A protocol for the in vitro propagation of Chamaecyparis obtusa was established in the present study. Multi-shoots were initiated from apical shoot explants from germinants after 10 weeks of culture on Litvay medium (LM) supplemented with different concentrations of cytokinin. The effects of pre-treatment with high concentrations of cytokinin and varying concentrations (0.2 to 5.0 mg/L) of zeatin on in vitro shoot elongation and shoot multiplication were investigated. Optimal shoot growth was achieved on LM medium, with over 10-mm shoots after 10 weeks of culture. In the anti-browning tests, ethanesulfonic acid triggered the least browning in the shoot tips. The highest multi-shoot induction was observed in the 0.5-mg/L zeatin treatments, which yielded 80% induction of shoots after 10 weeks of culture, and maximum shoot elongation was observed in the LM basal medium without the hormone. The highest rooting rates were 65% under 0.2 mg/L indole-3-butyric acid.
This study was conducted to establish mass propagation system from the tissue culture using immature embryos in Eleutherococcus senticosus. Immature embryos from seeds were removed under the microscope and placed on MS, $MSB_5\;and\;B_5$ medium containing several plant growth regulators. While the calli were well formed on media containing 2 mg/l of 2, 4-D, 2 mg/l of 2, 4-D and 0.7 mg/l of TDZ, shoot regeneration was better on MS medium with combinations of high concentrations of TDZ and low concentrations of 2, 4-D. Treatment of 2, 4-D alone was better than treatment of TDZ alone in callus induction, but plant regeneration was reversed. The results of callus formation and shoot regeneration on $MSB_5\;and\;B_5$ media were similar to those of MS media. The rate of callus formation was nearly 100% when 2, 4-D was added to $B_5$, medium on concentration of 2 mg/l or 0.7 mg/l. TDZ showed very significant effect on the formation of multiple shoots.
An efficient in vitro propagation was established by using axillary bud explants of roseroot (Rhodiola rosea L.), which has been known as a medicinal plant in East Asia. Among various media tested, MS medium supplemented with 1.0 mg/L BA and 1.0 mg/L $GA_3$ was found to be the best for multiple shoot formation (15 axillary shoots per axillary bud). In addition 1/2MS medium containing 50 g/L sucrose was best for shoot elongation (7.8 cm) and increasing total chlorophyll contents (8.64 mg/g) best. Maximum number of roots (17.7 roots per explant) was observed on the medium without plant growth regulators. Propagated plants were successfully acclimatized to ex vitro conditions, with a survival frequency of 97% after 12 weeks. Most rooted shoots grew well and produced viable seeds when grown in vitro culture conditions. Therefore, R. rosea can be effectively propagated in vitro by the system we developed in this study.
In this study, a propagation characteristics of green kyllinga(Kyllinga brevifolia var. leiolepsis H.) was investigated. Two to three rhizomes(1st rhizome) arised from the basal part of main shoot at 4th leaf stage and were grown to extend on the soil surface. Then new shoots(lst tillers) emerged from every node of the 1st rhizome. Second rhizomes also arised from the basal part of lst tiller at the time of 4th leaf openning. With such a regularity, 5th rhizomes and about 688 shoots were produced from one plant during one year-cultivation without competition under the natural condition. The degree of vegetative growth and seed formation was 3 times and 2.5 times higher in rhizomeoriginated plant than in that from seed, respectively. The amount of seed formation and the 1000 seeds weight was highest in one planted on June 1 and Aug. 1, respectively. Short-day treatment of less than 14hr appeared to be necessary for the induction of flowering and it was effective as treated not during germination but since at least 2 leaf stage of green kyllinga. Each shoot individually responded to short-day. When plants were exposed to short-day (9hr, day / 15hr, night) treatment at the stage of 2-3 leaves, more than 7 cycles were required for flowering induction. Bolting in main shoot occurred after emergence of 4 leaves under the short-day condition. Exogenous $GA_3$ slightly accelerated the velocity of bolting only in short-day condition.
In this experiment, we report for the first time mass propagation by in vitro mircrotuberization of Codonopsis lanceolata. We first examined the effect of cytokinins on multiple shoot induction. 2.0 $mg{\cdot}L^{-1}$ of kinetin not only gave the highest rate of shoot induction (19.1%) but also the elongation of shoot (17.1 mm). Secondly, we investigated the effect of sugars on in vitro microtuberization from nodal segments. The diameter of tuberous roots was enlarged in the half-strength MS medium supplemented with 145.9 mM sucrose. Histological analysis revealed that the number of parenchymatous cell containing starch grains increased in the tuberous roots. In addition, unlike in non-tuberous root, vascular bundles were scattered inner cortex layer. Thirdly, in order to preserve and stimulate the germination, microtubers were stored at $4^{\circ}C$ refrigerator during 9 months and then transplanted to the artificial soils (vermiculrite : peatmoss = 1:1 v/v), resulting that the rates of survival and germination were 75% and 70%, respectively. These results indicated that mass propagation of C. lanceolata was achieved by in vitro microtuber formation, suggesting that this protocol might be applied for not only the propagation of elite clones but also conservation of C. lanceolata germplasm.
