복숭아 펄프를 11,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 serum과 불용성 펄프를 분리하였고, serum을 $50{\sim}55^{\circ}C$, $30{\sim}50\;mmHg$에서 농축하면서 초기에 발생하는 증기를 회수하여 방향성분 획분으로 하였다. 방향성분 획분은 serum의 양에 대하여 $0{\sim}5%$(AR-1), $5{\sim}10%$(AR-2), $10{\sim}15%$(AR-3), $15{\sim}20%$(AR-4)로 하였다. 방향성분 획분의 휘발성 향기성분은 DHC법에 의하여 포집하였고, 포집한 향기성분을 동정하기 위하여 GC/MS를 사용하여 분석하였다. 복숭아 펄프의 serum 분리율은 70.5%였으며, 대부분의 향기성분들은 serum에서 더 높게 나타났다. Ethylene, benzaldehyde, l-limonene, ${\gamma}-dodecalactone$ 등의 31종의 향기성분이 확인되었으며, 향기성분의 상대적인 총량은 AR-1에서 AR-4로 갈수록 감소하였으며 피크의 면적 및 갯수도 점차적으로 줄어들었다.
두충잎에서 인간대장암에세포 HCT-116에 세포증식 억제효과를 나타내는 성분을 silica gel column chromatography TLC로 분리하고 HPLC로 정제한 다음 UV-visual spectro-photometer에 의한 흡수 spectra 특성 HPLC에 의한 retention time과 분리패턴 및 FAB/MS로 분자량을 잠정적으로 동정한 결과 TLC 상에서 분리된 Rf 0.19 band 의 화합물은 chlorophyll a에서 $Mg^{2+}$이 제거된 pheophytin a로 Rf 0.25 band의 화합물은 pyropheophytin a로 확인되었다. 동정된 화합물들의 암세포 억제작용을 확인하기 위해 두충잎의 petroleum ether extract column chromatography로 분리한 분획물 및 TLC에서 분리된 각 band들의 cytotoxic activity을 in vitro에서 HCT-116 cancer cell을 사용하여 측정한 결과 모든 시료에서 암세포 증식억제 현상을 보였으며 특히 Rf 0.19와 Rf 0.25 band에서 분리된 화합물들에서 강하게 나타났다. 이 결과로 볼 때 두충잎에서 분리한 클로로필 유도체는 인간대장암세포인 HCT-116 cell에 대해 강한 항암작용이 있는 것으로 생각된다.
The present investigations were carried out for the purpose of making clear the fundamental features of the seasonal variations in carrageenan content and its chemical composition. The samples, Chondrus ocellatus, were collected every month from the same locality on the coast of Haewundae from March, 1975 to February, 1976, and analyzed monthly to determine their carrageenan content, sulphate and 3,6-anhydro-D-galactose over a year period. En addition, some chemical characteristics were also tested on the fractions separated by the different concentrations of potassium chloride. In seasonal variation, the maximum carrageenan content occurred from summer through autumn, and the minimum in winter, especially in February. It is noted in the seasonal variations of the sulphate content of total carrageenan and three fractions that the maximums appreared in October and minimums in february. With seasonal variations of percent 3,6-anhydro-D-galactose of total carrageenan and three fractions, maximum values occur in June and minimum values in December. Seasonal variations in sulphate and 3,6-anhydro-D-galactose contents of the three fractions were on the whole similar in mode of variation, and there could be no substancial differences. Seeing seasonal variations in the sulphate and 3,6-anhydro-D-galactose contents of three fractions, carrageenan extracted from the algae gathered in spring shelved higher portion of fraction I than that gathered in autumn. In these respects, it seems that a more weakly gelling k-carrageenan exists in the spring than in the autumn.
The outer bark of Prunus sargentii was collected, air-dried and extracted with 70% aqueous acetone. Then it was successively partitioned with n-hexane, dichloromethane ($CH_2Cl_2$), ethyl acetate (EtOAc) and $H_2O$. From the EtOAc soluble fraction, four compounds were isolated by the repeated Sephadex LH-20 column chromatography. The isolated compounds were determined as (+)-catechin (1), (-)-epicatechin (2), taxifolin (3), and neosakuranin (4) by the spectroscopic analysis including $^1H$, $^{13}C$-NMR, and 2D-NMR spectrometers. The antioxidative activities on the isolated compounds and the separated fractions were evaluated by DPPH radical scavenging assay. The crude, EtOAc, and $H_2O$ soluble fractions indicated good antioxidative potential compared to the $CH_2Cl_2$ and n-hexane soluble fractions.
A 3% suspension of heat-stabilized defatted rice bran was treated with papain, followed by inactivating the enzyme by heat, and centrifuged. The supernatant was subjected to ultrafiltration, and fractions with various molecular sizes, F1 (>30 kDa), F2 (10-30 kDa), F3 (5-10 kDa), F4 (3-5 kDa), and F5 (3 kDa<), were freeze-dried, and evaluated for antimutagenicity by Ames test using Salmonella typhimurium TA 100 against phenazine methosulfate. The F3 fraction containing highest antimutagenicity from ultrafiltration was separated into 6 fractions by DEAE-Sephadex A-25 ion-exchange column chromatography (F3-1-F3-6). Each fractions having protein contents were pooled, dialyzed, freeze dried, and evaluated for antimutagenicity. Among the six fractions, the F3-1, F3-2, and F3-6 fractions showed antimutagenicity, which were 80.2, 53.4, and 58.6% at concentration of $100\;{\mu}g/plate$, respectively. These F3-1, F3-2, and F3-6 fractions were subjected to Sephadex G-50 gel filtration column chromatography for further purification. Among the purified fractions, the F3-1-1, F3-2-2, and F3-6-1 fractions showed antimutagenicity of 84.5, 58.6, and 69.8% at concentration of $100\;{\mu}g/plate$, respectively. It is thought that these peptides can find application for nutraceutical and pharmaceutical products.
