• 한국어병학회지
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• 제19권3호
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• pp.189-195
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• 2006

A subtracted cDNA library of a marine scuticociliate, Philasterides dicentrarchii, in response to 17β-estradiol exposure was constructed using suppression subtractive hybridization (SSH). As a result of SSH, 275 clones were isolated, and among them, only glutathione peroxidase (GPX) gene was isolated as an antioxidative enzyme responding to 17β-estradiol. The semi-quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis revealed that the transcription of GPX gene of P. dicentrarchii was clearly increased by exposure to 17β-estradiol. The GPX transcription was also clearly increased by exposure to xenoestrogens such as bisphenol A (BPA) and genistein.

• 한국어병학회지
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• 제15권2호
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• pp.93-97
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• 2002

The scuticociliate, a histophagous ciliate, is known to cause high cumulative mortalities in juvenile olive flounder Paralichthys olivaceus rearing in land-based tank facilities. This study examined effects of bath treatment of 3 chemical agents including formalin, hydrogen peroxide and sodium chloride. and freshwater against scnricociliates infected olive flounder. Although 100 ppm formalin and freshwater did not completeIy eliminale ue scuticociliates within the internal organ of fish, chemicals were effective to prevent scuticociliatosis from spreading. It confirms the efficacy of the chemical with treating the diseased fish for at least 4 consecutive days.

• 한국어병학회지
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• 제17권2호
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• pp.145-149
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• 2004

The definitive identification of ciliate species by morphological characteristics relies on time-consuming and laborious staining techniques. Therefore, in this study, we discriminated 3 scuticociliatosis causing species - Pseudocohnilembus persalinus, Uronema marinum and Philasterides dicentrarchi - in cultured olive flounder by multiplex PCR. The multiplex PCR based on the species-specific amplification of small subunit ribosomal RNA (SS rRNA) gene sequence enabled us to distinguish the 3 scuticociliate species in a simple and rapid manner, even in the sample containing the three species simultaneously. These data suggest that the multiplex PCR strategy would make it possible to avoid the cumbersome and time-consuming procedures of morphological analysis for the definitive identification of scuticociliates.

• 한국어병학회지
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• 제18권1호
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• pp.19-28
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• 2005

2003년 북제주 지역의 육상양식장에서 양식중인 넙치에서 새로운 타입의 스쿠티카섬모충을 분리하였다. 이 충은 환경에 따라 ciliate와 cyst로 변태하며 장기간 생존하였는데, ciliate stage의 크기는 영양상태가 양호한 시기 기준 평균 길이 41.8, 폭 21.0 ${\mu}m$ 이었으며, cyst stage는 평균 길이 17.0 ${\mu}m$, 폭 13.5 ${\mu}m$ 이었다. 변태하는 주 원인은 먹이 양이었다. 먹이가 부족하면 cyst로 변태하여 장기간 생존이 가능하며, 먹이가 풍부해지면 ciliate로 재변태하여 활발히 증식하였다. In vitro 배양시험 결과 MS BHI 배지에서 비브리오균 (V. lentus)을 먹이로 하여 15$^{\circ}C$에서 최고 2.9${\times}$105 ${m\ell}^{-1}$의 고밀도로 배양되었다. 환경에 대한 적응시험 결과 ciliate는 염분농도 1-55 ppt, 온도 2.5-30$^{\circ}C$, pH 6-9 범위에서 증식이 가능하였다. 특히 0$^{\circ}C$에서도 7일 이상 장시간 생존이 가능하여 환경에 대한 적응력이 매우 뛰어났다. cyst는 먹이가 없는 상태에서 장시간 생존이 가능하였는데, 5$^{\circ}C$에서는 320일 동안 생존하였으며 온도가 높아질수록 생존기간은 짧아졌다. 화합물을 이용한 in vitro 구제시험에서는 포르말린과 과산화수소 모두 200 ppm/1시간 약욕으로 구제효과가 있었으나 화합물의 약욕농도와 시간에 따라 효과가 달랐다.

