최근 경제적이고 안정적인 rotifer 배양방법으로 담수산 농축 Chlorella를 이용한 rotifer 고밀도 배양이 수행되었고 이러한 배양방법은 rotifer의 양적 확보에 매우 효과적인 것으로 나타났다. 이처럼 고밀도 배양에 이용되는 담수산 농축 Chlorella는 무균 발효조에서 배양되기 때문에 가격이 매우 싸고, 세포내 rotifer 성장에 많은 영향을 미치는 B$_{12}$함량이 매우 풍부하다. (중략)
본 연구는 vitamin $B_{12}$의 첨가에 따른 담수산 rotifer, Brachionus calyciflorus의 유성생식율 및 내구란 생산을 조사하였다. Vitamin $B_{12}$의 첨가방법은 rotifer의 먹이생물인 농축 담수산 Chlorella에 첨가하여 공급하였고 실험용기는 250mL 삼각플라스크에서 실시하였다. Rotifer의 최고밀도는 vitamin $B_{12}$의 첨가량이 높을수록 낮게 나타났고 6ppm구에서 가장 낮은 138개체/mL를 보였다. 유성생식 율과 수정률은 vitamin $B_{12}$의 첨가량이 많을수록 높아 6ppm구에서 각각 $63.0\%$와 $89.6\%$로 조사되었다. mL당 내구란 생산은 1.5 ppm구에서 231개/mL로 가장 높게 나타났으나 다른 vitamin $B_{12}$의 첨가구와의 유의적인 차이는 없었고, Rotifer $10^6$개체당, Chlorella 건중량 (g) 당 내구란 생산량은 6ppm구에서 각각 11,259개, 121,252개로 가장 높게 나타났다 Vitamin $B_{12}$의 첨가량에 따라 형성된 내구란의 부화율은 vitamin $B_{12}$를 첨가한 실험구에서 $67.7\sim80.9\%$의 부화율을 보여 첨가하지 않은 대조구 $48.2\%$보다 높게 나타났다. 따라서 담수산 rotifer, B. calyciflorus의 내구란 생산과 내구란의 부화율에 vitamin $B_{12}$가 영향을 미친 것으로 판단된다.
A new and a unique Brachionus rotifer was found in Hwajinpo coastal lagoon in Gangwon Province, South Korea. This Brachionus certainly originated from the wild rather than from aquaculture stations because Hwajinpo coastal lagoon has been under rigorous control as a military protected area and therefore could not have been contaminated by aquaculture stations. The new strain was identified as Brachionus rotundiformis based upon its morphological characteristics. The parthenogenetic female of this new rotifer strain typically shows characters similar to those of B. rotundiformis, such as the pot shape of the body, rounded dorsal plate compared with flattened ventral plate, elliptical mictic egg, four frontal spines, six pointed occipital spines, non-nodal foot, two toes, trophi typical of the Brachionus genus with five uncus plates resembling comb teeth, one wide symmetrical manubrium and ramus, and no stiffened spine as is seen in freshwater Brachionus rotifers. Moreover, its lorica was rather small in size compared with other common rotifer strains that serve as live-food organisms (Guam, Thai, and Bali strains). This new and unique Korean brackish rotifer, a B. rotundiformis strain, was therefore named the National Fisheries Research and Development Institute (NFRDI) $N^{\circ}1$ rotifer strain.
