This study describes culture conditions for a plant regeneration system via a combined pathway of somatic embryogenesis and organogenesis in root explant cultures of the commercial rose cultivar 'Charming'. Root explants formed white calluses at a frequency of 30% after 6 weeks of culture on Schenk and Hildebrandt (SH) medium supplemented with $11mg\;1^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. After 6 weeks of transfer to SH medium without growth regulators, initial white calluses gave rise to globular somatic embryos at a frequency of 2.8%, which were subsequently dedifferentiated to embryonic tissues. Somatic embryos or embryonic tissues initially derived from root explants did not undergo development beyond cotyledonary stage. To produce adventitious shoots, embryonic tissues were sliced and cultured on SH medium with $0.5mg\;1^{-1}$ 6-benzyladenine. After 4 weeks of culture, 28% of embryonic tissue explants formed adventitious shoots. Regenerated shoots were rooted on half strength SH medium with $0.1mg\;1^{-1}$${\alpha}-naphthalaneacetic$ acid and subsequently grown to maturity. Root-derived embryonic tissues were proliferated by subculture, while retaining the capacity for shoot production for a few years.
The goal of Periodontal treatment is predictable periodontal regeneration. But until now, many products including GTR materials and growth factors are beyond of complete regeneration. BMP can induce ectopic bone formation when implanted into sites such as rat muscle and can greatly enhance healing of bony defects when applied exogenously. BMP can promote periodontal regeneration by their ability to stimulate new bone and new cementum formation. But little is known about optimal conditions required for the application. Root conditioning is used for bioacive root change so altered root surface provides a substrate that promotes chemotaxis, migration and attachment of peridontal cells encouraging connective attachment to the denuded root surface. The aim of this study is to investigate whether the acid conditioning change effect of rhBMP-2 on human periodontal ligament cell and osteoblast cell line. 288 periodontally involved root dentin slices are divided into 6 groups, each 48, 1)control, 2)treated with BMP, 3)treated with citric acid 4)treated with citric acid+BMP 5)treated with tetracycline 6)treated with TC+BMP. Each group was devided half, so 12 root dentin slices were seeded with periodontal ligament cells and 12 were seeded with osteoblasts. At day 2 and 7, cell number, protein assay, ALP activitiy was measured. To investigate morphology of cultured cells, SEM was employed. Statistical analysis was performed with SPSS 8.0 either t-test or ANOVA test. The results are ; Protein assay and cell number was slightly decreased in CA+BMP group compared to Ca group but it was not statistically significant and ALP activity was much more increased in CA+BMP group compared to CA group so there was no statistically significance between BMP and CA+BMP group and statistically significant compared to control group. Cell number and protein assay was slightly increased in TC group and ALP activity was much less the BMP group and CA group. Cell number and protein and ALP activity was not much increased in TC+BMP group. TC group and TC+BMP group showed cell morphology change in SEM. This results suggested that application of root surface with citric acid before BMP treatment might give better result in periodontal regeneration.
Purpose: Furcation involvement in the molars is difficult to treat, and has been recognized as a risk factor for tooth loss. Although periodontal regenerative therapies, including guided tissue regeneration and various types of bone grafts, have been applied to furcation defects, the effects of these treatments are limited, especially in large class III furcation defects. The purpose of this pilot study was to investigate the effect of reciprocal autologous root transplantation on periodontal wound healing and regeneration in class III furcation defects in dogs. Methods: Furcation defects (7 mm wide and 6 mm high) were surgically created after root separation of the unilateral third and fourth premolars in 4 dogs. Eight furcation defects were randomized to receive either reciprocal autologous root transplantation (test) or no further treatment (control). In the test group, the mesial and distal roots were transplanted into the distal and mesial extraction sockets, respectively. The animals were sacrificed 10 weeks after surgery for histologic evaluation. Results: The healing pattern in the control group was characterized by extensive collapse of the flap and limited periodontal regeneration. New bone formation in the test group ($3.56{\pm}0.57mm$) was significantly greater than in the control group ($0.62{\pm}0.21mm$). Dense collagen fibers inserting into the residual cementum on the transplanted root surfaces were observed in the test group. Slight ankylosis was observed in 2 of the 4 specimens in the test group on the mesiodistal sides where the root-planed surfaces faced the existing bone. Root resorption (RR) was detected in both the control and test groups. Conclusions: Within the limits of this study, it can be concluded that reciprocal autologous root transplantation was effective for bone regeneration in class III furcation defects in dogs. However, further studies are required to standardize the approach in order to prevent unwanted RR prior to clinical application.
Jaskani Muhammad J.;Raza H.;Khan M. M.;Kwon Sung W.
Journal of Plant Biotechnology
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v.6
no.4
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pp.247-252
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2004
In vitro cultures of watermelon were treated with antimitotic agent colchicine to induce ploidy alterations, particularly the induction of tetraploids. Explants cotyledon, embryonic end of seed, transverse sections of epicotyl and hypocotyl were cultured on MS media supplemented with BA ($1{\mu}M$) and colchicine ($0.01\%,\;0.05\%\;and\;0.1\%$). Explants were subcultured on colchicine free media after 4 and 7 days. Colchicine had negative effect on in vitro regeneration but this exhibited explants related response. However, hypocotyl section of seedlings induced maximum callus on $0.01\%$ colchicine. Shoot proliferation was more in cotyledon explants cultured on colchicine ($0.01\%$) for four days. Maximum root induction and root number were recorded in embryonic end explants. Overall, cotyledon and embryonic end explants, and low colchicine concentration ($0.01\%$) was found optimal in watermelon regeneration.
