Present study describes a method on the application of efficient tissue culture systems for the micro-propagation of juvenile and mature sawtooth oak(Quercus acutissima). Nodal segments with axillary buds were used as initial explant sources. WPM(Woody Plant Medium) was the best in growth and proliferation of shoot among the media tested. Although the single effect of zeatin revealed on two dorminant shoot elongation with normal growth until the elevation of levels up to 3.0mg/l, BAP($N^6$-benzyl amino purine) usually showed better response than zeatin on shoot multiplication and/or elongation. In addition, the incorporation of BAP and zeatin onto the culture media represents more effectiveness in shoot proliferation and its growth. Optimum concentrations of BAP and zeatin were 0.5 and 0.05~1.0mg/l, respectively. Ninety percent of the proliferated shoots was rooted on half-strength GD (Gresshoff and Doy, 1972) medium containing 0.5mg/l IBA(indole butyric acid) in 4 weeks after culture. More than 70% of the rooted plantlets survived after 5 months of transplanting into artificial soil mix containing equal amount of peatmoss and perlite. Among 27 plus tree clones which were grafted twice onto the juvenile rootstocks, only 4 clones revealed the possibility for shoot multiplication through tissue culture system. The capacity for the micropropagation using mature explant sources was highly depended on clonal differences compared with those of octet age. More than 90% of rooting ratio was obtained from the best responding clone. Among the 7 rooting media tested, GD medium was the best far rooting. The most effective rooting was obtained on half-strength GD medium containing 0.2 to 2.0mg/l IBA. More than 60% of rooted plantlets survived after 5 months of transplanting into the artificial soil mix.
An efficient method for the rapid propagation of Smilax china from axillary buds was established. Plants with thick leafage were selected from Korea native S. china population. Axillary buds of S. china collected from selected plant and were cultured in various culture media (2MS, MS, 1/2MS, WPM, B5 and SH medium). Shoot was induced from axillary bud on MS basal medium after 4 weeks of culture. 1/2MS medium showed a higher growth rate than those of the others, while the lowest shoot growth was obtained in 2MS medium. Among the sucrose concentrations, 5% sucrose was the optimum level for shoots growth from axillay buds. Among cytokinins, $0.5mgL^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) treatment showed the best performance on shoot multiplication, yielding average shoot multiplication forming about 2.4. Rooting was induced directly near the base of the shoot on 1/2MS medium containing with three-auxins ${\alpha}-napthalene$ acetic acid (NAA), indole acetic acid (IAA) and ${\beta}-indolebutyric$ acid (IBA) (0.5 and $1.0mgL^{-1}$). The $1.0mgL^{-1}$ IBA treatments induced earliest rooting with maximum of root number and root growth. These rooted plantlets were successfully transferred to pots for 4 weeks hardening process, and were transferred to soil with above 90% survival rate.
We micropropagated pear (Pyrus species) using shoot tips and nodal explants from three pear genotypes. The ability to establish shoot tip cultures, proliferate shoots, induce rooting, and acclimatize the resulting plantlets are all elements of in vitro micropropagation. Shoots were induced from shoot tips on Murashige and Skoog medium (MS) with five different plant growth regulator combinations. The highest shoot formation rates were achieved for the three genotypes using MS supplemented with 1.0 mg/L N6-benzyladenine (BA) and 0.1 mg/L gibberellic acid (GA3). The maximum shoot number and shoot length for the three cultivars were recorded with 2.0 mg/L BA and 0.2 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) in multiplication medium using nodal explants produced from microshoots. Nodal explants with one or two axillary buds cultured for three weeks initiated roots on medium supplemented with various concentrations of 1-naphthaleneacetic acid (NAA) or/and IBA in half-strength MS medium for adventitious rooting. The highest rooting response was with the combination of 0.2 mg/L NAA and 0.2 mg/L IBA. A combination of NAA and IBA resulted in a significant increase in the rooting ratio over NAA or IBA alone. In this medium, the root formation rate according to ranged from 68.9% for the BaeYun No. 3 genotype to 51.8% for the Hwanggeum genotype. We also investigated the influence of the concentration the polyamine phloroglucinol in rooting medium. For all three genotypes, the highest rooting ratio, longest root length, and greatest root number were observed in the treatments with 75-150 mg/L phloroglucinol. Most rooted plants were acclimatized successfully.
