Hwang, Hye Jin;Mun, Hye Yeon;Hwang, Buyng Su;Nam, Young Ho;Chung, Eu Jin
The Korean Journal of Mycology
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제48권1호
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pp.15-27
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2020
In screening for antimicrobial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) KCCM 40510 and Bacillus cereus KCTC 3624, NNIBRFG5039 was isolated from the air in Sangju-si, Gyeongsangbuk-do. Based on a high sequence similarity of the internal transcribed spacer (ITS) region, NNIBRFG5039 was determined to be closely related to Penicillium rubefaciens CBS 139145. The optimal media, initial pH, and temperature for mycelial growth and antimicrobial activity of P. rubefaciens NNIBRFG5039 were determined as follows: potato dextrose broth (PDB), pH 6.5, and 30℃, respectively. Under the optimal culture conditions, maximum mycelial growth (12.4 g L-1) and antibacterial activity (7.5 mm zone of inhibition against MRSA KCCM 40510, and 5.0 mm zone of inhibition against B. cereus KCTC 3624) were observed in a 5 L stirred-tank fermenter. We also isolated the antimicrobial compound from an ethyl acetate fraction, and its chemical structure was identified as (S)-6-hydroxymellein (1) by ESI-MS, 1H-NMR, and 13C-NMR. Consequently, the extract from P. rubefaciens NNIBRFG5039 may be used in functional materials for antimicrobial-related applications.
In the course of screening for antifungal agents, a bacterial strain, DM3 was isolated from a mud sample collected at Daechon in Chungnam province and identified as Bacillus licheniformis based on API 50CHB test. It has antifungal activity against 12 plant pathogenic fungi in paper disc assay. At the 95% lethal dose of gamma radiation ($^{60}Co$, 10 kGy, $D_{10}=2.32\;kGy$), the antifungal activity deficient mutant (mDM3) against Colletotrichum gloeosporioides was induced From 2-D electrophoresis analysis, serine hydroxymethyltransferase (45.0 kDa), hypothetical protein(40.7 kDa), NifU protein homolog(15.4 kDa), and resolvase(12.5 kDa) homologous proteins were detected only in B. licheniformis DM3. Lysozyme(18.1 kDa) and alkyl hydroperoxide reductase(15.6 kDa) homologous proteins were expressed uniquely in B. licheniformis mDM3. Further studies are needed to reveal that these proteins from B. licheniformis DM3 could be closely related to the antifungal activity against plant pathogenic fungi.
Since the mid of 1980's, cultivation area and production of Ganoderma lucidum have been increased annually in Korea. However, the presence of a fungal disease has become a major limiting factor in the cultivation of Ganoderma lucidum, causing a serious economic loss. The present study was carried out to isolate and identify the pathogenic fungus to Ganoderma lucidum. Several fungi isolated from the wood logs showing typical symptoms were tested whether they are pathogenic to Ganoderma lucidum or not by cross-pairing culture method, flask inoculation method, and wood log inoculation method. The pathogenic fungus produced ascomata. Mature ascomata was spherical, dark, thick-walled, $45{\sim}95\;{\mu}m$ diameter. Asci were thin-walled, evanescent when mature, disintegrate early. Ascospores were spherical, hyaline, glaborous, thick-walled, refractive, $3.6{\sim}4.3\;{\mu}m$ in size. Conidiophores soon became abundantly septate and broke up into arthrospores, which are cylindrical, $3{\sim}6\;{\mu}m$ long and $3{\sim}4\;{\mu}m$ wide. Based on the observations under dissecting microscope, light microscope and scanning electron microscope, teleomorph and anamorph of the pathogenic fungus were identified as Xylogone sphaerospora Von Arx & Nilsson and Sporendonema purpurascens (Bonordon) Mason & Hughes, respectively. X. sphaerospora is first reported as a pathogenic fungus of Ganoderma lucidum.