Recently, the RNA/DNA-binding protein FUS, Fused in sarcoma, was shown to play a role in growth, differentiation, and morphogenesis in vertebrates. Because little is known about Fus, we investigated its expression pattern in murine tooth development. In situ hybridization of mouse mandibles at specific developmental stages was performed with a DIG-labeled RNA probe. During early tooth development, Fus was detected in the dental epithelium and dental mesenchyme at 11 days postcoitum (dpc) and 12 dpc. From 14 dpc, Fus was strongly expressed in the dental papilla and the cervical loop of the dental epithelium. At postnatal day 4 (PN4), Fus expression was observed in the odontoblasts, ameloblasts, the proliferation zone of the pulp, and the cervical loop. At PN14, the expression pattern of Fus was found to be maintained in the odontoblasts and the proliferation zone of the pulp. Furthermore, Fus expression was especially strong in the Hertwig's epithelial root sheath (HERS). Therefore, this study suggests that Fus may play a role in the HERS during root development.
Plant regeneration from the stem tissue of Orostachys japonicus A. Beiger was investigated. The calli derived from shoot apex when apex when cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 4mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D)and 2 mg/L benzyl aminopurine (BAP). The calli were developed into shoot to MS medium with 0.5mg/L NAA and 2mg/L and into root with 1mg/L kinetin. The reddish pigment which might be essential for the rootregeneration was observed in the tip of regenerated root.
Numerous cases about additional growth of roots or pulp tissue regeneration by using various intracanal medicaments in immature permanent teeth with periapical or pulpal disease have been reported. The underlying mechanism has not been clearly delineated, but it has been widely accepted that undifferentiated mesenchymal cells and stem cells are involved. Moreover, the growth and deposition of osteoid or cementoid tissues have been observed in regenerated pulp and roots. This new and non-invasive treatment has brightened the future of endodontics, and enlarged the vision of regenerative root canal treatment with multi-potent stem cells and various tissue engineering techniques.
Several methods have been used for regeneration of tissue lost by periodontal disease. Subepithelial connective tissue graft technique, one of the technniques of mucogingival surgery, is used for the regeneration in esthetic problems such as recession, and denuded root coverage. This study is performed to evaluate the healing process and the regeneration and reattachment of periodontal tissue, including the reconstruction of junctional epithelium, and connective tissue. Alveolar defects in five adult dogs were treated with periodontal surgery and were attained by removing the marginal alveolar bone by $4{\time}3mm$ from CEJ in the labial side of incisors, and root surfaces were planed. The experimental sites were divided into two groups as follows. 1. root planing alone(control group) 2. with connective tissue graft (Experimental Group) In the two groups flaps were positioned and sutured tightly, the healing processes were observed and were histologically compared with each other after 2days, 4days, 1week, 2weeks, 4weeks. The results were obtained as follows : 1. In the two groups blood clots were observed as early as 2 and 4 days, and were resorbed at 1 week. 2. In the two groups moderate inflammation was observed as early as 2 and 4 days, decreased at 1 and 2 weeks, and disappeared at 4 weeks. 3. Junctional Epithelium migration was more significant in the control group, and was restrained by graft materials in the experimental group. 4. Features of connective tissue fiber attachment partially showed the parallel pattern in the two groups from 2 weeks, and entirely from 4weeks. 5. Anastomosis, between graft and connective tissue, appeared from 4 days in the experimental group and the border between them was not discriminated at 4weeks.
Kim, Chong-Kwan;Chai, Jung-Kiu;Cho, Kyoo-Sung;Kim, Jin;Han, Soo-Boo;Choi, Sang-Mook
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.24
no.1
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pp.64-86
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1994
The authors have transplanted periodontally involved roots which had been root planed into healthy and periodontally involved extraction sockets, and studied the root resorption patterns as well as its effect on new bone formation and wound healing. Alveolar bone around mandibular premolars of 6 adult dogs has been surgically removed, followed by ligation of orthodontic elastic wires for 8 weeks inducing chronic periodontal disease. After removing the crown portions, roots were extracted, and notches were made on the root surfaces discriminating healthy and periodontally involved areas using burs. Controls and experimental groups were divided as follows. Control I : Transplantation of periodontally involved root into healthy extraction sockets. Control II : Transplantation of periodontally involved root into diseased extraction sockets. Experimental group I : Transplantation of root planed roots into healthy extraction sockets. Experimental group II : Transplantation of root planed roots into diseased extraction sockets. Extraction sockets were sutured after transplantations, completely submerging the roots. Healing progress was histologically observed at 2nd, 8th, 12th, and 20th weeks, and the results were as follows ; 1. No inflammation or infection within the extraction sockets had been observed in all groups throughout the experimental period. 2. Reversal lines were observed at week 2 in all groups, clearly discriminating socket walls and new bone, and numerous blood vessels were observed in the new bone trabeculae. 3. Experimental groups showed markedly less root resorption compared to the controls at week 2, but as time progressed, severe resorptions were present in all groups. 4. Localized areas of new bone ankylosis were observed, and the rest of the areas showed collagen fiber insertion with new bone formation at its periphery. 5. No clear differences were found in healing and alveolar bone regeneration between healthy and diseased extraction sockets. 6. The amount of root resorption and ankylosis had increased up to week 8 and 12, showing ankylosis of new bone and the roots. However, no further increase in ankylosis was observed at week 20. 7. Most of the cementum on healthy roots was directly ankylosed to new bone at week, 2, and were gradually resorbed and replaced by new bone thereafter. These results appear to indicate that root planing may inhibit early root resorption of transplanted roots, but gradual replacement by alveolar bone and collagen fibers eventually occur. Condition of the roots or presence of disease in extraction sockets do not appear to make marked differences in alveolar bone regeneration process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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