Tissue culture of the roots of Panax ginseng was carried out to enhance the production of ginseng callus as well as to increase its contents of ginsenosides. A long cylinder type callus mass was formed when cultured IK callus by rotary shaking culture method, the growth ratio of the callus being 7.71 which was approximately 4 fold higher than those obtained by other culture methods. Ginsenosides $Rg_1$, Re and $Rb_1$ could be detected from the callus mass by TLC, however, their total contents were revealed to be approximately 9% compared to that of the fresh ginseng root equivalent by HPLC analysis,.
Panax ginseng root has been widely used as an important drug for thousands years in China, Korea and Japan. The main effective components of ginseng have been believed to be saponins. However, ginseng cultivation is very difficult and needs many years for growth. It has already been shown that Panax ginseng callus produces a considerable amount of the same kinds of saponins as in intact plants. Various culture conditions were examined for increased production of ginseng saponins by cell culture. The saponin contents and the growth rates in two cell lines of ginseng callus were compared in static and suspension cultures, rotary and reciprocal shaking cultures. It was shown that the growth rate in rotary shaking cultures of D5-B2K-B2K callus was the highest and ginseng saponin production was most effective in reciprocal cultures of D5-B2K-B2K callus. The saponin content per fresh weight of the culture was 1.03 times higher than that of the fresh ginseng root.
Actinomycetes CS0703 has been isolated in soil sample from location in the Jeju province. Korea. and produces alkaline extracellular proteases. To maximize protease production, initial pH of the culture medium was adjusted to 12.0 with NaOH and incubated at $48^{\circ}C$ on a rotary shaking incubator(180rpm). Actinomycetes CS0703 produced high level of protease at late exponential phase when grown in OSYM medium (oatmeal 2.0%. soybean meal 1%. dried yeast 1%. mannitol 1%). (omitted)
The principal objective of this study was to determine the optimal liquid culture conditions in shake flasks for maximal sporulation of Beauveria bassiana. The optimal initial pH for the spore production of B. bassiana using Potato Dextrose Broth was 5.2. The screening in shake flasks of carbon and nitrogen sources resulted in the identification of an optimal medium based on 3% sucrose and 1% casamino acid, with a C : N ratio of 22 : 4. Using this medium, a production level of $5.65{\times}10^7$ spores per ml was obtained after 5 days of culture. Using 3% corn meal, 2% corn steep powder, and 2% rice bran, the maximum spore concentration of $8.54{\times}10^8$/ml was achieved 8 days after inoculation at $25^{\circ}C$ in a rotary shaking incubator operated at 200 rpm. This represents a yield gain of approximately 2.89 times that of pre-optimization.
Streptomyces tendae JC412 secreted two forms of protease(ST -1 and ST -2) when grown in OSY medium (oatmeal 1.5%. soybean meal 2%. dried yeast 1 %) supplemented with glucose(0.5%) and KH2PO4(0.05%). Initial pH of the culture medium was adjusted to 10.0 with NaOH and incubated at $27^{\circ}C$ on a rotary shaking incubator (180rpm). High- molecular-weight protease ST-1 was heat labile. whereas low molecular protease ST-2(22.000 Da) was reported to be heat stable. (omitted)
A strain capable of producing thermostable chitinase suitable for chitooligosaccharide production was isolated from high temperature environment and identified as Bacillus licheniformis. The chitinase from Bacillus licheniformis KFB-Cl4 was only induced by addition of colloidal thitin into the basal medium as carbon source, showing the decrease of the chitinase production by supplernental addition of other carbon sources into the medium containing 1.0% colloidal chitin. Among organic and inorganic nitrogen sources, yeast extract was the most effective for the increase of total activity and specific activity, and had high affinity for the enzyme production. The optimum temperature of cell growth and thermostable chitinase production was 55$\circ$C. The optimum culture medium was composed of 1.2% colloidal chitin, 0.15% K$_{2}$HPO$_{4}$, 0.05% KH$_{2}$PO$_{4}$, 0.01% MgSO$_{4}$-7H$_{2}$O, 0.1% yeast extract (pH 6.5). Bacillus licheniformis KFB-C14 produced the thermostable chitinase of 3.89 units per ml culture fluid and 7.4 units per mg protein under rotary shaking at 150 rpm for 40 hr.
