Song Hee, Lee;Young Taek, Oh;Do-Yeon, Lee;Eunbyeol, Cho;Byung Su, Hwang;Junhyun, Jeon
The Plant Pathology Journal
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v.38
no.6
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pp.685-691
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2022
Plants produce chemicals of immense diversity that provide great opportunities for development of new antifungal compounds. In search for environment-friendly alternatives to the fungicide of current use, we screened plant extracts obtained from more than eight hundred plant materials collected in Korea for their antifungal activity against the model plant pathogenic fungus, Magnaporthe oryzae. This initial screening identified antifungal activities from the eleven plant extract samples, among which nine showed reproducibility in the follow-up screening. These nine samples were able to suppress not only M. oryzae but also other fungal pathogens. Interestingly, the plant extracts obtained from Actinostemma lobatum comprised five out of eight samples, and were the most effective in their antifungal activity. We found that butanol fraction of the A. lobatum extract is the most potent. Identification and characterization of antifungal substances in the A. lobatum extracts would provide the promising lead compounds for new fungicide.
Antifungal bacteria for biological control of plant diseases or production of novel antibiotics to plant pathogens were isolated in 1997 from various soils of Ansung, Chunan, Koyang, and Paju in Korea. Sixty-four bacterial strains pre-screened from approximately 1,400 strains were tested on V-8 juice agar against eight plant pathogenic fungi using in vitro bioassay technique for inhibition of mycelial growth. Test pathogens were Alternaria mali, Colletotrichum gloeosporioides, C. orbiculare, Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, F. oxysporum f. sp. lycopersici, Magnaporthe grisea, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. A wide range of antifungal activity of bacterial strains was found against the pathogenic fungi, and strain RC-B77 showed the best antifungal activity. Correlation analysis between inhibition of each fungus and mean inhibition of all eight fungi by 64 bacterial strains revealed that C. gloeosporioides would be best appropriate for detecting bacterial strains producing antibiotics with potential as biocontrol agents for plant pathogens.
For the research of antifungal active constituents from natural products, 226 plants were extracted with ether and methanol, separately, and screened antifungal activity against Candida albicans and Penicillium avellaneum cells. The results demonstrated that 30 samlpes showed antifungal activity in ether or methanol extracts and 17 samples in ether extracts and 20 samples in methanol extracts against C. albicans. Against P. avellaneum, 19 samlpes showed antifungal activity in ether or methanol extracts and 17 samples in ether extracts and 11 samples in methanol extracts, respectively. The antifungal activity of natural products against C. albicans were showed more sensitive than P. avellaneum, and the polarity of the solvent was not specific in antifungal activity.
Kim, Sung-Uk;Nam, Ji-Youn;Kwon, Byoung-Mok;Son, Kwang-Hee;Bok, Song Hae
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.23
no.2
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pp.170-177
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1995
To search and develop the compounds exhibiting antifungal activities against the mycelial phase of Candida albicans, approximately 2,900 microorganisms isolated from soil were examined for antifungal activity. Among them, a strain with preferential activity against the mycelial phase of Candida albicans was isolated and identified as Streptomyces sp. A393. Isolation and purification of compounds A393 showing antifungal activity against the mycelial phase of C. albicans were performed using XAD-7 column chromatography, silica gel chromatography, preparative thin- layer silica gel chromatography, and HPLC. The molecular weights of compounds isolated from Streptomyces sp. A393 were determined as 774, 790, 804 and 820. These compounds appeared to have a structure of macrolide antibiotics, oligomycin A, B, C and E. Especially, oligomycin E, which is formerly reported to have no antifungal activity, showed antifungal activity against the mycelial phase of Candida albicans.
Screening tests against fungus causing rice blast, Magnaporthe grisea, were performed in order to develop biopesticides. More than 400 actinomycetes collected at several sites near Hanla Mountain on Jeju Island, Korea were tested, and strain BG2-53 showed potent antifungal activity. The in vivo screening was performed with fermentation broth, and the strain taxon was identified.
To discover a potent strain against wheat leaf rust, soil samples collected from Ilgamho, Seoul, Korea were tested in vivo and a strain belonging to Streptomyces sp. was found to show good antifungal activity when fermented in a broth. The identification of the strain was carried out based on 16S rDNA analysis, and the active compound was separated from the fermented broth. Even though its structure was not determined completely, the authors report the results obtained so far indicate that the fermented broth of the strain showed activity against wheat leaf rust. Therefore, we propose that this may be a potential novel strain showing antifangal activity against Puccinia recondita.
Burkholderia pyrrocinia CH-67 is a biocontrol bacterium with strong antifungal activity against several plant pathogenic fungi. Transposon mutagenesis was performed to identify the genes responsible for the antifungal activity of B. pyrrocinia CH-67. Of the 2,500 mutants tested using the Fulvia fulva spore screening method, a mutant deficient in antifungal activity, M208, was selected. DNA sequence analysis of the transposon-inserted region revealed that a gene encoding an adenylate kinase-related kinase was disrupted in M208. Antifungal activity was restored in M208 when a full-length adenylate kinase gene with its promoter was introduced in trans. The deduced amino acid sequence of adenylate kinase from CH-67 was 80% identical to that of B. cenocepacia MCO-3. Adenosine diphosphate supplementation or high levels of adenosine triphosphate and adenosine monophosphate together restored antifungal activity in M208, suggesting that adenylate kinase of B. pyrrocinia CH-67 is involved in antifungal activity expression.
