A bacterial strain producing high level of a phytase was isolated from cattle feces and identified as Bacillus subtilis, and designated as Bacillus sp. CF 5-26. The production of the phytase from Bacillus sp. CF 5-26 reached the highest level after 72 hours at $37^{\circ}C$. The optimum condition of the media for the production of phytase was 10% rice bran extract, 0.1% whey protein powder, $0.01%\;CaCl_{2},\;0.01%\;KH_{2}PO_4$. The phytase was purified 20.3 folds with ethanol precipitation, Sephadex G-100, CM Sepharose CL-6B and Sephacryl S-100-HR column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be 66 kDa on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified phytase activity was stable up pH 5.0, 7.0, 11.0 and the remaining activity was 50% when it was treated at $100^{\circ}C$ for 1 hour. The substrate specificity of phytase was most active against sodium phytate and inositol polyphosphate compound. And the phytase hydrolysed tripolyphosphate and pyrophosphate a little. The Km value for the sodium phytate was 0.64 mM and the Vmax value was $4.41\;{\mu}mol/min$.
It has been known that dietary phytate decreases the absorption of body zinc pool which is composed of the dietary and endogenous zinc in the body. The purpose of this study was to examine the effect of phytate on the absorption of total bodyzinc in Zn-depleted rats. Rats were Zn-depleted with either low(0.8%) or high(1.6%) Ca diet containing sodium phytate for 4 weeks. After zinc depletion, rats were assigned into phytate or non-phytate dietary groups within each low-or high-Ca dietary group. ant feces were collected for 2 weeks of the initial collection and 1 week after dietary crossover, during which the phytate and the non-phytate diet was switched over within the same Ca group. The content of Zn and Ca measured by atomic absorption spectrophotometer and phytate content was analyzed. food intake was higher in the high Ca group than in the low Ca group(p <0.0001), and was also higher in the non-phytate group than in the phytate group(p <0.0001). Food intake and phytate level affected body weight gain in rats(p <0.0001). Zinc excretion in the total feces was higher in the phytate group than in the non-phytate group at both low and high Ca level(p <0.0001), except during the crossover collection period in high Ca group. Calcium, however, didn't show any synergistic effect on phytate effect(p <0.05). This study showed that phytate decreased the absorption of total body zinc at both low and high Ca levels in Zn-depleted rats. A large portion of total body zinc originated from the endogenous zinc pool in these rats. The results of the present study showed the same effect of phytate on the endogenous zinc in Zn-depleted rats as in a previous study, confirming that phytate adversely affects zinc bioavailability, especially under marginal and poor zinc nutrition.
Endogenous zinc is important for maintaining zinc homeostasis because the size of endogenous zinc pool is almost 3-4 times bigger than that of dietary zinc. The purpose of this study was to examine the phytate effect on the reabsorption of endogenous zinc and the additional Ca effect on the phytate effect. Rats were fed a casein-based diet with added sodium phytate containing either high(1.6%) or low(0.8%) Ca concentrations for 4 weeks to reduce the body zinc pool. After the depletion period, $^{65}$ Zn was given by intraperitoneal injection to label the endogenous zinc pool. Rats were then assigned into phytate or non-phytate group within the same Ca group. feces were collected for 2 weeks of the initial collection period and 1 week after dietary crossover. The ratios of excreted fecal $^{65}$ Zn radioactivity of phytate group non-phytate group were determined as a measure of the phytate effect on the endogenous zinc. Mean fecal $^{65}$ Zn radioactivity was higher in the phytate group than in the non-phytate group during the entire 3 weeks of the collection period in the low Ca group, and during the initial collection period in the high Ca group(p <0.0001). This study showed an adverse phytate effect on endogenous zinc at both high and low dietary Ca levels. Elevated dietary Ca levels showed a synergistic effect on the phytate effect on endogenous zinc(p <0.05). These results imply greater phytate effect on zinc homeostasis rather than on zinc bioavailability through complexing with the endogenous zinc which is larger portion than the dietary zinc on zinc homeostasis.