Based on its α-amylase activity at pH 5.0 and optimal pH of the crude enzyme, a strain (named B-5) with acid α-amylase production was screened. The B-5 strain was identified as Bacillus amyloliquefaciens through morphological, physiological, and biochemical characteristics analysis, as well as 16S rDNA phylogenetic analysis. Its α-amylase gene of GenBank Accession No. GU318401 was cloned and expressed in Escherichia coli. The purified recombinant α-amylase AMY-Ba showed the optimal pH of 5.0, and was stable at a pH range of 4.0-6.0. When hydrolyzing soluble starch, amylose, and amylopectin, AMY-Ba released glucose and maltose as major end products. The α-amylase AMY-Ba in this work was different from the well-investigated J01542-type α-amylase which also came from B. amyloliquefaciens. AMY-Ba exhibited notable adsorption and hydrolysis ability towards various raw starches. Structure analysis of AMY-Ba suggested the presence of a new starch-binding domain at its C-terminal region.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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제19권3호
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pp.671-676
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2005
In this study, we investigated the antioxidant effect of extract from Monascus pillosus, on the human wild-type p53 and p21 expressing A549 lung epithelial cell line and MCF-7 mammary adenocarcinoma cell line stimulated by NO. $P21^{waf/cip1}$ was identified as a gene induced in senescent cells. It is a cyclin-dependent kinase inhibitor and has been shown to cause cell cycle arrest and apoptosis. While p53-regulated stimulation of p21 appears to be central for the permanent growth-arrest, the role of p21 in p53-triggered cell death is unclear. Low dose of sodium nitroprusside (SNP) induced the development of senescence associated with increased expression of p53 and p21 in A549 cells. Inhibition of p21 transactivating activity requires high level correlates with the amount of p53 necessary to cause cell death. Association of p21 and p53 results in inhibition of p21-stimulated transcription. This requires a higher p53 level than is necessary for transcriptional activation of endogenous p53-responsive gene but correlates well with the level of p53 necessary to cause cell death. Exposure to W-1 inhibited oxidative stresses-induced senescence-like arrest, resulting in a significant reduction in p53 and p21 steady state levels. These results suggest that p53 and p21 play a central role in the onset of senescence. Thus, it is important to emphasize control of oxidative balance in tumor prevention and aging.
Mansour A. Al-hazmi;Tarek A. A. Moussa;Nuha M. Alhazmi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제33권9호
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pp.1238-1249
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2023
In this study, we sought to investigate the production and optimization of biosurfactants by soil fungi isolated from petroleum oil-contaminated soil in Saudi Arabia. Forty-four fungal isolates were isolated from ten petroleum oil-contaminated soil samples. All isolates were identified using the internal transcribed spacer (ITS) region, and biosurfactant screening showed that thirty-nine of the isolates were positive. Aspergillus niger SA1 was the highest biosurfactant producer, demonstrating surface tension, drop collapsing, oil displacement, and an emulsification index (E24) of 35.8 mN/m, 0.55 cm, 6.7 cm, and 70%, respectively. This isolate was therefore selected for biosurfactant optimization using the Fit Group model. The biosurfactant yield was increased 1.22 times higher than in the nonoptimized medium (8.02 g/l) under conditions of pH 6, temperature 35℃, waste frying oil (5.5 g), agitation rate of 200 rpm, and an incubation period of 7 days. Model significance and fitness analysis had an RMSE score of 0.852 and a p-value of 0.0016. The biosurfactant activities were surface tension (35.8 mN/m), drop collapsing (0.7 cm), oil displacement (4.5 cm), and E24 (65.0%). The time course of biosurfactant production was a growth-associated phase. The main outputs of the mathematical model for biomass yield were Yx/s (1.18), and µmax (0.0306) for biosurfactant yield was Yp/s (1.87) and Yp/x (2.51); for waste frying oil consumption the So was 55 g/l, and Ke was 2.56. To verify the model's accuracy, percentage errors between biomass and biosurfactant yields were determined by experimental work and calculated using model equations. The average error of biomass yield was 2.68%, and the average error percentage of biosurfactant yield was 3.39%.
