타액검사기는 방법이 간단하고 단시간 내에 검사를 할 수 있는 장점이 있다. 하지만 타액 채취가 용이하고 장치의 사용이 간단하나 그 결과의 신뢰성에 영향을 미치는 요인에 대해서는 검증해 볼 필요가 있다. 이번 연구는 타액검사기의 측정 결과에 영향을 미칠 수 있는 요인 중 외부변수인 시간적 요인을 분석하기 위해 측정 시간에 따른 검사 결과의 차이를 비교하였다. 또한 내부변수를 파악하기 위해 타액검사기 측정값 사이의 관련성을 분석하였다. 나이, 성별, 질환의 유무에 상관없이 무작위적으로 선정한 20명의 사람들을 대상으로 하여 타액을 채취하였다. 평균 나이는 46.6세였고, 남자 10명, 여자 10명이었다. 채취한 타액을 바로 타액검사기로 측정한 것을 I군으로 하였다. 또한 채취한 타액을 종이컵에서 10분간 공기중에 방치한 후 타액검사기로 측정한 것을 III군으로 하였다. 그리고 I군으로 사용한 것을 30분 후 재 측정하여 II군으로, III군으로 사용한 것을 30분 후 재 측정한 것을 IV군으로 하였다. 실험 결과 cariogenic bacteria, acidity, buffer capacity, blood, leukocyte, protein and ammonia 중 buffer capacity만 제외하고 나머지는 모두 II, IV군에서 유의한 변화가 있었다. 또한 측정값 중 cariogenic bacteria는 leukocyte, protein과 상호관련성이 있었고 buffer capacity는 acidity, protein과, 그리고 protein은 buffer capacity, leukocyte와 연관성이 있었다. 결론적으로 외부변수인 측정 시간에 따른 측정결과 값의 차이는 각각 다르게 나타났으며, 이는 타액검사 시 시간요인의 중요성을 의미하는 것이다. 또한 내부변수인 측정값 간의 상호관계를 이용하여 임상적으로 접근할 경우 그 연관성에 대한 고려가 필요하다.
Han, Ji-Hye;Kim, Hye-Mi;Seo, Deog-Gyu;Lee, Gene;Jeung, Eui-Bae;Yu, Frank H.
Journal of Periodontal and Implant Science
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제45권2호
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pp.69-75
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2015
Purpose: Salivary fluid formation is primarily driven by Ca2+-activated, apical efflux of chloride into the lumen of the salivary acinus. The anoctamin1 protein is an anion channel with properties resembling the endogenous calcium-activated chloride channels. In order to better understand the role of anoctamin proteins in salivary exocrine secretion, the expression of the ten members of the anoctamin gene family in the mouse submandibular gland was studied. Methods: Total RNA extracted from mouse submandibular salivary glands was reverse transcribed using primer pairs to amplify the full-length coding regions of each anoctamin gene and was subcloned into plasmid vectors for DNA sequencing. Alternative splice variants were also screened by polymerase chain reaction using primer pairs that amplified six overlapping regions of the complementary DNA of each anoctamin gene, spanning multiple exons. Results: Multiple anoctamin transcripts were found in the mouse submandibular salivary gland, including full-length transcripts of anoctamin1, anoctamin3, anoctamin4, anoctamin5, anoctamin6, anoctamin9, and anoctamin10. Exon-skipping splicing in the N-terminal exons of the anoctamins1, anoctamin5, and anoctamin6 genes resulted in multiple alternative splice variants. No expression of anoctamin2, anoctamin7, or anoctamin8 was found. Conclusions: The predominant anoctamin transcript expressed in the mouse submandibular gland is anoctamin1ac. The chloride channel protein produced by anoctamin1ac is likely responsible for the $Ca^{2+}$-activated chloride efflux, which is the rate-limiting step in salivary exocrine secretion.