Protective effects of natural components including genistein (4',5,7-trihydroxyisoflavone) from Glycine max MERRILL on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. Genistein $(10{\sim}100\;{\mu}m)$ suppressed photohemolysis in a concentration-dependent manner, and was more effective than the lipid peroxidation chain blocker, ${\alpha}$-tocopherol (Vit. E). Glycoside of genistein, genistin, the water-soluble antioxidant, L-ascorbate, and the iron chelator, myo-inositol hexaphosphoric acid dodecasodium salt (sodium phytate) did not exhibit protective effect against photohemolysis. L-Ascorbate and sodium phytate stimulated photohemolysis at high concentration $(500\;{\mu}m)$. ${\alpha}$-Carotene 3,3'-diol (lutein), a singlet oxygen $(^1O_2)$ quencher, exhibited pronounced protective effect, an indication that $^1O_2$ is important in photohemolysis sensitized by rose-bengal. Reactive oxygen scavenging activities $(OSC_{50})$ of natural antioxidants including genistein on reactive oxygen species (ROS) generated in $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system using the luminol-dependent chemiluminescence assay were in the order of sodium phytate > L-ascorbate > ${\alpha}$-tocopherol > genistein > genistin. $OSC_{50}$ value of genistein, genistin, ${\alpha}$-tocopherol, L-ascorbate, and sodium phytate were 41.0, 109.0, 9.0, 5.2, and $0.56{\mu}m$ respectively. The order of free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity $(FSC_{50})$ was L-ascorbate > ${\alpha}$-tocopherol > genistein > genistin. These results indicate that genistein can function as an antioxidant in biological systems, particularly skin exposed to solar UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and to protect cellular membranes against ROS.
SEO MYUNG-JI;KIM JEONG-NYEO;CHO EUN-AH;PARK HOON;CHOI HAK-JONG;PYUN YU-RYANG
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.4
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pp.745-748
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2005
A phytase from Aeromonas sp. LIK 1-5 was partially purified by ammonium sulfate precipitation and DEAE-Sephacel column chromatography. Its molecular weight was 44 kDa according to SDS-PAGE gel. Enzyme activity was optimal at pH 7 and at $50^{\circ}C$. The purified enzyme was strongly inhibited by 2 mM EDTA, $Zn^{2+},\;Co^{2+},\;or\;Mn^{2+}$, and activated by 2 mM $Ca^{2+}$. The K_m value for sodium phytate was 0.23 mM, and the enzyme was resistant to trypsin. The N-terminal amino acid sequence of the phytase was similar to that of other known alkaline phytases. The phytase was specific for ATP and sodium phytate, which is different from other known alkaline phytases. Based on the substrate specificity, the phytase may therefore be a novel alkaline phytase.
Phytase (myo-inositol hexakisphosphate phosphohydrolase: EC 3.1.3.8) hydrolyzes phytic acid (myo-inositol hexakisphosphate) to myo-inositol and monophosphates. In order to obtain phytase producing bacteria, many samples were collected from various soils. Among thirty-five phytase-producing strains, YH100 showed the highest phytase activity. In order to identify the selected YHlOO strain, the morphological and physiological characteristics were examined according to the method of Bergey's manual by 168 rRNA sequence, cellular fatty acids profile, O+C contents and physiological test using API 20E kit. The strain YH100 identified to be a genus of Enterobacter cloacae and was named as Enterobacter cloacae YHlOO. Optimum medium for the phytase production by the Entemhacter c!o([we YHlOO was composed of 2.0%(w/v) glucose, 1.0%(w/v) peptone, 1.0%(w/v) beef extract, 0.1 %(w/v) KCI. and 0.1 %( w/v) sodium phytate.