For the searching of antibiotics in the mushroom, we studied on the screening of antiyeast and antifungal components. The powder of fruiting body of each mushroom was extracted with petroleum ether, 80% ethanol, and distilled water in that order, respectively. The antifungal activity of each extract from 32 different mushrooms were tested. The petroleum ether or ethanol extracts from fruiting bodies of Boletus auripes, Leccinum extremiorientale, Gomphus floccosus, Phaeolus schweinitzii, Pycnoporus cinnabarinus and Marasmius maximus showed antiyeast activities. The ethanol extract of Gyrophora esculenta showed an antiyeast activity against Cryptococcus neoformans, and its minimal inhibitory concentration (MIC) was $600\;{\mu}g/ml$. The petroleum ether or ethanol extracts from fruiting bodies of Amanita citrina, Leccinum extremiorientale, Gomphus floccosus, Phaeolus schweinitzii, Pycnoporus cinnabarinus, Marasmius maximus and Gyrophora esculenta showed antifungal activities. The ethanol extract of Gomphus floccoscus showed an antifungal activity against Microsporum gypseum, and its MIC was $1,000\;{\mu}g/ml$. The ethanol extract of Gyrophora esculenta showed antifungal activities against Trichophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum and Pyricularia oryzae, and theirs MIC were $300\;{\mu}g/ml,\;600\;{\mu}g/ml\;and\;600\;{\mu}g/ml$, respectively. The petroleum ether extract of Gyrophrora esculenta also showed an antifungal activity against Microsporum gypseum, and its MIC was $300\;{\mu}g/ml$.
In order to search potent antifungal substances from domestic plants, 40 plants cultivated in Korea were collected. After extracting with methanol (MeOH) and concentrating to dryness, the MeOH extracts were screened for in vivo antifungal activity against six plant diseases at a concentration of $2000{\mu}g/mL$. Fourteen extracts showed disease-controlling activity more than 90% against at least one of the 6 plant diseases tested; eight, seven, and three extracts controlled more than 90% the development of rice blast, tomato late blight, and wheat leaf rust, respectively. However, none of the extracts exhibited in vivo antifungal activity more than 90% against rice sheath blight, tomato gray mold, and barley powdery mildew. From the MeOH extracts of Angelica gigas and A. dahurica showing potent controlling activity against rice blast, 1 and 2 antifungal substances, respectively, were isolated by solvent partitioning and column chromatography. The three compounds were identified to be coumarins, namely, decursin, imperatorin, and isoimperatorin, by mass spectrometry and NMR spectroscopy. They were examined for in vitro and in vivo antifungal activities together with umbelliferone (7-bydroxycournarin) and scopoletin (6-methoxy-7-hydroxycoumarin) containing a free hydroxyl group at position 7 to investigate the structure-activity relationship. In vitro, most of 50% growth inhibitory concentrations ($IC_{50}$) were over $200{\mu}g/mL$, indicating that they have relatively weak antifungal activity. The antifungal activity of decursin and scopoletin, containing cyclic alkoxy groups instead of free hydroxyl group at position 7, was stronger than umbelliferone and scopoletin. Especially, decursin and imperatorin showed potent antifungal activities against Pythium ultimum and Magnaporthe grisea, respectively, with $IC_{50}$ values less than $25{\mu}g/mL$. In vivo, decursin and imperatorin showed potent antifungal activity against rice blast, whereas other coumarins hardly controlled the development of 6 plant diseases tested. These results suggest that the antifungal activity of 7-hydroxycoumarin derivative is substantially increased when the hydroxyl group at position 7 is protected by a stable cyclic alkoxy grouping.
An antagonistic bacterium, Pseudomonas flurorescens MC07 inhibited the mycelial growth of Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Fusarium oxysporum, and Phytophthora capsici in on potato dextrose agan (PDA) and other media. The strain MC07 conlonizes various plant roots and possesses antifungal activity. To determine the role of antifungal activity of the bacterium in disease suppression, a mutant Okm3-4 which lost its activity was isolated after screening 2,500 colonies generated by Omegon-Km insertions. The mutant Okm3-4 showed diminished growth inhibition of R. solani, P. ultimum, F. oxysporum, and Ph. capsici in vitro and had reduced suppressive effects on sesame damping.-off compared to the parental strain. In soils, accumulation of the pathogens by continuous cropping, 90% of sesame plants were killed by natural infection of damping-off whereas, only 29% of plants grown from seeds treated with MC07 were killed. On the other hand, 85% of plants died when sesame seeds were treated with the Okm3-4 cells. This indicated that antifungal activity of MC07 in vitro is directly responsible for the suppression of damping-off disease. Emergence rates of sesame seeds in pots containing diseased soil were 33%. However, MC07 treatments on seeds significantly improved emergence rates, which has similar effects of Benomyl treatment. The mutant Okm3-4 exhibited 53% of emergence rate. This indicated that antifungal activity of MC07 also affects the emergence rate of sesame seeds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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