Kim, Young-Ran;Lee, Eun;Lee, Shee-Yong;Kim, Kyeong-Man
Journal of Ginseng Research
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제20권1호
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pp.1-6
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1996
Effects of Panax ginseng on allergic reactions were studied uslng various in vivo and in vitro experimental models such as 48-hr passive cutaneous anaphylaxis, mediators-induced skin reactions, histamine release from rat peritoneal mast cells, hexosaminidase release from RBL-2H3 cells, and lipoxygenase assay . In all of anti-allergic experiments we conducted, ginseng components (50% ethanol extract or ginseng total saponin or ginsenosides) extracted from Korean red ginseng, did not show significant anti-allergic actions. In 48-hr passive cutaneous anaphylaxis and mediators-induced skin reactions, 50% ethanol extract did not suppress hypersensitivity reactions. Total saponin, 50% ethanol extract, and 8 major ginsenosides did not show inhibitory effects on lipoxygeanse activity. Ginseng total saponin did not inhibit histamine release from rat peritoneal mast cells. All of the ginseng components mentioned above were also tested on RBL-2H3 cells, but none of them inhibited hexosaminidase release from this cell line. These results suggest that Panax ginseng does not have effects on allergic reactions at the level of 50% ethanol extract or total saponin used. All of 8 major saponin components tested ($Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Rd, Re, Rf, $Rg_1$, $Rg_2$), did not inhibit lipoxygenase activity and degranulation events.
인삼(人蔘)의 유효성분(有效成分)으로 알려진 saponin을 Thin layer chromatography로 전개(展開)하여 Digital Densitometer를 사용(使用)하여 한국인삼(韓國人蔘)의 산지별(産地別), 부위별(部位別), 재배연도별(栽培年度別) saponin함량(含量) 및 그 saponin fraction의 조성비(組成比)를 정량(定量)하고, 홍삼(紅蔘) 및 인삼(人蔘)엑기스 제조중(製造中) 일어나는 saponin함량(含量)의 변화(變化)를 연구(硏究)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 산지별(産地別) saponin 함량(含量)에는 별로 차이(差異)가 없었으며, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin군(群)과 panaxatriol을 aglycone으로 하는 sapon군(群)의 조성비(組成比)는 ($1.7{\sim}2.6$) : 1정도였다. 2. 부위별(部位別)로 볼 때, saponin함량(含量)은 미삼(尾蔘)이 12.7%로서 3.3%인 백삼(白蔘)의 4배에 가까운 높은 값을보였다. 그리고 saponin fraction별(別)로 볼 때, panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction도 미삼(尾蔘)이 백삼(白蔘)보다 많으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction은 반대(反對)로 미삼(尾蓼)이 백삼(白蔘)보다 적었다. TLC의 2차원전개결과(次元展開結果), ginsenoside-Rd는 백삼(白蔘)에만 나타나고, 미삼(尾蔘)에서는 나타나지 않는 반면(反面), Rf와 $Rg_1$은 미삼(尾蔘)에서는 분리(分離)되었으나, 백삼(白蔘)에서는 $Rg_1$만이 존재하고, Rf는 분리(分離)되지 않았다 3. 재배연도별(栽培年度別) 근부(根部)의 saponin함량(含量)은 재배기간(栽培其間)에 따라 일정(一定)한 경향(傾向)을 찾아볼 수 없으나, 인삼근당평균(人蔘根當平均) saponin함량(含量)은 2년근(年根)이 90.3mg, 3년근(年根)이 254.2mg. 4년근(年根)이 404.2mg, 5년근(年根)이 996.9mg, 6년근(年根)이 1377.1mg으로 재배기간(栽培其間)이 길어질수록 현저(顯著)하게 높았다. 그리고 인삼지상부(人蔘地上部)의 saponin함량(含量)도 재배기간(栽培其間)에 길어질수록 높아지는 경향(傾向)을 볼 수 있었다. 그러나, saponin fraction별(別)볼 때는 $5{\sim}6$년(年)의 수확기(收穫期)에 가까워질수록 panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 함량(含量)이 높았다. 4. 홍삼제조중(紅蔘製造中)의 saponin fraction별(別) panaxadiol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)도 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 낮아졌으나, panaxatriol을 aglycone으로 하는 saponin fraction의 조성비(組成比)는 건삼(乾蔘)에 비(比)하여 홍삼(紅蔘)이 오히려 높았다. 홍삼(紅蔘)의 Thin layer chromatogram에는 건삼(乾蔘)의 그것에 나타나지 않았던 수개(數個)의 미확인(未確認) spot를 더 볼 수 있었다. 5. Ethanol과 물로 미삼(尾蔘)을 추출(抽出)하여, 29.9%의 인삼(人蔘)엑기스를 얻었는데, 이 엑기스에는 미삼(尾蔘)으로부터 추출수율(抽出收率)이 94.2%에 상당(相當)하는 saponin이 이행(移行) 함유(含有)되어 있었다.