A sensitive and quantiative method for the structural analysis of oligosaccharide was established for the glycoform analysis of glconproproteins. Inthis study, n-linked oligosaccharides of human IgG and bovine transferin were analyzed for the evaluation of the methydrate moiety ofthe method. Chrbohydrate moiety of glycoprotein was relased by hydrazinolysis and purified by paper chromatography. The oligosaccharides were labeled with a fluorescent bye, 2-aminobenzamide, for the enhancement of detection sensitivity. sialylated (acidic) oligosaccharides were separated from neutral oligosaccharide by employing a strong anion-exchange column(MonoQ) followed by the treatment with sialidase. Enzymatically desiayated fractions and neutral fractions of oligosaccharides were applied to normal-phase HPLC to resolve the peaks according to glucose unit (GU). The structure of separated molecules was further determined by sequential digestion with exoglycosidases. As a result, disialylated biantennary complextype oligosaccharide was found to be a major sugar chain in bovine transferrin (63%). In human IgG, core fucosylated asialobiantennary complex oligosaccharides were dominant. These results coincided well with reported results.
Human milk and bovine milk in normal stage were fractionated four parts : whey, skimmilk membrane, and casein pellet. The specific activity (nmole / mim / mg protein) and distribution ratio(%) of suborganella marker enzymes in each separated milk fraction were determined. Especially, neutral $Ca^{2+}$-ATPase, acid $Ca^{2+}$-ATPase, NADH-cytochrome C reductase, and acid phosphatase were higher in human milk. However, both $Ca^{2+}$-ATPases were not detected in all fractions of bovine milk. On the other hand, 5'-nucleotidase, phosphodiesterase I, alkaline phosphatase, and $\gamma$-glutamyl transpeptidase activities in bovine milk were higher than in human milk. Most of the marker enzymes were highly distributed in cream fraction of either human milk or bovine milk, and their specific activities were high to 24 fold from 3 fold when compared with that of whole milk. These results suggest that marker enzymes in mammary epitherial cell are transfered into cream fraction by the membrane rearrangement, and different biochemical reaction between human and bovine exists for milk secretion in mammary gland.
In this study, a antioxidant activity peptide fraction was separated and purified from metabolites of whey protein fermented by Lactobacillus rhamnosus B2-1. The fermentation sample was separated by macroporous resin D101 and Sephadex G-15. The collected fractions were tested for antioxidant and antitumor activities. In order to test the antioxidant activity of fractions, Hydroxyl (·OH), 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS), and Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) were used. The final purified peptide B11 showed highest ABTS and ·OH radical scavenging rate by 84.36±1.89% and 62.43±2.64%, respectively, and had an ORAC activity of 1,726.44±2.76 μM Trolox equivalent/g. Further, the inhibitory effect of B11 on the proliferation of LoVo human colon cancer cells, KB and Cal-27 human oral cancer cells were enhanced with increasing concentrations of B11. B11 contains 51.421% amino acids, with Glu and Asp being the major constituents. In this study, we obtained peptide fraction B11 with antioxidant activity, which is promising for development.
Genipin, aglycone of geniposide isolated from fruits of Gardenia jasminoides, was transformed into blue pigments through reaction with glycine and methylamine. The blue pigments formed from glycine-reacted genipin were passed through Bio-Gel P-2 resin yielding fractions GG1 and GG2, and those from methylamine-reacted genipin were separated into fractions GM1-GM4. The first eluted higher molecular-weight fractions, GG1 and GM1, had higher tinctorial strength than the later eluted lower molecular-weight fractions, GG2 and GM2-GM4, respectively. $^1H-NMR$ spectra of GG1 and GM1 showed very broad peaks indicating that structures of the pigments were highly polymeric. $^1H-NMR$ spectra of GG2, GM3, and GM4 showed several sharp peaks at aliphatic and aromatic regions with accompanying broad peaks, although the spectrum of GM2 was rather simple. Determination of the structural and physical nature of the isolated pigments is in progress.
A phenol substance was extracted from Pinus koraiensis Siebold et Zucc leaf extracts and its biological efficacy was measured. The highest content of the phenol substance contained in Pinus koraiensis Siebold et Zucc leaves was 13.5 mg/g, which was obtained when it was extracted with 80% ethanol. At a concentration of 200 mg/mL, the phenolic substances extracted with 80% ethanol and water showed antimicrobial activities against Helicobacter pylori, producing clear zones of 10 and 12 mm diameter, respectively. Pinus koraiensis Siebold et Zucc. leaf extracts were separated using a Sephadex LH-20 column and 4 fractions were obtained (fractions A-D). Fractions C and D showed the greatest inhibitory activity against Helicobacter pylori producing 10.1 and 12.3 mm clear zones, respectively. These two fractions were purified using a Sephadex LH-20 and MCI-gel column ($H_2O{\rightarrow}100%$ ethanol). Purified compounds A and B were identified as syringic acid and compound C was identified as p-coumaric acid based on $^1H$-nuclear magnetic resonance (NMR), $^{13}C$-NMR, and fast atom bombardment mass spectrometry spectra. When two or more purified compounds were mixed, a synergistic effect of anti-Helicobacter pylori activity was evident. This result indicates that extracts of Pinus koraiensis Siebold et Zucc leaves could be considered a functional food because of their high antimicrobial properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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