해산어류 및 갑각류 유생 사육 시 초기 먹이로 요구되는 rotifer를 고온기나 저온기에 생산하고자 할 때 Chlorella 대용으로서 적합한 식물성 먹이생물에 관한 실험요약은 다음과 같다. 1. 고온에서 가장 성장이 양호한 종은 Nannnochioris oculata로 $28^{\circ}C$, $33\%_{\circ}$, 5,000 lux가 최적 환경 요인으로 밝혀졌다. 2. 저온에서 가장 성장이 양호한 종은 Phaeodactylum tricornutum이었고 이 종의 최대 성장요인은 보험구간중 가장 고온인 $10^{\circ}C$, 8,000 lux 및 $30\%_{\circ}$이었고 $8^{\circ}C$에서도 성장이 양호한 편이었다. 3. Nannnochioris oculata 와 Phaeodactylum tricornutum을 대조구인 Chlorella ellipsoidea와 함께 고온 및 저온에서 각각 대량배양하여 rotifer를 배양한 결과 rotifer 개체 밀도는 Nannnochioris oculata를 공급하여 배양한 것이 Chlorella ellipsoidea에 비해 월등히 높았고 Phaeodactylum tricornutum을 공급하여 배양한 경우는 Chlorella ellipsoidea보다 약간 낮은 것으로 나타났다. 지방산 조성에서도 Nannnochioris oculata가 Chlorella ellipsoidea나 Phaeodactylum tricornutum보다 polyene의 비가 높아 영양적인 측면에서도 유리한 것으로 확인되었다.
한국 염전지역에서 순수분리한 rotifer, B. plicatilis(S-type) 6 strains의 염분(10, 20, 30 ppt)에 따른 내구란 생산을 조사하였다. Rotifer는 20ml 시험관 배지에서 Nannochloris oculata를 먹이로 $28^{\circ}C$에서 배양하였다. Rotifer 최대밀도는 OKK strain이 염분 10ppt에서 2,050개체/ml로 나타났다. 성장률은 MOK strain의 10 ppt실험구에서 1.028로 가장 빨랐다. 유성생식률은 CHA와 WON strain은 염분이 낮을수록 높게 나타났지만 MOK strain은 염분이 높을수록 높게 나타났고 SOS strain은 염분 20 ppt에서 가장 높게 나타났다. PUA strain은 개체밀도가 높았지만 유성생식이 전혀 나타나지 않았고 OKK strain은 $1.1\~3.0\%$의 낮은 유성생식률을 보였다. CHA, MOK SOS, WON strain의 수정률은 모든 염분구에서 $10.4\~68.8\%$로 나타났지만 OKK strain은 수정이 이루어지지 않았다. Rotifer의 내구란 생산은 strain과 염분에 따라서 차이를 보였다. 20m1 시험관배지에서 가장 높은 내구란 생산은 WON strain으로 10 ppt 실험구에서 4,065개였다. 이와 같은 결과로 볼때 rotifer의 내구란을 대량생산하기 위해서는 적합한 strain의 선택과 염분의 조정이 필요한 것으로 판단된다.
본 연구는 반 연속 rotifer 고밀도 배양에 있어서 배양 수온, 초기 접종밀도 및 pH조절에 따른 담수산 rotifer, Brachionus calyciflorus와 해수산 rotifer, B. rotundifomis의 생산성을 비교 조사하였다. 실험은 6L 배양용기 (배양수 5L)에 담수산 농축 Chlorella를 먹이로 공급하였다. pH를 조절하지 않은 반 연속 rotifer 고밀도 배양에서 B. calyciflorus와 B. rotundifomis의 일일 평균 생산량은 수온이 높을수록 높게 나타났고 수온 $32^{\circ}C$ 실험구에서 B. calyciflorus가 일일 $44\times10^6$개체로 가장 높은 생산량을 보였다 (P<0.05). 또한 이들의 생산 기간은 B. calyciflorus가 B. rotundiformis보다 상당히 길게 나타났다. 한편 pH를 7로 조절하면서 B. calyciflorus와 B. rotundiformis의 초기 접종밀도를 5,000개체/mL로 할 경우, 생산 기간이 각각 12일과 11일로 초기 접종밀도 10,000개체/mL의 2일과 8일 보다 길게 나타났고, 생산률도 $130\%$로 높게 나타났다. 본 연구를 종합하여 볼 때, B. calyciflorus와 B. rotundiformis의 반 연속 고밀도 배양에 있어서 생산 효율과 먹이 비용을 고려할 때 $32^{\circ}C$에서 pH 7 조절 하에 초기 접종밀도를 5,000개체/mL로 하는 것이 가장 효과적이고 안정적인 반 연속 rotifer 고밀도 배양이 될 것으로 판단된다.
