an efficient strategy to maximize potentially valuable compounds and their biosynthetic genes from NSRA strains isolated from various environments.
90 wild Agaricus strains from China, including 44 Agaricus bisporus strains identified preliminarily by isozyme electrophoresis, were studied by the techniques of SRAP and ISSR. 18 special SRAP bands and 12 special ISSR bands were analyzed, the strains were clustered and a demdrogram was obtained. The results showed that the strains were divided into 2 groups, wild A. bisporus group and the other Agaricus group. It is similar to the result of isozyme electrophoresis. 41 wild A. bisporus strains from Sichuan and Tibet were divided into 4 groups based on their growing places, suggesting the regionally difference of the strains to be quite obvious. Some white wild A. bisporus strains from Xinjiang and Tibet had special patterns, resulting in lower coefficient values with other wild A. bisporus strains. The biological characteristics of three wild A. bisporus strains were analyzed, and the results showed: 1. The wild strains grew slowly on PDA medium with weak appressed mycelia, and grew normally in kernel or fermented cottonseed shell substrate. 2. They grew faster than control strain As2796 under lower temperature of $16^{\circ}C$, and higher temperature of $32^{\circ}C$, with optimum growing temperature of $20-24^{\circ}C$, which was $4^{\circ}C$ lower than that of control strain. 3. In the cultivation with manure compost via twice fermentation, the mycelia grew normally in compost and quite slowly in casing soil, and the fruitbodies occurred less and late with easily opening and low production. 4. The fruitbody was off-white with flat and scaled cap, long stipe and dark gill. The bisporus basidia occupied 70-80% and trisporus basidia 20-30% of the total basidia. 5. Heterokaryotic monospore isolates could fruit in cultivation, and the homokaryotic isolates could cross with those derived from overseas wild A.bisporus strains. 6. The electrophoresis phenotype of isozymes such as esterase etc. belonged to high production type (H type). 7. The RAPD patterns made much difference from those of high production, good quality or hybrid strains, which indicated that the wild strains produce a new kind of RAPD type.
In the present study, 2-D consolidation theory of the dredged clay by means of the horizontal drain method is proposed. The horizontal drain method to install the drains such as plastic drain board within the dredged clay is a soil improvement method to accelerate the consolidation by expelling pore water in the vertical direction along the horizontal drains. Based on the finite strain consolidation theory by Gibson et al., the partial differential equation of 2-D consolidation due to the horizontal drain is derived. The consolidation due to the horizontal drain can be illustrated from combined self-weight consolidation effect and consolidation effect by horizontal drains. For the prediction of consolidation settlement and degree of consolidation numerical analysis is suggested on the basis of Dufort-Frankel finite differential algorithm. Also, the analytical procedures proposed in this study are verified by the model tests, and the predictions of the consolidation settlement and degree of consolidation are compared with the results obtained from the tests for the dredged clay gathering at Siwha site in Ansan, Korea. For the predictions, the relationship void ratio vs effective stress and the relationship permeability vs void ratio of the dredged clay are obtained from the odometer tests. Additionally, the parametric study for consolidation settlement by variations of design parameters related with horizontal drain method is carried out. Based on the results of the parametric study, design .charts for the preliminary design are also proposed.
Keratin wastes are generated in excess of million tons per year worldwide and biodegradation of keratin by microorganisms possessing keratinase activity can be used as an alternative tool to prevent environmental pollution. For practical use of keratinase, its physicochemical properties should be investigated in detail. In this study, we investigated characteristics of keratinase produced by Xanthomonas sp. P5 which is isolated from rhizospheric soil of soybean. The level of keratinase produced by the strain P5 increased with time and reached its maximum (10.6 U/ml) at 3 days. The production of soluble protein had the same tendency as the production of keratinase. Optimal temperature and pH of keratinase were $40^{\circ}C-45^{\circ}C$ and pH 9, respectively. The enzyme showed broad temperature and pH stabilities. Thermostability profile showed that the enzyme retained 94.6%-100% of the original activity after 1 h treatment at $10^{\circ}C-40^{\circ}C$. After treatment for 1 h at pH 6-10, 89.2%-100% of the activity was remained. At pH 11, 71.6% of the original activity was retained after 1 h treatment. Although the strain P5 did not degrade human hair, it degraded duck feather and chicken feather. These results indicate that keratinase from Xanthomonas sp. P5 could be not only used to upgrade the nutritional value of feather hydrolysate but also useful in situ biodegradation of feather.