An effective in vitro multiplication method was developed for clones of Populus davidiana Dode. Ten different media were tested for their effect on shoot multiplication. Both MS and LP medium with 0.2mg/l BAP appeared to be the best for the shoot multiplication with the rate of 9 shoots per explant. There were significant differences among the clones in both multiplication rate and shoot growth. While some clones did not require BAP to promote shoot formation, others did. More than 60% of in vitro shoots rooted on the half-strength GD medium containing 0.2mg/l IBA.
This study was conducted to examine the position effect of axillary buds on shoot multiplication and rooting with 1-year-old seedlings of Quercus acutissima. Shoot multiplication was greatly affected by axillary bud position: Productivity of multiple shoots were decreased in the order of top, mid and basal explants respectively. The best shoot multiplication (mean 6.1 shoots per explant) was obtained on WPM medium containing $1.0mg/{\ell}$ BAP and $0.1mg/{\ell}$ NAA using basal explant after 4-week-culture. Rooting was also greatly influenced by position. Its percentage was increased in the order of top, mid and basal explant respectively. Root initiation was better and more rapid on 1/2MS medium than GD medium. High rooting percentage (100%) was obtained on 1/2MS medium containing $0.2mg/{\ell}$ IBA after 15 days culture. Sucrose concentrations did not effect on rooting. However root development and shoot growth were greatly affected by them. Root was developed shortly on 1-2% levels and shoot growth was getting retarded, whereas both of them did not show significant difference at 3-6% levels. Rotting was decreased on 7-8% levels gradually, but shoot and leaf condition was better than any other concentrations. Survival rate of rooted explants in pot was varied according to the position of explants. Seedlings of top part were survived up to about 50% but most of mid and basal part seedlings did not survive over 4 weeks even in high humidity condition. Seedlings in pots showed normal growth over 10 months but most of them showed the condition of premature leaf shedding.
A protocol is described for rapid multiplication of Zanthoxylum piperitum DC. (Rutaceae), an important aromatic and medicinal plant, through shoot-tip explant cultures. Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with various concentrations of N-6-benzyladenine (BA), N-6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ), in single or in combination with ${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid (NAA), was used to determine the rate of shoot proliferation. N-6-benzyladenine (BA) used at 0.5mg/l, was the most effective in initiating multiple shoot proliferation at the rate of 23 microshoots per shoot-tip explants after 40 days of culture. Shoot multiplication increased 1.2-fold in each successive subculture. Induction of rooting (98%) was achieved by transferring the shoots to the same basal medium containing 2 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). Plantlets went through a hardening phase in a controlled growth chamber, prior to in vivo transfer. These results represented that possible application for the mass production of plantlets through in vitro culture system of Zanthoxylum piperitum DC.
Kim, Tae-Dong;Kim, Nam-Ho;Park, Eung-Jun;Lee, Na-Nyum
Journal of Plant Biotechnology
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v.48
no.1
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pp.54-61
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2021
This work describe an efficient method for the shoot induction and plant regeneration of seedling-derived apical bud explants of Tilia mandshurica Rupr. & Maxim. The highest rate of shoot induction (82.2%) was obtained when apical bud explants from juvenile seedlings (5 months old) were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP). However, apical bud explants obtained from mature trees (12 years old) did not produce any shoots, even with BAP supplementation. Among the three cytokinins tested for shoot multiplication (BAP, zeatin, and kinetin), BAP was the most effective; the highest number of shoots per explant (2.1) was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP. In contrast, the longest average shoot length (3.0 cm) was observed after growth on MS medium with 2.0 mg/L zeatin. No multiplication occurred when apical bud explants were cultured with kinetin-supplemented media. During rooting of in vitro-elongated shoots, the highest rooting rate (100%) was observed in half-strength MS medium supplemented with 0.5 ~ 1.0 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) or 3.0 mg/L 1-naphthaleneacetic acid (NAA). During the acclimatization process, plantlets that were rooted on the IBA (0.5 mg/L)-supplemented medium had the highest survival rate (100%) and maximum root length (18.5 cm). These findings suggest that a low concentration (0.5 mg/L) of IBA is appropriate for the rooting and acclimatization of T. mandshurica. Plants were successfully transferred to the greenhouse with a 100% survival rate. This protocol will be useful for the large-scale propagation of Tilia species.
