Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1995.10a
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pp.107-113
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1995
Basement membrane laminin is a multidomain glycoprotein that interacts with itself, heparin and cells. The distal long arm plays major cell and heparin interactive roles. The long arm consists of three subunits (A, B1, B2) joined in a coiled-coil rod attached to a terminal A chain globule (G). The globule is in turn subdivided into five subdomains (Gl-5). In order to analyze the functions of this region, recombinant G domains (rG, rAiG, rG5, rGΔ2980-3028) were expressed in Sf9 insect cells using a baculovirus expression vector. A hybrid molecule (B-rAiG), consisting of recombinant A chain(rAiG) and the authentic B chains (E8-B)was assembled in vitro. The intercalation of rAiG into E8-B chains suppressed a heparin binding activity identified in subdomain Gl-2. By the peptide napping and ligand blotting, the relative affinity of each subeomain to heparin was assigned as Gl> G2= G4> G5> G3, such that G1 bound strongly and G3 not at all. The active heparin binding site of G domain in intact laminin appears to be located in G4 and proximal G5. Cell binding was examined using fibrosarcoma Cells. Cells adhered to E8, B-rAiG, rAiG and rG, did not bind on denatured substrates, poorly bound to the mixture of E8-B and rG. Anti-${\alpha}$6 and anti-${\beta}$1 integrin subunit separately blocked cell adhesion on E8 and B-rAiG, but not on rAiG. Heparin inhibited cell adhesion on rAiG, partially on B-rAiG, and not on E8. In conclusion, 1) There are active and cryptic cell and heparin binding activities in G domain. 2) Triple-helix assembly inactivates cell and heparin binding activities and restores u6131 dependent cell binding activities.
Campylobacter jejuni was studied for its disinfection by heat-and cold-treatment and UV-irradiation. When C. jejuni was treated by heat, no viable cell was found after 10 min treatment at $55^{\circ}C$, whereas small fraction of cell population was survived after 60 min treatment at $45^{\circ}C$ and $50^{\circ}C$. When they were treated by cold temperature for 30 days, no cell was survived at -$23^{\circ}C$ but about 4 log of the cells were survived at both temperature of $4^{\circ}C$ and -$40^{\circ}C$. When the organisms were UV-irradiated, thier survival rates were proportionally varied to the distance of irradiation. The scanning electron microscopic studies of C. jejuni cells treated by the disinfecting agents revealed that shapes of thecells were deformed from spiral rod into spherical form. The heat-treated cells showed rough and damaged surface on the scanning electron micrographs. In the heat-treated cells, some proteins of high molecular weight appeared to become accumulated in the electrophoretic analysis. The DNAs extracted from the cells treated with the physical agents showed some differences in agarose gel electrophoresis, comparing those of normal cells.
As a component for a recirculating aquaculture system, a new strain of denitrifying bacterium was isolated from municipal sewage. The isolate was motile by means of one polar flagellum, catalase-positive, and a Gram-negative rod-shaped cell measuring $0.5-0.6{\mu}m$ in width and $1.3-1.9{\mu}m$ in length. The isolate was identified as Pseudomonas fluorescens and produced dinitrogen gas via the reduction of nitrate. The optimal growth conditions (pH, temperature, carbon source, and C/N ratio) of the isolate were found to be 6.8, $30^{\circ}C$, malate, and 3, respectively. Under optimal growth conditions of P. fluorescens, dinitrogen gas was first detected in the exponential growth phase, then a small amount of nitrite was developed and converted to dinitrogen gas in the stationary phase. Pseudomonas fluorescens cells were immobilized in modified polyvinyl alcohol (PVA) gel beads, and the maximum denitrification rate was measured as $36.6 {\mu}lN_2h^-1$ per bead with an optimum cell loading of $20mg {\mu}l^-1$ and $2\%$ sodium alginate added to the PVA gel. The operating stability of the modified PVA gel beads remained unchanged for up to 43 repeated batches.