During the controlled atmosphere storage (CA), fresh ginseng showed good appearance in quality, and other deterioration of freshness was not observed until 12 weeks. On the other hand, MA storage had kept freshness only in treatment of 1 until 8 weeks. There was no significant difference between treated and non-treated sample with preservatives, and not treated sample was not infected with various different fungi. Moisture contents and hardness of ginseng in all treatments were not changed much until 12 weeks, and surface shrinkage did not occur either. But shear stress increased somewhat in all treatments after 12 weeks. The granule of microstructure in tissue diminished slightly. The apparent Quality of red ginseng was good until 4 weeks of treatment. But as time passed, white skin and wrinkled skin were generated and darkened in its color. B-1 in CA and E-1 in MA were found to be the most favorable one. The content of crude saponin did not change significantly during storage of CA or MA by preservation conditions and period. Though a small increase in saponin content from 4.92% to 5.43% was recognized in B-1, which was treated with preservative and 6.0% In B-2, control, this could rather explain increment of soluble component by butanol. Thus, there was no change in total contents of ginsenoside pattern and composition of each content. The Rbl content in B-1 and B-2 were 0.98%, and 0.97%, respectively, whereas that of control was 0.96%. E-1 of MA, treated with preservative was 5.32% after 12 weeks, but was 5.73% in control, indicating that ginsenosides pattern was quite similar to that of CA storage.
Using the Korean red ginseng saponin, which is known to world-wide and thd effects of it have been investigated by many reserachers for years. Ginseng saponin, one of the major components of Korea ginseng root, has many various biologic effects, such as cytotoxic effect, tumorcidal activity, protein biosynthesis and membrane modifying effect. The purpose of this study was to evaluate effects of ginseng saponin on the alkaline phosphatase activity of ROS cells in culture. After ROS cells were seeded into a 96-well plate, 96-well plate cultured until confluence was obtained. To evaluate cytotoxic effect of total saponin in cultured ROS cells, the plates were added to each total saponin concentration (0-1mg/ml). After 48hr., cells were counted by stain with 0.2% trypan blue at randomly selected field microscopically. Also, to evaluate alkaline phosphatase(ALP) activity of total saponin in cultured ROS cell, the plate was added to each total saponin concentration (0-1mg/ml) and ALP activity was assayed. To evaluate time-course of ALP activity, $31.25{\mu}g/ml$ of saponin added to 96-well plate. After culture of 6, 12, 24 and 48hr., ALP activity test was performed. To evaluate effect of cycloheximide in ALP activity, 96-well plate was added to saponin and cycloheximide. In control group, the plate was added saponin only. The results were as follows. 1. After the various concentration of total saponin was added in the medium, 500 and $1000{\mu}g/ml$ of total saponin showed cytotoxic effect of ROS(P<0.005). 2. In contrast to control group, 7.6, 15.6, 31.25, 62.5 and $250{\mu}g/ml$ of total saponin increased ALP activity significantly. 3. Otherwise, 500 and $1000{\mu}g/ml$ of total saponin decreased ALP activity significantly(P<0.005). 4. As the time span increases, $31.25{\mu}g/ml$ of total saponin increased ALP activity. 5. Cycloheximide decreased saponin-indueced ALP actitity in ROS(P<0.005). These results suggest that Ginseng total saponin stimulates the ALP activity of rat osteoblastic cells.