Adenoid cystic carcinoma (ACC) of salivary glands has a protracted clinical course with perineural invasion, delayed onset of hematogenous metastasis, and poor responses to classical cytotoxic chemotherapic agents. Most deaths from salivary ACC are caused by lung metastases that are resistant to conventional therapy. Therefore, knowledge of cellular properties and tumor-host interactions that influence the dissemination of metastatic cells is important for the design of more effective therapy of salivary cancer. I determined in vitro expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) and its downstream effectors and vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)-2 on a human salivary ACC cell line (ACC2). I also evaluated the expression of EGF and VEGF signaling molecules and metastasis-related proteins on human salivary ACC cells orthotopically growing in nude mice. In Western blot and immunohistochemical analyses, EGFR and VEGFR-2 were presented and phosphorylated in ACC2 cells. In human parotid cancer xenografts in nude mice, EGF and VEGF signaling molecules, IL-8, and MMP-9 were expressed at markedly higher levels than in normal parotid tissues. Moreover, tumor-associated endothelial cells of this orthotopic parotid tumor expressed phosphorylated VEGFR-2 and phosphorylated Akt, which is a cell-survival protein. These data show that those biomarkers can be molecular targets for therapy of salivary ACC, which has a propensity for delayed lung metastasis.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권6호
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pp.530-543
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2006
Adeonoid cystic carcinoma (ACC) is one of the most common malignant tumors of salivary glands. It is characterized by a relentless regrowth especially around nerve tissues and a high rate of hematogenous distant metastasis. Clinically most deaths from salivary ACC are caused by delayed lung metastases that are resistant to conventional chemotherapy. So, knowledge of cellular and molecular properties that influence the dissemination of metastatic tumor cells, is important for new treatment strategies of metastatic lesions. We determined expressions of angiogenic signaling molecules microvessel density (MVD) using surgical specimens of human salivary ACC. Protein expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF), VEGF receptor (VEGFR)-2, activated VEGFR-2, and human CD31 were assessed in 20 cases of salivary ACC by immunohistochemical staining. Most of the tumors, especially ACC with a tubulocribriform pattern, were positive for antibodies of VEGF, VEGFR-2, and activated VEGFR-2. The overall percentages of the 20 specimens expressing VEGF, VEGFR-2, activated VEGFR-2 were 90, 95, and 95%, respectively. Immunoreactivities of the biomarkers in salivary ACC were higher than those in normal salivary gland. Furthermore, immune-related cells as well as tumor cells expressed VEGF/VEGFR-2. Microvessel density of salivary ACC was higher than that of normal salivary gland (P<0.05). Taken together, angiogenic signaling molecules are actively expressed in salivary ACC. And we suggest that these molecules may have critical role in the hematogenous spread of salivay ACC, which has a propensity for delayed lung metastasis. Therefore, these biomarkers can be molecular targets for therapy of metastasis of salivary ACC.
Salivary microbiota alterations can correlate with dental caries development in children, and mechanisms mediating this association need to be studied in further detail. Our study explored salivary microbiota shifts in children and their association with the incidence of dental caries with dentine involvement. Salivary samples were collected from children with caries and their subsequently matched caries-free controls before and after caries development. The microbiota was analyzed by 16S rRNA gene-based high-throughput sequencing. The salivary microbiota was more diverse in caries-free subjects than in those with dental caries with dentine involvement (DC). Although both groups exhibited similar shifts in microbiota composition, an association with caries was found by function prediction. Analysis of potential microbiome functions revealed that Granulicatella, Streptococcus, Bulleidia, and Staphylococcus in the DC group could be associated with the bacterial invasion of epithelial cells, phosphotransferase system, and ${\text\tiny{D}}-alanine$ metabolism, whereas Neisseria, Lautropia, and Leptotrichia in caries-free subjects could be associated with bacterial motility protein genes, linoleic acid metabolism, and flavonoid biosynthesis, suggesting that functional differences in the salivary microbiota may be associated with caries formation. These results expand the current understanding of the functional significance of the salivary microbiome in caries development, and may facilitate the identification of novel biomarkers and treatment targets.
The ticks feed large amount of blood from their hosts and transmit pathogens to the victims. The salivary gland plays an important role in the blood feeding. When the female ticks are near engorgement, the salivary gland gradually loses its functions and begins to rapidly degenerate. In this study, data-independent acquisition quantitative proteomics was used to study changes in the phosphorylation modification of proteins during salivary gland degeneration in Haemaphysalis longicornis. In this quantitative study, 400 phosphorylated proteins and 850 phosphorylation modification sites were identified. Trough RNA interference experiments, we found that among the proteins with changes in phosphorylation, apoptosis-promoting Hippo protein played a role in salivary gland degeneration.
It is known that human saliva includes various kinds of salivaru proteins that show genetic polymorphism. Withrespect to salivary protein polymorphism, this study was conducted on 160 healthy Koreans between the ages of 20 and 29 chosen randomly : their parotid slaiva was collected, freeze-dried, and horizontally electrophoresed over acid-urea starch gel. Aluminum lactate-lactic acid was also used as buffer solution. The gel was stained with amidoblack 10B/1% acetic acid solution, and then destained with 0.5M H2SO4 solution. Accordingly, the parotid middle-band protein(Pm) identified, and its phenotypes and gene frequency were obtained. The obtined results were as follows : 1. The phenotypes of parotid middle band protein(Pm) observed in parotid saliva of the 160 Koreans were Pm(+) in 91 people (56.9%) and Pm(-) in 69 people (43.1%) 2. The gene frequency of Pm+ was 0.343, and that of Pm-waw 0.657. 3. The gene frequency of parotid middle band protein (Pm) obtained from Korean's parotid saliva was midway between that of Japanese and Chinese.