• 한국어병학회지
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• 제19권2호
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• pp.87-97
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• 2006

2004년 12월부터 2005년 4월까지 양식넙치에서 분리된 스쿠티카 섬모충 P. dicentrarchi를 넙치 치어 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹에 인위 감염시킨 후 감염에 따른 폐사율 등의 병원성을 조사하였다. 소형수조에 스쿠티카충 P. dicentrarchi를 접종시킨 결과 수조저면에서 활발히 증식하였으며 접종 후 6일째부터 1.4 × 103 cell ㎖-1～2.5 × 103 cell ㎖-1범위로 ㎖당 2,000 cell 내외의 밀도로 증식하였다. 반면에 중층인 경우는 ㎖당 300 cell 이하의 낮은 밀도를 유지하였다.수조저면에 P. dicentrarchi충을 증식시킨 후 넙치치어를 방양한 결과 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹 모두 배양시킨 충에 감염되었으며, 충 감염에 의한 폐사는 3 ㎝ 그룹인 경우 치명적이었다. 접종 후 5일째부터 폐사가 시작되었으며, 28일 만에 95.6%의 높은 폐사율을 보였다. 대조구에서는 실험기간 동안 4.4% 폐사율을 보였으나 스쿠티카충은 검출되지 않았다. 5 ㎝ 그룹은 접종 후 18일째에 처음으로 폐사되기 시작하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사 진행이 현저히 늦었다. 이 그룹은 스쿠티카충의 인위 접종 후 28일 동안 71%가 폐사하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사율이 낮았다. 5 ㎝ 그룹의 대조구에서는 실험기간 동안 폐사가 없었으며 스쿠티카충의 감염도 없었다.모든 실험구의 폐사어에서 인위 감염시킨 충을 재분리하여 SSU rRNA에 대한 유전학적 분석결과, 처음 접종시킨 P. dicentrachi와 각 실험구별 재분리된 섬모충의 SSU rRNA 유전자가 일치하여 동일 섬모충에 의한 감염임이 확인되었다.

• 한국양식학회지
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• 제19권3호
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• pp.197-204
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• 2006

넙치 치어 3 cm와 5 cm 그룹을 이용하여 Philasterides dicentrarchi에 대한 병원성과 감염경로를 조사하였다. 소형수조에서 넙치치어에 스쿠티카충을 인위감염시킨 결과 3 cm 그룹인 경우 접종 4일 후에 40%가 감염되었으며, 24일 후에는 감염률이 90.1%로 대부분의 실험어가 감염되었다. 5 cm 그룹은 3 cm그룹에 비해서 초기 감염률이 현저히 낮았다. 접종 8일 후에 최초로 20%의 감염률을 보였으며 16일 후에도 42%로 완만한 속도로 감염률이 증가하였다. 그러나 그 이후에는 감염률이 급격히 증가하여 24일 후에는 81%에 달했다. 반면에 스쿠티카충을 접종시키지 않은 대조구에서는 스쿠티카충이 감염되지 않았다. 인위감염시킨 스쿠티카충의 어체내 침투는 몇 가지 경로로 이루어졌는데, 지느러미 연조막에 감염된 후 지느러미 조직과 근육에 침투하는 경로, 주둥이 부위의 부드러운 표피를 통하여 감염 된 후 두부 골격과 근육 결을 따라 안구와 뇌로 침투하는 경로, 꼬리지느러미를 통해서 미병부에 침투한 후 척수에 도달하고, 척수를 따라 뇌에 침투하는 경로 등이었다. 이외에도 복강에 침투하는 경우도 있었는데, 항문주위에 다량으로 증식하며 조직을 괴사시킨 후 복강으로 침투하였다. 치명적인 피해를 입히는 뇌 침투는 3cm그룹은 충 접종 후 14일 만에, 5cm그룹은 20일 만에 각각 확인되어 어체가 작을수록 빨리 이루어졌다.

• 한국어병학회지
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• 제35권1호
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• pp.113-120
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• 2022

Scuticociliatosis caused by Miamiensis avidus is a very important parasitic disease in olive flounder farming industry. The aim of this study was to determine effect of combined treatment with blue LED (light-emitting diode) illumination and formalin on olive flounder (Paralichthys olivaceus) infected with M. avidus. Different intensity of 405 nm LED (20, 40, and 60 μmol·m^-2·s^-1) was illuminated on 2.2×10⁴ cells/well of M. avidus in a 24 well microplate for 24 h. Also, 2.4×10⁴ cells/well of M. avidus were exposed to varying combinations of 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm LED and serial 10-fold dilutions of formalin (from 10 to 100 ppm) for 15, 30, 45, and 60 min. Surviving M. avidus were counted using a hemocytometer. For in vivo test, flounder acclimatized at 11-12 practical salinity unit (psu) were challenged with 2×10⁶ cells/ml of M. avidus by immersion method for 1 h. Then, fish were moved and divided into four groups; "F" group, treated with formalin at 50 ppm; "L" group, treated with 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm LED; "C" group, treated with combination of the two methods; and the control group. After treatment for 30 min, fish were transferred to new tanks (salinity = 11-12 psu) and observed for 3 weeks. As a result, illumination of 405 nm LED at 60 μmol·m^-2·s^-1 killed 100% of M. avidus after 12 h, while 67% and 90% of the scuticociliate died at 20 and 40 μmol·m^-2·s^-1, respectively, after 24 h exposure. One hundred percent of M. avidus was killed at 90, 80, 80 and 70 ppm after exposure to formalin for 15, 30, 45 and 60 min, respectively. However, combined method (e.g., 60 μmol·m^-2·s^-1 of 405 nm-LED plus 50 ppm formalin) killed the parasite within 30 min. From in vivo test, similarly, survival rates of fish challenged with M. avidus were 100%, 43%, 29% and 0% in the C, F, L, and control groups, respectively. Results obtained in this study demonstrates that the combined treatment method has clear synergistic effect on scuticociliatosis in fish.