홍삼은 건강을 유지하기 위한 약재로 오래전부터 우리나라에서 많이 애용되고 있는 한방소재로서 근래에 와서 홍삼의 유효 성분군이 사포닌으로 밝혀지면서 약리 효능적인 측면에서는 연구가 급진전되었으나, 홍삼의 유용 사포닌 성분을 안정성 높게 회수하기 위한 추출방법 및 홍삼을 추출하는데 있어 이화학적인 특성에 영향을 주는 조건에 대해서는 현재까지 연구된 바가 많지 않아 홍삼 추출조건에 대한 체계적인 연구가 필요한 실정이다. 이에 본 연구에서는 홍삼 추출기를 이용하여 추출조건에 따른 사포닌 성분 및 이화학적 변화에 대해 조사하여 비교분석하였다. 홍삼추출액의 총 사포닌 함량에 있어서는 추출온도와 시간이 증가함에 따라 총 사포닌 함량이 감소하는 경향을 나타내었으며, $75^{\circ}C$, 24시간 추출조건에서 0.774 mg/g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. 개별 ginsenoside 함량에서도 대부분 추출온도와 시간이 증가될수록 함량이 감소하였지만, $Rg_3$의 경우에는 일정범위내에서의 추출조건에서는 함량이 오히려 증가하는 경향을 나타내었다. 이는 홍삼 추출 시 가열 과정에서 일부 ginsenoside가 $Rg_3$로 구조 전환되면서 그 함량이 증가한 것으로 추정된다. 또한 추출조건별 홍삼추출액의 이화학적 변화에 있어서는 사포닌의 경우와 반대로 추출온도와 시간이 증가될수록 $^{\circ}Brix$와 색차는 증가되는 반면, pH는 감소하는 등 전반적으로 품질 측면에서는 안정화되는 경향을 나타내었으며, 품질적인 특성만을 고려한 적정 추출조건은 $85^{\circ}C$ 내외에서 48시간 추출하는 것이 효율적이라 판단된다. 따라서 이러한 결과를 바탕으로 홍삼 추출액의 품질특성과 사포닌의 안정적인 추출을 위한 적정 추출조건은 ginsenosides의 손실이 최소화되는 $80^{\circ}C$ 내외에서 물리적 성질이 안정화되기 시작하는 48시간 이내로 추출하는 것이 적합한 것으로 사료된다. 이와 같은 결과는 홍삼 추출방법에 있어서 최적의 추출조건에 대한 정보를 주는 것이며, 더 나아가 고농도 사포닌성분이 함유된 기능성 홍삼제품 개발에 기초정보를 제공하는 결과라 사료된다.
홍삼(紅蔘)과 백삼(白蔘) 항산화작용(抗酸化作用)에 의한 노화억제작용(老化抑制作用)을 구명(究明)하기 위하여 80% ethanol extract 및 수포화(水飽和)부탄올로 이행(移行)한 saponin을 시료(試料)로 하여 in vitro 및 in vivo 실험(實驗)을 통하여 홍삼(紅蔘)과 백삼(白蔘)의 노화억제작용(老化抑制作用)을 비교(比較)하였다. DPPH에 대한 전자공여능(電子供與能)(EDA), TBA value 및 peroxide value에 의한 과산화지질생성억제작용(過酸化脂質生成抑制作用), superoxide dismutase 및 peroxidase의 활성측정(活性測定)등으로 홍삼(紅蔘)과 백삼(白蔘)의 노화억제작용(老化抑制作用)을 비교(比較)한 결과(結果), 홍삼(紅蔘)은 장기간(長期間)에 걸친 연속투여(連續投與)에서 백삼(白蔘)보다 과산화지질생성억제작용(過酸化脂質生成抑制作用). superoxide dismutase 및 peroxidase의 활성(活性)을 유의성(有意性)있게 증가(增加)하였다. 생체내실험(生體內實驗)에서 홍삼(紅蔘)이 백삼(白蔘)보다 노화억제작용(老化抑制作用)이 현저한 것은 증삼(蒸參) 및 가공처리중(加工處理中) saponin pattern의 변화(變化)에 기인(起因)하며 백삼(白蔘)의 PT/PD ratio가 0.401인데 반(反)해 홍삼(紅蔘)의 PT/PD ratio가 0.561로서 triol saponin이 증가(增加)되었기 때문이다.
Lysosomal enzymes might play a most important role in the pathogenesis od diabetic microangiopathy. Some glycosidases, which participate in the catabolism of glycoprotein, are significantly decreased in diabetic mice. In search of new potential lysosomal enzyme inducers, we examined the effects of crude red-ginseng saponin fraction on N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminidase, $\beta$-D-galactosidase and $\alpha$-D-mannosidase activities in the liver and kidney of normal and streptozotocin induced diabetic mice. It was found that i.p. administration of ginseng saponin produced the induction of lysosomal enzymes in the kidney more intensively than in the liver. The obtained results suggest the possibility that ginseng saponin might prevent the diabetic microangiopathy.