The differentiation of pluripotent stem cells has been used to study disease mechanisms and development. We previously described a method for differentiating human pluripotent stem cells (hPSCs) into salivary gland epithelial progenitors (SGEPs). Here, cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) knockout hPSCs were differentiated into SGEPs derived from CFTR knockout hESCs (CF-SGEPs) using the same protocol to investigate whether the hPSC-derived SGEPs can model the characteristics of CF. CF-a disease that affects salivary gland (SG) function-is caused by mutations of the CFTR gene. Firstly, we successfully generated CFTR knockout hPSCs with reduced CFTR protein expression using the CRISPR-Cas9 system. After 16 days of differentiation, the protein expression of CFTR decreased in SGEPs derived from CFTR knockout hESCs (CF-SGEPs). RNA-Seq revealed that multiple genes modulating SG development and function were down-regulated, and positive regulators of inflammation were up-regulated in CF-SGEPs, correlating with the salivary phenotype of CF patients. These results demonstrated that CFTR suppression disrupted the differentiation of hPSC-derived SGEPs, which modeled the SG development of CF patients. In summary, this study not only proved that the hPSC-derived SGEPs could serve as manipulable and readily accessible cell models for the study of SG developmental diseases but also opened up new avenues for the study of the CF mechanism.
Heo, Seok-Mo;Lee, Sol;Wang, HongTao;Jeong, Jeong Hyeok;Oh, Sang Wook
Journal of Periodontal and Implant Science
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제46권5호
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pp.320-328
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2016
Purpose: Human saliva, as a vital part of the immune defense system, contains a number of distinct proteins and peptides. Recently human common salivary protein 1 (CSP1) has been identified as an abundant salivary protein and may play a role in promoting the binding of cariogenic bacteria to salivary pellicles. However, nothing else is known regarding the role of CSP1 in periodontology. The aim of this study was to quantify and compare CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients. Methods: This controlled clinical study was conducted in periodontally healthy individuals and patients with chronic periodontitis Chonbuk National University Hospital, with Institutional Review Board approval. Whole saliva samples were collected from 36 healthy subjects and 33 chronic periodontitis patients and analyzed. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and immune blotting were conducted to ensure that anti-CSP1 monoclonal antibody (mAb) binds to CSP1 in human saliva. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system was house-fabricated using mAb-hCSP1#14 and mAb-hCSP1#4 as a capture and a detector mAb, respectively. The CSP1 concentrations in saliva from 36 healthy subjects and 33 periodontal patients were quantified using the CSP1 sandwich ELISA system, and the results were analyzed using the Student's t-test. Results: Immunoblot analysis using mAb-hCSP1 as a probe confirmed that CSP1 in human saliva existed as a single band with a molecular weight of approximately 27-kDa. The quantification of CSP1 concentrations by CSP1 ELISA showed that the median values (25th to 75th percentiles) of periodontal patients and healthy subjects were 9,474 ng/mL (range, 8,434.10,139 ng/mL) and 8,598 ng/mL (range, 7,421.9,877 ng/mL), respectively. The Student's t-test indicated the presence of a statistically significant difference between the 2 groups (P=0.024). Conclusions: The presence of a significant difference in CSP1 levels between healthy subjects and periodontal patients suggests that CSP1 may be a potential biomarker for the detection or screening of periodontitis patients.
The purpose of this study was to evaluate the polymorphosms in parotid salivary proteins of the patients with diabetes mellitus. Saliva from the parotid glands was collected from 94 healthy Korean adults who were live in Kwang-ju and from 33 diabetes mellitus patients who had more than 140mg/dl of fastingblood sugar for one week. Diabetes mellitus patient group was subdivided to insulin dependent diatetes mellitus (IDDM) and non-insulin dependent diabetes mellitus (NIDDM). In the saliva collected from the parotid glands, parotid acidic protein(Pa), proline-rich protein(Pr) and double band protein(Db) were analyzed to evaluate the distribution of phenotype using alkaline slab polyacrylamide gel electrophoresis. The results were as follows : 1. The parotid acidic protein (Pa) was found more frequently in the diabetes mellitus patient group than in the control group, but the difference was not statistically significant. 2. The Pr(1-2) type was found more frequently in the control group, but the Pr(1-1) and Pr(2-2) type were found more freqnently in the diabetes mellitus patient group and the difference of phenotypic distribution was statistically significant between the two groups. (p<0.05) 3. The parotid acidic protein(Pa) and Pr(1-2) type were found more frequently in the noninsulin dependent diabetes mellitus (NIDDM) patients than in the insulin dependent diabetes mellitus patients, though the difference was not statistically significant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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