A bacterium K-4-3, producing $\beta$-glucan hydrolyzing enzyme, was isolated from soil and identified to be Bacillus subtilis by its morpholohical and physiological characteristics. $\beta$-glucan was coloured using cibacron blue 3G-A and cross linded by the addition of 1, 4-butanedioldiglycidyl ether. This substrate was used for the isolation of $\beta$-glucanase producing microorganism. The $\beta$-glucan hydrolyzing enzyme actibity from isolated K-4-3 strain was also measured using the modified substrate. Bacillus subtilis K-4-3 produced the highest extracellular $\beta$-glucan hydrolyzing activity in the basal medium containing $\beta$-glucan as a carbon source, peptone and tryptone as a nitrogen source, and magnesium sulfate as an inorganic salt. The optimum temperature and initial pH for $\beta$-glucanase production by Bacillus subtilis K-4-3 were $37^{\circ}C$ and pH6. The highest enzyme activity was obtained at the culture age of 54 hrs with rotary shaking at $37^{\circ}C$. The crude enzyme showed the highest activity at pH 7.5-8.0 and $65^{\circ}C$.
Culture conditions of yellow pigment in Monascus sp. were studied. According to the studies of culture conditions optimum condition was found to be pH 4.5, 3 days of incubation with 3% of sucrose as carbon source, 0.2 % of yeast extract as nitrogen source and 75m1 of medium in the 500m1 erlenmyer flask by rotary shaking (rpm 180) at 180 r.p.m. Effective levels of inorganic compounds were found to be 0.25 % of potassium phosphate monobasic and 0.1 % of Magnesium sulfate.
Ligninolytic enzymes were produced by Pleurotus ostreatus No.42, cultivated in a new kind of bioreactor that has a rotating draft tube with a helical ribbon. Maximum laccase (Lac) production (about 8,200 U/bioreactor) was reached after 3 days of incubation, then production decreased. Production of manganese peroxidase (MnP) in this fermenter reached a maximum level of about 8,400 U/bioreactor after 6 days of incubation. Lignin peroxidase (LiP) was not detected under these growth conditions. These results indicate that the rotary draft tube bioreactor (RTB) is compatible with large scale production of ligninolytic enzymes. MnP produced under these fermentation conditions was purified via a multistep process that included chromatography on Sepharose CL-6B, prep grade Superdex 75, and Mono-Q. This major isoenzyme was confirmed to have an apparent molecular weight of 36,400 by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and its isoelectric point (IEF) was determined to be 3.95. N-terminal sequencing of the major isoenzyme from this fermentation was identical to that reported for an MnP3 isoenzyme isolated under different cultivation conditions, including stationary and shaking culture.
A bacterium strain GS-2 isolated from the Korean traditional seasoning food, Chungkookjang and was determined to produce large amounts of ${\gamma}$-PGA with high productivity when provided with simple nutrients (L-glutamic acid 2.0%, glucose 1.0%, $NH_4Cl$ 0.5%, $KH_2PO_4$ 0.05%, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.01%, pH 7.0). In this study, the culture medium for this strain was optimized for the production of ${\gamma}$-PGA. The Bacillus subtilis GS-2 required supplementation with L-glutamic acid and other nutrients for maximal production of ${\gamma}$-PGA. The optimal culture conditions for ${\gamma}$-PGA production were a 48 hr culture time, a temperature of $33^{\circ}C$ and initial pH of 6.5 by rotary shaking (220 rpm). A maximum ${\gamma}$-PGA production of 31.0 $g/{\ell}$ was obtained with L-glutamic acid (30 $g/{\ell}$), sucrose (the main carbon source, 30 $g/{\ell}$), $NH_4Cl$ (the main nitrogen source, 2.5 $g/{\ell}$), $KH_2PO_4$ (1.5 $g/{\ell}$) and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ (0.15 $g/{\ell}$) in the culture medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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