Effects of microwave heating on the content of phytic acid and phosphorus of soaked soybean were investigated. Phytic acid content of Danwon, Marly and Amsoy cultivars were found to be 19.19 mg, 18.38 mg, and 16.73 mg/g defatted soybean respectively. Inorganic phosphorus content of soybeans was significantly increased during microwave heating, while phytic acid and phytate phosphorus was gradually decreased. Microwave heating was more effective than autoclaving in reducing the phytate contents. It was also found that microwave heating to soybean of low moisture content was more effective than that of high moisture content for decreasing the phytic acid content. Soaking in 2.5% sodium chloride, 2% sodium bicarbonate, and mixed salt solution for 12 hrs was not effective on reducing the contents of phytic acid and phytate phosphorus, but microwave-heating after soaking in above solutions greatly decreased the contents of phytic acid and phytate phosphorus, whereas significantly increased inorganic phosphorus of soybeans.
A bacterial isolate derived from soil samples near a cattle farm was found to display extracellular phytase activity. Based on 16S rRNA sequence analysis, the strain was named Bacillus sp. T4. The optimum temperature for the phytase activity toward magnesium phytate (Mg-$InsP_6$) was $40^{\circ}C$ without 5 mM $Ca^{2+}$ and $50^{\circ}C$ with 5 mM $Ca^{2+}$. T4 phytase had a characteristic bi-hump two pH optima of 6.0 to 6.5 and 7.4 for Mg-$InsP_6$. The enzyme showed higher specificity for Mg-$InsP_6$ than sodium phytate (Na-$InsP_6$). Its activity was fairly inhibited by EDTA, $Cu^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Co^{2+}$, $Ba^{2+}$ and $Zn^{2+}$. T4 phytase may have great potential for use as an eco-friendly feed additive to enhance the nutritive quality of phytate and reduce phosphorus pollution.
Hue, Jin-Joo;Baek, Dong-Jin;Lee, Yea Eun;Lee, Ki Nam;Nam, Sang Yoon;Yun, Young Won;Jeong, Jae-Hwang;Lee, Sang-Hwa;Yoo, Han Sang;Lee, Beom Jun
Korean Journal of Veterinary Research
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v.47
no.4
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pp.449-456
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2007
The approval of use of certain food-grade phosphates as food additives in a wide variety of meat products greatly stimulated research on the applications of phosphates in foods. Although phosphates have never been classified as antimicrobial agents, a number of investigators have reported that phosphates have antimicrobial activities. Phytic acid is a natural plant inositol hexaphosphate constituting 1-5% of most cereals, nuts, legumes, oil seeds, pollen, and spores. In this study, we investigated antibacterial activities of sodium phytate (SPT), sodium pyrophosphate (SPP), sodium tripolyphosphate (STPP) on Salmonella typhimurium in tryptic soy broth and in row meat media including chicken, pork and beef. SPY, SPP and STPP at the concentrations of 0.5 and 1% dose-dependently inhibited the growth of S. typhimurium in tryptic soy broth at various pHs. The antibacterial activities of SPT and STPP were the stronger than that of SPP. In chicken, pork, and beef, SPT, SPP and STPP at the concentrations of 0.1, 0.5 and 1.0% significantly inhibited the bacterial growth in a dose-dependant manner (p < 0.05). The antibacterial activities of SPT, SPP, and STPP were more effective in chicken than beef. SPT and STPP at the concentration of 1% reduced the bacterial count by about 2 log units. The addition of SPT, SPP and STPP at the concentration of 0.5% in meats increased the meat pHs by 0.28-0.48 units in chicken, pork, and beef. These results suggest that SPT and STPP were equally effective for the inhibition of bacterial growth both in TSB and meat media and that SPT can be used as an animal food additive for increasing shelf-life and functions of meats.
The synthesis and characterization of amorphous calcium phosphate (ACP) nanoparticles were reported in this work. We show that relatively monodisperse ACP nanoparticles with a size of sub-100 nm can be prepared by a hydrothermal reaction of calcium chloride ($CaCl_2$) and disodium adenosine triphosphate ($Na_2ATP$) in the presence of sodium phytate as an additive. Their compositions and structures were confirmed using a series of material characterization techniques. Our results exhibit that ACP nanoparticles synthesized using sodium phytate enhanced the stability of maintaining their amorphous nature and prevented from a conversion to crystalline hydroxyapatite (HAP). ACP nanoparticles with the improved stability have potential uses in biomaterial applications in regenerative medicine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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