Molecular analysis has been done for characterization of the interactions between three beet curly top virus (BCTV) strains and two Arabidopsis ecotypes in terms of virus inducible disease symptoms and infectivities. The total DNA was isolated from three tissues (shoot tips, infection origins and roots) of virus infected plants and this DNA was analyzed by quantitatively and qualitatively to elucidate virus movement and symptom development. CTV-Worland infected Col-O and Sei-O showed only symptom shown in hypersusceptible ecotype Sei-O by BCTV-worland was shoot tip stunting. Kinetics of virus DNA accumulation of three different viruses indicated that roots contained more virus DNA than shoot tips or infection origins, and that disease symptom severity was strongly correlated with virus DNA accumulation. These results suggest that the mild and Worland-specific symptoms shown in Sei-O by BCTV-worland are caused by the interactions of host factors provided by hypersusceptible ecotype and viral factors of mild strain.
Ko Jeong-Ae;Choi Jeong-Ran;Xudong He;Kim Hyun-Soon
한국자원식물학회지
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제19권3호
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pp.432-435
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2006
A rapid and mass propagation method for multiple shoots and plant regeneration using bulb scales of Muscari comosum var. plumosum were developed. In vitro different parts of bulb scale as explants were cultured on 11 kinds of MS (1962) media supplemented with various plant growth regulators to induce shoot and callus. A combination of 2.0 mg/L 6-BA and 2.0 mg/L IBA on MS medium was the most favorable and induced the highest production (80%) of shoot formation after 30 days. We also found that the middle part of bulb scale was the best for mass propagation of Muscari comosum var. plumosum of which production could reach 64.4%.
Black shoot blight disease caused by Erwinia pyrifoliae has serious impacts on quality and yield in pear production in Korea; therefore, rapid and accurate methods for its detection are needed. However, traditional detection methods require a great deal of time and fail to achieve absolute quantification. In the present study, we developed a droplet digital polymerase chain reaction (ddPCR) method for the detection and absolute quantification of E. pyrifoliae using a pair of species-specific primers. The detection range was 103-107 copies/ml (DNA templates) and cfu/ml (cell culture templates). This new method exhibited good linearity and repeatability and was validated by absolute quantification of E. pyrifoliae DNA copies from samples of artificially inoculated immature pear fruits. Here, we present the first study of ddPCR assay for the detection and quantification of E. pyrifoliae. This method has potential applications in epidemiology and for the early prediction of black shoot blight outbreaks.
Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Park, Ho Ki;Chon, Sang Uk;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권1호
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pp.39-43
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2004
A successful, efficient system for multiple shoot induction and plant regeneration of soybean (Glycine max) was established. Four soybean genotypes were compared for organogenic responses on various media cultured under light conditions. The adventitious shoots (98%, 2.6 shoots/cotyledon) directly from one-day-old cotyledon after germination induced by the hormone treatment and its efficiency was higher than any other conditions. The optimal medium for the induction of multiple shoots from cotyledon in Pungsannamulkong(shoot formation rate, 98%), Lx 16 (83%) and IIpumgeomjeongkong(63%) was MS medium supplemented with 2 mg/L BAP, but for Alchankong(75%), MS medium supplemented with 1mg/L zeatin and 1mg/L IAA, 3% sucrose, 4% Phytagel. Higher root induction (88%) was observed from the shoots placed on rooting medium (hormone-free MS basal). Plantlets were transferred onto the same medium supplemented with 1% activated charcoal for further development. With this treatment, regenerated plantlets were obtained within 7-8 weeks (shoot induction for 4 weeks, rooting and shoot elongation for 3-4 weeks).
Albino Margareth M.C.;Vianna Giovanni R.;Falcao Rosana;Aragao Francisco J.L.