Chun Chang Zoon;Park Heum Gi;Hur Sung Bum;Kim Young Tae
한국양식학회지
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제9권4호
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pp.453-459
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1996
Cellulase was purified from marine rotifer, Brachionus plicatilis, to homogeneity by using chromatographic methods. Purified enzyme is an endo-${\beta}$-1,4 glucanase and shows a strong hydrolytic activity against carboxymethyl (CM) -cellulose. The physicochemical parameters of enzyme activity were determined. The molecular weight of the purified protein was approximately 62 kDa as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The enzymatic capability to digest cellulose of Chlorella cell wall was compared with that of other well known cellulases from Thermomonospora fusca. Experiments involving Chlorella digestion indicated that CM-cellulase from marine rotifer, Brachionus plicatilis, could digest Chlorella very efficiently while cellulase purified from Thermomonospora fusca did not. From the result here, we propose that the cellulolytic system from marine rotifer is responsible for the hydrolysis of cellulosic wall of Chlorella, probing that rotifer digests Chlorella as a major live food.
One of freshwater rotifer (Brachionus calyciflorus) is very useful as a live food organism for early larval rearing of freshwater aquaculture industry. However, the knowledge about freshwater rotifer culture is scarce. On the other hand, marine rotifer culture as live food organisms is done, almost perfectly. In this study, I show to be benefit experimental results for successful freshwater larval rearing through the observation with microcosm structure in freshwater rotifer culture tanks.
Interspecific relationship between a euryhaline rotifer Brachionus rotundiformis and a cyclopoid copepod Apocyclops borneoensis was investigated in the laboratory culture. In a mixed culture of B. rotundiformis and A. borneoensis, population growth of B. rotundiformis was suppressed from day 10, while growth in a monoculture population continuously increased throughout the experimental period. However, the population growth of A. borneoensis in the mixed culture did not markedly differ from that in a monoculture population. Suppression of B. rotundiformis growth coincided with a decrease in the numbers of both non-egg-bearing and egg-bearing females, and increasing resting egg formation. Growth of A. borneoensis was not affected by the presence of the rotifer. However, relative growth index of ovisac bearing females in the mixed culture was 1.62 times higher than that in the monoculture. Presence of the copepod did not greatly reduce the food available to the rotifer population. The rotifer B. rotundiformis responded in a unique way, to stresses such as physical damage (filtering by A. borneoensis) with the production of many resting eggs to increase its chances of survival.
이 연구에서는 해산어의 종묘 생산에 필요한 대량 배양용 로티퍼, Brachionus rotundiformis의 종 보존 방법으로서 무균 로티퍼의 이용을 검토했다. 로티퍼는 개량형 항생제 혼합액 AM9을 사용하여 무균 처리한후, 무균 Nannochloropsis oculata를 먹이로 공급하여 연속 유지 배양했다. 각각 다른 시기의 3회 (trial 1, 2 and 3)에 걸친 로티퍼 배양결과, 무균 배양 (axenic culture)에서는 비교적 안정적인 증식을 보인 반면, 유균 배양 (non-axenic culture)에서 로티퍼의 증식은 불안정적으로 각 시기에 따라서 심한 증식의 차이가 관찰되었다. 이 결과는 유균 배양에서 로티퍼의 증식에 직접적으로 악영향을 미치는 박테리아가 무균 처리과정을 통해서 제거되었음을 증명한다. 로티퍼 무균 배양 방법의 일반화 또는 대량 배양용 로티퍼의 씨앗으로서의 무균 로티퍼의 이용은 로티퍼의 안정 배양은 물론 유용 수산 생물의 대량 폐사를 일으키는 원인 생물을 사전에 제거할 수 있는 유효한 방법이 될 수 있다고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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