Kim, Suyoung;Park, Sook-Young;Kim, Hyejeong;Kim, Dongyoung;Lee, Seon-Woo;Kim, Heung Tae;Lee, Jong-Hwan;Choi, Woobong
The Plant Pathology Journal
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제30권4호
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pp.375-383
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2014
Fungi tolerate exposure to various abiotic stresses, including cytotoxic compounds and fungicides, via their ATP-driven efflux pumps belonging to ATP-binding cassette (ABC) transporters. To clarify the molecular basis of interaction between the fungus and various abiotic stresses including fungicides, we constructed a cDNA library from germinated conidia of Colletotrichum acutatum, a major anthracnose pathogen of pepper (Capsicum annum L.). Over 1,000 cDNA clones were sequenced, of which single clone exhibited significant nucleotide sequence homology to ABC transporter genes. We isolated three fosmid clones containing the C. acutatum ABC1 (CaABC1) gene in full-length from genomic DNA library screening. The CaABC1 gene consists of 4,059 bp transcript, predicting a 1,353-aa protein. The gene contains the typical ABC signature and Walker A and B motifs. The 5'-flanking region contains a CAAT motif, a TATA box, and a Kozak region. Phylogenetic and structural analysis suggested that the CaABC1 is a typical ABC transporter gene highly conserved in various fungal species, as well as in Chromista, Metazoans, and Viridiplantae. We also found that CaABC1 was up-regulated during conidiation and a minimal medium condition. Moreover, CaABC1 was induced in iprobenfos, kresoxim-methyl, thiophanate-methyl, and hygromycin B. These results demonstrate that CaABC1 is necessary for conidiation, abiotic stress, and various fungicide resistances. These results will provide the basis for further study on the function of ABC transporter genes in C. acutatum.
During the screening of inhibitors against phospholipase C (PLC) and the formation of inositol phosphates (IP$_{t}$) at NIH3T3${\gamma}$1 cells from microbial secondary metabolites, we selected a fungal strain MT60109 which was capable of producing an inhibitor. By the taxonomic studies, this fungus was identified as Pseudallescheria sp. MT60109 and an inhibitor of PLC was purified by BuOH extraction and chromatographic techniques from the culture broth of Pseudallescheria sp. MT60109. The inhibitor was identified as thielavin B by the physico-chemical properties and spectroscopic analysis of UV, FAB-MS, $^{1}$H, $^{13}$C-NMR, $^{1}$H-$^{1}$H COSY and HMBC. Thielavin B showed potent inhibitory activity against PLC purified from bovine brain with an IC$_{50}$ of 20 $\mu$M. And it also inhibited the formation of inositol phosphates in platelet-derived growth factor (PDGF) -stimulated NIH3T3${\gamma}$1 cells with an IC$_{50}$ of 20 $\mu$M.
For screening of biological activities of culture broth of some wood rotting basidiomycetes, antimicrobial activity, plant growth regulating activity, antitumor activity, and various enzyme activities were checked. Coriolus versicolor 5129 and C. pubescens 5131 strains showed inhibition activity against gram-positive bacteria and Lenzites betulina 8029 strain showed the activity against gram-negative bacteria. L. betulina 8085 inhibited the growth of both bacteria and plant pathogenic fungi. All of tested basidiomycetes inhibited the germination and growth of radish and cabbage at concentration of 0.8ml/ml. Especially, Fomitopsis pinicolor 8059 and Fomitella fraxinea 8084 showed strong inhibition activity. In contrast, Bjerkandera adusta 8054 stimulated the growth of cabbage and radish at concentration of 0.4 and 0.2ml/ml. All polysaccharides from tested basidiomycetes showed anti-tumor activity against sarcoma 180 and the stronger antitumor activity was observed in L. betulina 8029 and unidentified 8058 strain. All tested basidiomycetes had also an ability to degrade cellulose and lignin.
Cotyledon Black Decay (CBD) on soybean sprout mimics the black spot due to microbial infection. CBD, not visible or predictable at seedlot state, for some reason, shows up exclusively on cotyledon of soybean sprout during sprouting process. Such an incidence rate fluctuated from 0.8 to 19.5% over three years from 2004. We suspected some pod-infecting anthracnose fungi and/or pod-blight pathogen, or pod-sucking bean bug, one of the major pests of soybean, might have involved, of which we ruled out fungal pathogen because it was preventable through heat treatment, a proven method for seedlot disinfestation. The healthy seeds artificially fed by bean bug for one to seven days were sprouted, and 6 to 41% of the soybean sprout revealed the CBD mimic to those occurred in soybean sprout from previous commercial seedlot screening experiments. This finding is the first report to confirm that bean bug damage to pod at $R_8$ stage is directly responsible for the CBD, which did not concur with any other deleterious effects on sprouting such as reduction in hypocotyls elongation and rooting except unsightly sprout quality. However, earlier feeding either at green pod or greenish yellow pod stage ($R_6$ -early $R_7$ stage) resulted in rather severe damages, which strikingly reduced hypocotyls growth to about one forth to about two third, as well as the reduction in rates of seed germination.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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