Journal of Plant Biotechnology
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제7권4호
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pp.267-272
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2005
Common bean (Phaseolus vulgaris L.) plants were regenerated via organogenesis from mature embryonic axes, cultured on MS medium supplemented with ildole-3-ecetic acid (IAA) and thidiazuron (TDZ) for one week in the dark. Embryonic axillary regions were excised, longitudinally cut to split the both sides, and cultured for two weeks on MS medium supplemented with IAA and TDZ. The combination 0.5 mg $l^{-1}$ TDZ/0.5 mg $l^{-1}$ IAA presented the higher efficiency in shoot regeneration and the combination 0.5 mg $l^{-1}$ TDZ/0.25 mg $l^{-1}$ IAA presented the higher efficiency in conversion of shoots to plants. Regenerating explants were transferred to MS medium containing 1 mg $l^{-1}$ BAP for shoot development. All elongated shoots were rooted in vitro, presented normal phenotype and produced viable seeds. Histological analysis confirmed the mode of regeneration as de novo shoot organogenesis.
The goal of this research was to develop an efficient cryopreservation protocol for germplasms of yam (Diosorea batatas), that were cultivated in Korea. Comparative studies with four other cryogenic techniques and subsequent experiments for shoot regrowth were conducted. in vitro-grown shoot-apices of the D. batatas were successfully cryopreserved by encapsulation-dehydration. The maximum survival of shoot-apices could be achieved when the precultured (with 0.3 M of sucrose for one day) and encapsulated (with a 3%(w/v) Na-alginate solution) apices were dehydrated for $3.5{\sim}4\;h$ prior to direct immersion in LN (liquid nitrogen). The frequency of regrowth rate of cryopreserved apices was not decreased during 3-month storage period. The thawing method markedly affected survival of the cryopreserved apices, and thawing at $40^{\circ}C$ for 3 min produced the best results. When cryopreserved apices were post-cultured on the post-culture medium (MS), supplemented with $0.2mgl^{-1}$ of BA ($N_6$-benzyladenine) and $0.2mgl^{-1}$ of kinetin, they showed direct shooting without callusing.
To evaluate the leaf shoots and stem barks of Kalopanax pictus (Araliaceae) as an edible vegetable and a traditional medicinal drug, respectively, the compounds of syringin, liriodendrin, astragalin, quercetin, and kalopanaxsaponins were quantitatively measured by HPLC analysis. The leaf shoot exhibited low contents of syringin, liriodendrin and kalopanaxsaponins but a high chlorogenic acid content, whereas the grown leaves contained very high amounts of kalopananxsaponins. In contrast, the stem bark had very high amounts of syringin and liriodendrin and relatively low kalopanaxsaponins. In particular, the kalopanaxsaponin contents were rapidly increased with monthly variation until October but decreased from September. It was also observed that the leaf shoot contained chlorogenic acid by 30.73 mg/g and the barks showed the concentration of liriodendrin by 20.75 mg/g. These results indicate that high contents of syringin and liriodendrin in the stem bark and high contents of chlorogenic acid in the leaf shoot support scientific bases on the traditional uses of K. pictus as a medicinal drug and a functional food, respectively.
연초 crown gall tumor와 genetic tumor의 형성시 형태적 특성과 조직배양시 식물호르몬에 대한 반응을 조사하였다. Crown gall tumor는 A. tumefaciens C58을 감염시켜 형질전환된 tumor조직으로부터 획득하였으며, genetic tumor는 N. glauca (2n=24)와 N. langsdorffii (2n=18)의 종간교배에 의하여 유기된 잡종식물체에서 자발적으로 발생한 tumor조직으로부터 획득하였다. 형성된 crown gall tumor, genetic tumor및 teratoma shoot의 형태적 특성은 매우 비슷하였으며, 식물조직배양시 식물호르몬이 전혀 첨가되지 않은 기본배지에서 생장이 왕성하였다. Crown gall tumor는 식물호르몬 무첨가배지에서 전형적인 tumor callus가 형성되었으며 teratoma shoot도 형성되었다. 반면에 genetic tumor는 2,4-D 0.5mg/L 첨가된 배지에서 tumor callus가 형성되었으며, 식물호르몬 무첨가배지에서는 많은 teratoma shoot가 형성되어 식물호르몬의 조절에 의해서 phenotype을 거의 비슷하게 할 수 있었다. Genetic tumor는 재분화시 정상적인 식물체보다는 뿌리를 갖지 못하는 teratoma shoots가 형성되는데 외부에서 인위적으로 식물호르몬인 IAA와 GA, 그리고 active carbon을 첨가하여 완전한 식물체를 생산하는 데는 실패하였다. 그러나 간혹 식물호르몬 무첨가배지에서 뿌리를 갖는 정상식물체로 생장하는 shoot가 형성되었는데 이런 식물체에서도 생장하면서 줄기부분에서 다시 genetic tumor가 형성되었으며, 잎절편을 다시 식물호르몬 무첨가배지에 접종할 경우에도 teratoma shoots를 형성하였다.