This study was conducted to establish the optimal condition for in vitro propagation of wild Cynanchum wilfordii. The highest in vitro seed germination rate of 91.6% was obtained from the seed treated with gibberellic acid ($GA_{3}$) (100 ppm) for 24 hours followed by cultured on Woody Plant Medium (WPM) media supplemented with 1.0 mg/L 6-benzyl adenine (BA). The best shoot height obtained (5.2 cm) in medium with 1.0 mg/L $GA_{3}$, but the plants was grown abnormally and eventually died. The highest number (2.4) was shown when shoot were in cultured on the media including 0.1 mg/L BA after 4 weeks. Root induction from shoot obtained in vitro culture was effective on ventilation and without plant growth regulators (PGRs) and root length was highly developed (2 cm) at 0.1 mg/L naphthalene acetic acid (NAA). The highest survival rate (70%) was when plantlet grew pre-ventilation of in vitro condition.
The influence of growth regulators (NAA and BA) and sucrose concentrations (0, 3, 5, 7, 9%) on in vitro rapid-propagation of virus-free sweet potato [Ipomoea batatas (L.) Lam.] was investigated with single-node or shoot-tip culture of two cultivars ('Matnami' and 'Shinhwangmi'). The survival rate and growth of shoot-tip explant was also investigated under the presence or absence of light (blue and red LED = 7:3, 150±5 μmol·m-2·s-1 PPFD) during minimal-growth in vitro conservation at 15℃. Vine length, vine diameter, fresh weight and dry weight were enhanced without callusing of explant in the MS medium supplemented with 0.2-0.5 mg·L-1 BA. The growth of single-node and shoot-tip explants were significantly enhanced with the increase of vine length, number of leaf, number of root, fresh weight, and dry weight in the solid medium containing 5% sucrose and 0.2 mg·L-1 BA. Vine elongation of shoot-tip explants were highest in the liquid medium containing 3% sucrose than the solid medium. The survival rate of minimal-growth in vitro conservation was 100% in 5 months under the presence of light (LED, 150±5 μmol·m-2·s-1 PPFD) at 15℃, but the explants in dark condition died in 3 months. The light was absolutely necessary for the in vitro conservation under minimal-growth conditions of virus-free sweet potato plantlets at 15℃, and the high density of explants (10 plantlets per Petri Dish) was increased the efficiency of mass conservation.
Aronia (Aronia melanocarpa, Black chokeberry) is an important cash crop in domestic agriculture. We investigated the effects of plant growth regulators on shoot proliferation and rooting using in vitro tissue culture. The most effective shoot multiplication was observed on WPM (woody plant medium) supplemented with 1.0 mg/L zeatin ($8.3{\pm}1.0$ shoots/explant), while the highest rooting rate was obtained from half-strength WPM with 3.0 mg/L IBA (8.8 roots/explant). The rooted plantlets all survived in the artificial soil mixture (with a mixture of peat moss : perlite : vermiculite, 1:1:1, v/v/v) and grew up relatively uniform, ranging from 14 to 16 leaves, 8 to 10 cm in stem height, and 2.3 to 2.8 mm in stem diameter. While experimenting with 5 different varieties of Aronia, we found out that each variety had different characteristics of shoot proliferation and rooting. The total numbers of proliferated shoots per variety is as follows: $17.4{\pm}0.8$ for Nero, 14 to 15 for Purple and Mackenzie, and 10 for both Viking and Odamamachiko. Rooting rates were also various depending on the variety: 88% of Odamamachiko, 80% of Viking and Purple, and 76% of Nero and 60% of Mackenzie shoots rooted. The survival rate of the rooted plantlets was from 92% to 100%, varying by type. Further growth appeared to be better in auxin-treated plantlets, compared to untreated ones. Our results showed the possibility of establishing an effective in vitro micropropagation system for Aronia melanocarpa.
Japanese pepper (Zanthoxylum piperitum Dc.) tree of selected genotype was propagated by a two-step method. Among the media tested, BTM promoted shoot height growth and DKW revealed as superior to micro-canopy increment Multiple shoot formation was greatest when the single shoot were subcultured on medium containing 0.89 $\mu$M BA alone. The numbers of survival shoots could be markedly increased by acclimatization of the multiplied shoots itself in plastic Petridish (punctured with pin on the top) for two weeks and subsequently transplanting each shoot onto peat plug system. After transplanting the micropropagules onto pots, prickliness characteristics seem to be transmitted to all plane produced from selected genotype.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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