An obligate methanol-oxidizing bacterium, Methylobacillus sp. strain SK1, which grows only on methanol was isolated from soil. The isolate was nonmotile Gram-negtive rod. It does not have internal membrane system. The colonies were small, whitish-yellow, and smooth. The guanine plus cytosine content of the DNA was 48 mol%. Cellular fatty acids consisted predominantly of large amounts of straight-chain saturated $C_{16:0}$ acid and unsaturated $C_{16:1}$ acid. The major ubiquinone was Q-8, and Q-10 was present as minor component. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Poly-.betha.-hydroxybutyrate, endospores, or cysts were not observed. the isolate could grow only on methanol in mineral medium. Growth factors were not required. The isolate was unable to use methane, formaldehyde, formate, methylamine, and several other organic compounds tested as a sole source of carbon and energy. Growth was optimal at 35.deg.C and pH 7.5. It could not grow at 42.deg.C. The doubling time was 1.2h at 30.deg.C when grown with 1.0%(v/v) methanol. The growth was not affected by antibiotics inhibiting cell wall synthesis and carbon monoxide but was completely suppressed by those inhibiting protein synthesis. Methanol was found to be assimilated through the ribulose monophosphate pathway. Cytochromes of b-, c-, and o- types were found. Cell-free extracts contained a phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity, which required ammonium ions as an activator. Cells harvested after the late exponential phase seemed to contain blue protein.ein.
Kwon, Dae Ryul;Jo, Bok Yeon;Jang, Seok Won;Lee, Chang Soo;Nam, Seung Won
Korean Journal of Environmental Biology
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v.39
no.1
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pp.32-38
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2021
Cyanobium is a genus of picoprokaryotic cyanophytes, which includes species worldwide. The present study investigated the morphology, ultrastructure, and molecular phylogeny of the unrecorded genus Cyanobium Rippka & Cohen-Bazire 1983 and species Cyanobium gracile Rippka & Cohen-Bazire 1983. A C. gracile culture from a freshwater sample collected from the Adongji pond was established by single-cell isolation. Morphological data were analyzed using light and transmission electron microscopy. C. gracile lives as solitary cells without gelatinous envelopes and is ovate, oval, or shortly rod-shaped. Thylakoids are laid along the cell walls, with three thylakoid membranes parallel to each other. Nucleoplasm was observed in the center of the cell. Molecular phylogeny performed with data from 16S small subunit ribosomal DNA gene (SSU rDNA) sequences showed that the three strains of C. gracile, including the type strain (PCC6307) and a newly recorded strain (Adong101619), formed a distinct clade with a high supporting value (maximum-likelihood=100, pp=1.00). Based on morphology and molecular data, we report the newly recorded C. gracile in Korea.
A restricted facultatively methanol-oxidizing bacterium, Methylovorus sp. strain SS1, was isolate dfrom soil samples from Kuala Lumpur, Malaysia, through methanol-enrichment culture technique. The isolate was nonmotile Gram-negative rod and did not have complex internal membrane system. The colonies were small, pale-yellow, and raised convex with entire margin. The cell did not produce any spores and capsular materials. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Plasmid, carotenoid pigment, and poly-.betha.-hydroxybutyric acid were not found. The guanine plus cytosine content of the DNA was 55%. The isolate was found to grow only on methanol methylamine, or glucose. Growth factors were not required. Cells growing on methanol was found to produce extracellular polysaccharides containing glucose, lactose, and fructose. Growth was optimal (t$_{d}$= 1.7) with 0.5%(v/v) methanol at 40.deg.C and pH 6.5. No Growth was observed at over 60.deg.C. Cell-free extracts of the methanol grown cells exhibited the phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity Methanol was found to be assimilate dthrough the ribulose monophosphate pathway.y.
An alkalophilic mi.croorganism (strain YB380), which produces yeast cell wall hydrolase extracellulary, was isolated from Korean soil. The rod-shaped cells were 0.3~0.4 by 2~4${\mu}{\textrm}{m}$ long, motile, aerobic, gram-positive, and spore-forming. The color of the colony was light yellow. The temperature range for growth at pH 9.0 was 25 to $45{\circ}C, with optimum growth at $35{\circ}C. The pH range for growth at $35{\circ}C was 8 to 11 with an optimum pH of 9.0. Therefore, the strain YB380 is an obligate alkalophile. The 16S rRNA of strain YB380 has a 99% sequence similarity with that of Bacillus alcalophilus. On the basis of physiological properties, cell wall fatty acid composition, and phylogenetic analysis, we propose that the isolated strain is Bacillus alcalophilus. The yeast cell wall hydrolase from Bacillus alcalophilus subsp. YB380 has been purified and partially characterized. The molecular weight was estimated to be 27,000 daltons with an optimum temperature and pH of $60{\circ}C and 9.0, respectively. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was analyzed as Gln- Thr- Val- Pro- Trp- Gly- Ile- Asn- Arg- Val.