The present study was carried out to investigate the effects of Panax ginseng saponin extracts on the dexamethasone-induced apoptosis of mouse thymus in vivo and mouse thymocytes in vitro. The saponin fractions of red ginseng (R-SAP) and white ginseng (Wl-SAP) were provided by the Korea Ginseng & Tobacco Research Institute, and the other saponin fraction of white ginseng (W2-SAP) was extracted in our laboratory. 1. The male ICR mice (3~4 wk old; weighing 15$\pm$2 g) were given by each saponin fraction of 5 mg/kg/ day for 4 days, and at one hour after the last treatment, they were injected by deuamethasone (5 mg/kg : DX). The mouse thymus was extracted at 6 hours after DX injection, and they were stained with hematoxylin-eosin reagents and an Apop-Tag kit, respectively, and the thymocytes prepared from it were labelled with anti-mouse FITC-anti-CD4 and anti-mouse PE-anti-CD8 and then analyzed by fluorescence activated cell sorter (FACS). DX-induced reduction of thymus weight was significantly attenuated by W2- SAP but was not affected by other saponin fractions. And DX-induced apoptotic death of thymocytes, appeared in the histologic findings of the thymus, was inhibited by the saponin fractions and the order of these inhibitory potencies was R-SAP》W2-SAP>Wl-SAP. However, in respect of T cell receptors, the differentiation of thymocytes seems not to be changed by treatments with DX or/and the saponin fractions. 2. In the primary thymocyte culture, the DX-induced reduction of thymocyte MTT values was rather greater in RPMI 1640 medium of IWc fetal bovine serum (FBS) or horse serum (HS). In addition, the DX-Induced MTT reduction was significantly inhibited by R-SAP or W2-SAP, in the culture using that medium of 5% FBS or HS. But these saponin fraction did not effected the DX-induced reduction of thymocyte MTT value in primary culture of 10% FBS or 10% HS. These results suggest that R-SAP and some W-SAP fractions may protect thymocyte from stress or glucocorticoisteroid-induced death of them.
본 연구는 홍삼 추출기를 이용하여 기능별 사포닌의 함량 및 품질의 최적화 조건을 설정하기 위하여 실시하였다. 홍삼 추출액의 총 사포닌 함량은 $75^{\circ}C$에서 18시간 추출한 용액이 64.6 mg / 100 ml로 최고 함량을 나타냈고 추출 온도와 시간이 증가할수록 감소하였다. $Rb_2$와 Re 함량은 $75^{\circ}C$에서는 12시간 추출한 홍삼액이 11.8 mg / 100 ml로 가장 많았고 추출시간과 추출온도가 증가할수록 급격히 감소하였다. Prosapogenin 함량은 $85^{\circ}C$에서 24시간 추출한 홍삼액이 34.9 mg / 100 ml로 가장 많았고, $75^{\circ}C$와 $85^{\circ}C$에서는 추출 시간이 길어짐에 따라 증가하는 경향이었으나 $95^{\circ}C$에서는 감소하는 경향이었다. 홍삼 추출액의 총 당은 $95^{\circ}C$에서 추출시간을 길게 할수록 함량이 증가하였고, 당도는 $95^{\circ}C$에서 24시간 추출한 용액이 4.0%로 가장 높았다. 탁도는 $95^{\circ}C$에서 추출시간이 길수록 증가하였으며, pH 및 Hue 값은 추출시간이 길어질수록 낮아졌다. 따라서 홍삼추출액을 제조할 때 1차 추출에서는 온도를 낮게하여 사포닌의 함량을 높이고, 2차 추출에서는 온도를 높게하여 맛을 증진시켜 혼합하는 방법이 좋을 것으로 생각된다.
In order to investigate the inferior factor of red ginseng quality, the contents of various chemical components, physico-chemical properties and arrangement state of ginseng cells were observed. Contents of total reducing sugar, reducing sugar, crude protein, crude fibre and specific gravity of inside white part of red ginseng were less than those of normal part. But differences in content of crude saponin, HPLC pattern of ginsenosides and reducing ability for DP P H(1,1-dipheny 1-2-picrylhydrazyl) between normal and inside white part of red ginseng were not found. The optical density of 1 water extract of normal part of red ginseng did not differ from that of inside white 1 part of red ginseng, but the visible and UV absorbance of acid hydrolyzate of normal red ginseng showed higher than those of inside white part of red ginseng. The differences in the internal color and tissue of normal and inside white part of red ginseng were easily found with naked eye, and by the microscopic fractography, the orangement state of ginseng cell in the inside white part of red ginseng was less dense than that in normal red ginseng.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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