• 한국어병학회지
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• 제16권1호
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• pp.13-21
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• 2003

The infection characteristics with scuticociliates at on-land rearing farms and hatcheries of flounder, Paralithys olivaceus was investigated during the year of 2001 by juvenile infection routes. When culture tanks for living food organisms such as chlorella, rotifer, and Artemia were searched, scuticocilates were detected both in live and dead rotifer, and at the dregs of culture tank bottoms at almost hatcheries. When rotifer infected with scuticocilates fed on fish larvae, lots of scuticocilate were inhabited at the bottom of fry rearing tanks. After feeding on scuticocilates-infected rotifer on fish larvae, first infection was detected at 10 days after bottom dwelling or 40 days old after hatching. By histopathological examination we confirmed the infection route of eyeball or brain contamination was that the ciliate worms digged through mouth and front part of the dosal fin cuticle, transferred into eyeball along the epithelium and muscle tissue, and reached finally into brain by the muscle and nerve tissue. The infection of internal organs was clarified into two routes. The first route was started from the infection at ventral and anal fin rays by the worms, and reached at the anus and rectum through the epithelium and muscle tissue. The second route was initiated from the infection at urinary organ and reached into the rectum epithelium cells, inner wall of intestine, abdominal cavity, pancreas, kidney, and pancreas. At seed production farms where fish larvae fed on scuticocilate-free rotifer, the worms were not detected not only at the food organisms culture tanks and juvenile rearing tanks but also larval flounder less than 7cm in total length.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제6권3호
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• pp.155-159
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• 2003

Lipid composition and fatty acid composition were characterized in the membrane of a marine ciliate protozoan (Uronema marinum). Phospholipids accounted for 70% of total lipid, and the remainder was neutral lipids. Total phospholipids were separated as phosphatidylcholine $(24.26\%)$, phosphatidylethanolamine $(22.21\%)$, phosphatidylinositol $(6.14\%)$, phosphatidyl­serne $(5.11\%)$, cardiolipin $(3.07\%)$ and unidentified phospholipids $(28.72\%)$ through high performance liquid chromatography (HPLC). Fatty acid composition of neutral lipids and phospholipids was determined by gas chromatography (GC), based solely on comparision of retention times. In neutral lipids, the most abundant fatty acid group was monounsaturated fatty acid $(48.3\% of total fatty acids)$ with oleic acid (18:1) and nervonic acid (24:1). Saturated fatty acids comprised $29.6\%$ of total fatty acids, with palmitic acid (16:0), stearic acid (18:0) ane myristic acid (14:0), and polyunsaturated fatty acid accounted for $33.0\%$ with $Di-homo-\gamma-linolenic$ acid (20:3) and linoleic acid (18:2). Wherease phospholipids predominantly contained the fatty acid group in the following order: polyunsaturated fatty acids $(52.7\%\;of\;total\;fatty\;acids)$ with linoleic acid (18:2) and $\gamma-linolenic$ acid (18:3) > monounsaturated fatty acids $(28.5\%\;of\;total\;fatty\;acids)$ with oleic acid (18:1) and palmitoleic acid (16:1) > saturated fatty acids $(25.5\%\;of\;total\;fatty\;acids)$ with palmitic acid (16:0), stearic acid (18:0) and myristic acid (14:0).

• 한국어병학회지
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• 제18권1호
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• pp.99-103
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• 2005

스쿠티카섬모충에 감염된 자주복의 장, 비장, 신장, 정소, 뇌, 연골 그리고 육질부에 충체의 분포를 조사하였다. 실험어는 사조 CS(주)에서 사육중인 자주복 중 스쿠티카섬모충에 감염된 자주복을 이용하였다. 스쿠티카섬모충은 장, 비장, 신장, 정소, 뇌, 연골, 육질부의 기관을 덮는 결합조직에 분포하고 있다. 뇌에 감염되었을 때 막성조직과 시엽피질 사이가 벌어지는 증상이 있었다. 비장에서 hemosiderin이 과다 침적되는 증상을 제외한 다른 내부 조직과 기관에서는 병리적 증상을 볼 수가 없었다.