Le, Ve Van;Ko, So-Ra;Lee, Sang-Ah;Kang, Mingyeong;Oh, Hee-Mock;Ahn, Chi-Yong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.5
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pp.575-581
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2022
A Gram-stain-negative, white-coloured, and rod-shaped bacterium, strain DR4-4T, was isolated from Daechung Reservoir, Republic of Korea, during Microcystis bloom. Strain DR4-4T was most closely related to Caenimonas terrae SGM1-15T and Caenimonas koreensis EMB320T with 98.1% 16S rRNA gene sequence similarities. The average nucleotide identity (ANI) and digital DNA-DNA hybridization (dDDH) values between strain DR4-4T and closely related type strains were below 79.46% and 22.30%, respectively. The genomic DNA G+C content was 67.5%. The major cellular fatty acids (≥10% of the total) were identified as C16:0, cyclo C17:0, summed feature 3 (C16:1ω7c and/or C16:1ω6c), and summed feature 8 (C18:1ω7c and/or C18:1ω6c). Strain DR4-4T possessed phosphatidylethanolamine, diphosphatidylglycerol, and phosphatidylglycerol as the main polar lipids and Q-8 as the respiratory quinone. The polyamine profile was composed of putrescine, cadaverine, and spermidine. The results of polyphasic characterization indicated that the isolated strain DR4-4T represents a novel species within the genus Caenimonas, for which the name Caenimonas aquaedulcis sp. nov. is proposed. The type strain is DR4-4T (=KCTC 82470T =JCM 34453T).
Ve Van Le;So-Ra Ko;Mingyeong Kang;Hee-Mock Oh;Chi-Yong Ahn
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.12
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pp.1553-1560
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2022
A Gram-stain-negative, rod-shaped bacterial strain, JC4T, was isolated from a freshwater sample and determined the taxonomic position. Initial identification based on 16S rRNA gene sequences revealed that strain JC4T is affiliated to the genus Mucilaginibacter with a sequence similarity of 97.97% to Mucilaginibacter rigui WPCB133T. The average nucleotide identity and digital DNA-DNA hybridization values between strain JC4T and Mucilaginibacter species were estimated below 80.92% and 23.9%, respectively. Strain JC4T contained summed feature 3 (C16:1 ω7c and/or C16:1 ω6c) and iso-C15:0 as predominant cellular fatty acids. The dominant polar lipids were identified as phosphatidylethanolamine, one unidentified aminophospholipid, one unidentified phospholipid, and two unidentified lipids. The respiratory quinone was MK-7. The genomic DNA G+C content of strain JC4T was determined to be 42.44%. The above polyphasic evidences support that strain JC4T represents a novel species of the genus Mucilaginibacter, for which the name Mucilaginibacter aquariorum sp. nov. is proposed. The type strain is JC4T (= KCTC 92230T = LMG 32715T).
Using both light and scanning electron microscopies, it was investigated on the visual cells as well as the eyes of Macropodus ocellatus (Pisces, Osphronemidae). This species had a circular lens and yellowish cornea. The eyes had $3.5{\pm}0.2mm$ which is $31.1{\pm}3.0%$ in a percentage of eye diameter relative to head length. The retina ($158.2{\pm}10.6{\mu}m$) was built of several layers, including the visual cell layer which consists of three types of cells: single cons ($27.8{\pm}1.6{\mu}m$) and equal double cone ($33.9{\pm}3.7{\mu}m$), and large rods ($57.3{\pm}1.3{\mu}m$). The visual cell layer then was classified into the correct pattern. All visual cells were clearly distinguished from two parts (inner and outer segments). The elongated rod cells were extend to the bottom of the retinal pigment epithelium. In scanning electron microscopy, the outer segment links to inner segment by so-called calyceal piles. The M. ocellatus single and double cones appearance form a flower-petal arrangement, which is a regular mosaic pattern that contains quadrilateral units by four double cones surrounding a single cone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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