This paper describes a systematic way of simultaneously identifying the ambient pore pressure and the rigidity index $(=G/s_u)$ of soil by applying an optimization technique to the early part of piezocone dissipation test result. An analytical solution developed by Randolph & Wroth(1979) was implemented in normalized from to express the build-up and dissipation of excess pore pressures around a piezocone as a function of the rigidity index. An ambient pore pressure and optimal rigidity index were determined by minimizing the differences between theoretical and measured excess pore pressure curves using optimization technique. The effectiveness of the proposed back-analysis method was examined against the well-documented performance of piezocone dissipation tests(Tanaka & Sakagami, 1989), from the viewpoints of proper determination of selected target parameters and saving of test duration. It is shown that the proposed back-analysis method can evaluate properly the ambient pore pressure and the rigidity index by using only the early phase of the dissipation test data. Also, it is shown that the proposed back-analysis method permits the horizontal coefficient of consolidation to be identified rationally. Consideration for strain level of back-analyzed rigidity index shows that it corresponds to at least intermediate to large strain level.
In order to treat of alkaline dye-processing wastewater, alkalophilic strains biodegrading azo dye, Acid red 1, is isolated from natural system, and optimal culture conditions are examined using response surface analysis, statistical analysis system program. 15 different species which grow in alkaline culture media are isolated from the effluent and river soil discharged from wastewater treatment plant in dye industrial complex. One strain which has the best decolorization efficiency is chosen, and named as AR-1. The result of the examination of carbon, nitrogen and phosphorus sources which have influence on growth and decolorization reveals that optimum carbon, nitrogen and phosphorus sources are 1.0% fructose, 1.0% polypeptone, 1.0% yeast extract and 0.5% $K_2HPO_4$, respectively. In order to optimize of biodegradation conditions of dye by response surface analysis, the characteristics of decolorization and cell growth according to culture temperature and time are monitered. The result shows that the one is optimum 34.77$^{\circ}C$ for 12.97 hours; the other at 34.73$^{\circ}C$ for 12.96 hours. While, optimal conditions of culture that satisfy both cell growth and decolorization are the temperatures from 32.86$^{\circ}C$ to 36.36$^{\circ}C$ and the period of 10.96 to 15.75 hours, respectively.
Our previous report demonstrated successful isolation of soil-borne bacteria that suppressed the potential of Rhizoctonia solani AG2-2 (IV) causing turfgrass large patch disease when applied to Korean lawngrass (Zoysia japonica). The current study aimed to uncover the mechanisms of this antagonism of Rhizoctonia solani and to define culture conditions for the isolated microbes. We found that two Bacillus isolates, I-009 and FRIN-001-1 strains, produced cellulase and siderophore, but not chitinase, while the Pseudomonas YPIN-022 strain was found to release only siderophore, implying that three antagonistic bacteria commonly interrupt Fe uptake by the large patch pathogen. The I-009 and FRIN-001-1 isolates grew best at 35 and $30^{\circ}C$ in growth medium of pH 5 to 8 for 32 and 28 h, respectively, while optimum growth for the YPIN-022 strain was found at $35^{\circ}C$ at pH 5 to 9 for 24 h. Good growth of I-009 and YPIN-022 over 24 h was obtained in M9 minimal medium supplemented with 1% sucrose, 0.5% yeast extract and 0.1% potassium chloride. FRIN-001-1 grew well in M9 medium with 1% mannitol, 0.5% yeast extract and 0.1% potassium phosphate dibasic.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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