This study was conducted to establish practical micropropagation of jujube cultivars ('Geumsumg', 'Bokjo') by axillary bud culture. The results are summerized as follows : 1. Addition of activated charcoal to half-strength Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with 0.5mg/l benzylaminopurine(BAP) enhanced shoot and root growth. At 500mg/l activated charcoal level 'Geumsung' showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 6.4cm and 10.0, respectively. At 1,000mg/l activated charcoal level 'Bokjo showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 7.5cm and 12.4, respectively. 2. As indole-3-butyric acid(IBA) concentration increased, rooting and callus growth of microshoot were enhanced. The optimum IBA concentration for shoot elongation and multiplication was 1.0mg/l. 3. Growth responses of shoot-tip and axillary bud segments between two jujube cultivars were different. 'Geumsung' showed that axillary bud explants were about twice better than shoot-tip explants for shoot multiplication, but 'Bokjo' showed that shoot-tip explants mere better than axillary bud explants for shoot elongation and multiplication. 4. In acclimatization processes of plantlets produced in vitro, the survival of plantlets with only root primordia in soil medium was better than that of plantlets with several routs resulting in 97.8%. 5. In cutting of in vitro-derived microshoot, paclobutrazol was more effective than IBA, naphth-aleneacetic acid(NAA) and $Rooton^{(R)}$ in rooting and root growth.
This study was undertaken to develop an efficient propagation technique for mature Betula davurica. Using aseptic materials taken from in vitro culture, the effects of media and plant growth regulators on shoot proliferation and rooting were investigated. DKW medium turned out to be the best in shoot proliferation among the media tested. Whereas axillary buds were better culture material than apical buds in proliferation of shoots, apical buds were slightly better than axillary buds on shoot elongation. Neither 1 /2 MS nor WPM medium seemed to be suitable for shoot multiplication or elongation. When the explants were cultured on 1/2 MS medium, shoot elongation was retarded by forming big callus at the base. In the case of WPM, shoots could be formed normally, but they exhibited slow growing. NAA was so effective on in vitro rooting that more than 80% rooting could be achieved on half-strength DKW medium supplemented with 1.0 mg/L NAA after 4 weeks in cultures. Ex vitro rooting using elongated shoot was also applicable to rooting and acclimatization. Rooted plantlets were successfully acclimatized in an artificial soil mixture and grew normally. The results demonstrate that efficient mass propagation of mature B. davurica can be done through tissue culture.
Aronia (Aronia melanocarpa, Black chokeberry) is an important cash crop in domestic agriculture. We investigated the effects of plant growth regulators on shoot proliferation and rooting using in vitro tissue culture. The most effective shoot multiplication was observed on WPM (woody plant medium) supplemented with 1.0 mg/L zeatin ($8.3{\pm}1.0$ shoots/explant), while the highest rooting rate was obtained from half-strength WPM with 3.0 mg/L IBA (8.8 roots/explant). The rooted plantlets all survived in the artificial soil mixture (with a mixture of peat moss : perlite : vermiculite, 1:1:1, v/v/v) and grew up relatively uniform, ranging from 14 to 16 leaves, 8 to 10 cm in stem height, and 2.3 to 2.8 mm in stem diameter. While experimenting with 5 different varieties of Aronia, we found out that each variety had different characteristics of shoot proliferation and rooting. The total numbers of proliferated shoots per variety is as follows: $17.4{\pm}0.8$ for Nero, 14 to 15 for Purple and Mackenzie, and 10 for both Viking and Odamamachiko. Rooting rates were also various depending on the variety: 88% of Odamamachiko, 80% of Viking and Purple, and 76% of Nero and 60% of Mackenzie shoots rooted. The survival rate of the rooted plantlets was from 92% to 100%, varying by type. Further growth appeared to be better in auxin-treated plantlets, compared to untreated ones. Our results showed the possibility of establishing an effective in vitro micropropagation system for Aronia melanocarpa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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