마늘의 경정을 기내배양하여 대량의 기내종구를 생산하기 위한 다신초의 유기 및 기내구의 비대조건을 찾고자 배지의 당의 농도를 다르게 하고 또한 생장조절물질을 첨가하여 신초의 대량발생 여부를 확인하였으며, 대형배양용기를 이용하여 대량생산을 하기 위한 tank배양에서 신초의 분화와 기내구의 발달에 관하여 검토하였다. 경정배양에서의 shoot 발생이나 기내구 형성 모두 3% sucrose 첨가 MS고체배지에서 8% 보다 양호하였으며, 생장조절물질의 효과는 2 mg/L 2iP와 0.2 mg/L IAA의 혼합처리에서 shoot 발생과 bulb의 형성수가 양호하였다. 이 처리구에서 발생한 shoot와bulb의 수는 각각 3.3 및 2.7개로 나타났다. 다신초를 유도할 수 있는 조건의 배지에서 경정을 2개월 동안 배양하여 다신초를 분화시킨 후, 20 L water tank를 이용하여 sucrose 농도를 3%와 8%로 설정한 MS액체배지에 옮겨 45일간 배양한 후에 bulb형성을 조사하였을 때 유식물체의 생육에 있어서는 3% sucrose 첨가조건에서 8% 첨가배지보다 양호하였다. 그러나 기내구의 형성이나 생장에 있어서는 sucrose의 농도가 8%일 때 보다 효과적이었다. 경정배양에서의 다신초의 초기생산에는 3% sucrose조건에서 양호한 효과를 보이고 있으므로 마늘의 인경구를 대량으로 생산하기 위해서는 다신초의 생산과 구비대 과정을 구분하는 2단계 배양법을 도입하는 것이 유리할 것이다. Tank배양시 배지에 0.2 mg/L BA, 0.02 mg/L NAA를 첨가한 처리에서 양호하였으며 NAA 농도가 높을 수록 유식물체의 생육이나 구비대의 효과는 현저하게 저하되었다.
Fast and accurate diagnosis is needed to eradicate and manage economically important and invasive diseases like fire blight. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) is known as the best on-site diagnostic, because it is fast, highly specific to a target, and less sensitive to inhibitors in samples. In this study, LAMP assay that gives more consistent results for on-site diagnosis of fire blight than the previous developed LAMP assays was developed. Primers for new LAMP assay (named as DS-LAMP) were designed from a histidine-tRNA ligase gene (EAMY_RS32025) of E. amylovora CFBP1430 genome. The DS-LAMP amplified DNA (positive detection) only from genomic DNA of E. amylovora strains, not from either E. pyrifoliae (causing black shoot blight) or from Pseudomonas syringae pv. syringae (causing shoot blight on apple trees). The detection limit of DS-LAMP was 10 cells per LAMP reaction, equivalent to $10^4$ cells per ml of the sample extract. DS-LAMP successfully diagnosed the pathogens on four fire-blight infected apple and pear orchards. In addition, it could distinguish black shoot blight from fire blight. The $B{\ddot{u}}hlmann$-LAMP, developed previously for on-site diagnosis of fire blight, did not give consistent results for specificity to E. amylovora and on-site diagnosis; it gave positive reactions to three strains of E. pyrifoliae and two strains of P. syringae pv. syringae. It also, gave positive reactions to some healthy sample extracts. DS-LAMP, developed in this study, would give more accurate on-site diagnosis of fire blight, especially in the Republic of Korea, where fire blight and black shoot blight coexist.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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