Taxonomic position of 46 Korean isolates of Rhizoctonia solani which were classified into nine intraspecific groups by anastomosis and cultural characteristics was analyzed by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and sequence analyses of the internal transcribed spacer (ITS) regions of ribosomal DNA. All the isolates within each group showed highly similar band patterns in RAPD. The ITS regions of the isolates within the same groups showed a high level of sequence similarity above 96.0% whereas similarities among different groups were below 94.4%. When compared with several reference strains of R. solani from foreign countries, all the Korean isolates were clustered with the foreign isolates belonging to the same groups in the phylogenetic tree. All six Korean strains of AG-4 were identified as HG-1 out of 3 subgroup of AG-4. We discussed taxonomic position of Korean isolates of R. solani and showed that sequence analysis with ITS regions could be a rapid and useful method for identification of intraspecific group of R. solani.
A pathogenic fungus causing balloon flower root rot (Platycodon grandiflorum) was isolated from naturally infected roots. The microbial characteristics of the isolated microorganism were similar to those of Rhizoctonia solani. About 500 bacterial species from field soils were screened for a biological agent against the above-mentioned putative pathogen, and several bacteria with the antifungal activity were isolated. Among them, the isolated JS2 was identified as Pseudomonas aeruginosa. This strain showed a broad spectrum of antifungal activity potentially. When the antifungal substance was purified from a broth culture of JS2, it was identified as 2,4-diacetylphloroglucinol (Phl).
Incidence of damping-off callsed by Rhizoctonia solani was 0.6-10.9% at "Yangjik" seedbed in Pocheon, Korea. The seedbeds where the lengths of etiolated stems (underground portion) of ginseng seedlings were 0.78-1.25 cm showed 0.8-3.2% of the disease, while 6.9-10.9% disease incidence was observed at the seedbeds with the longer etiolated stem (1.89-2.26 cm). The pathogen produced a typical girdle symptom on the etiolated portion of ginseng stems close to the soil surface. The deeper the seeds were sown, the more the disease occurred in pot soil inoculated with the pathogen, AG 2-1, showing 18.4, 27.4 and 32.9% of damping-off at the seeding depth of 1, 2 and 4 cm, respectively. Cuticle layers of colored stems (over ground portion) were well - developed to be 42.8, 58.0, and 55.0 um in thickness compared to the etiolated stems with 8.5, 15.0 and 8.0um for seedling, 2 year-old, and 3 year-old ginsengs, respectively, when the disease occurred. In the seedling and 2 year-old ginseng, the colored stems were more rigid than the etiolated. There was however, no difference in rigidness of the stem of the 3 year-old ginseng where the disease is not severe as in seedlings and 2 year-old ginseng plants.ng plants.
Two types of Rhizoctonia solani esterases induced by cutin hydrolysate were partially purified by ammonium sulfate precipitation and gel filtration. The esterase I with hydrolyzing activity toward both ${\rho}-ni-trophenyl$ butyrate and ${\rho}-nitrophenyl$ palmitate and the esterase II with hydrolyzing activity toward only ${\rho}-ni-trophenyl$ butyrate were inhibited by ebelactone B, an esterase inhibitor produced by actinomycetes with $IC_{50}$ values of 0.01 and $0.09{\;}\mu\textrm{g}/l$, respectively. Spraying on rice seedling with ebelactone B at a concentration of $30{\;}\mu\textrm{g}/ml$ completely suppressed infection by R. solani. Ebelactone B could not protect the wounded rice seedling and did not show any inhibitory effect on the mycelial growth at a concentration of 1 mg/ml. These results indicate that ebelactone B, an esterase inhibitor protects rice plants from infection with R. solani by inhibition of penetration, not through fungitoxic or fungicidal effect.
Rhizoctonia solani 균주들의 각 균사융합군 및 배형별 72종의 기주작물에 대한 병원성을 접종실험에 의해 조사하였다. 33종의 작물에서 단독으로 분리된 균사융합군 및 배양형은 그 기주작물에 병원성이 강하였으며, 8종의 작물에서 단독으로 분리된 것들은 병원성이 약하거나 강하였고, 6조의 작물에서 단독으로 분리도니 것들은 병원성이 약하거나 없었다. 26종의 작물에서 같이 분리된 균사융합군 및 배양형은 그 기주작물에 대한 병원성이 대부분 다르거나 간혹 비슷했다. AG-1(IA)는 1종을 제외한 기주작물에 잎마름병 혹은 잎썩음병과 잎집무늬마름병을 일으켰다. AG-1(IB)는 19종의 기주작물에 잘록병과 잎마름병 혹은 잎썩음병을 일으켰으나, 9종의 기주작물에는 병징을 약하게 유발시키거나 혹은 유발시키지 못했다. AG-1(IC)는 2종의 유채속작물에 잘록병과 밑둥썩음병 혹은 잎썩음병을 일으켰다. AG-2-1은 1종을 제외한 기주작물에 잘록병, 밑둥썩음병, 관부썩음병, 눈마름벼, 뿌리썩음병, 잎마름병을 일으켰다. AG-202(IIIB)는 기주작물에 뿌리 및 줄기썩음병, 잎마름병, 잘록병, 잎자루썩음병을 일으켰다. AG-2-2(IV)는 기주작물에 잘록병, 관부썩음병, 줄기썩음병, 라이족토니아마름병을 일으켰다. AG-3은 감자에 검은무늬썩음병을 일으켰다. AG-4는 42종의 기주작물에 여러 가지 병을 일으켰으나, 3종의 기주작물에는 잘록병, 눈마름병, 잎집무늬마름병을 일으켰으나, 9종의 기주작물에는 병징을 약하게 유발시키거나 혹은 유발시키지 못했다.
Ten isolates of the orchid mycorrhizal fungi were isolated from the roots of Korean native orchid plants (Cymbidium goeringii) which inhabitate mainly in southern and western areas of Korea. The growth rates and color of the isolates in potato dextrose agar (PDA) were various. Microscopic observations of the hyphae isolated were identified as Rhizoctonia repens and R. endophytica var endophytica or their related species. R. repens was isolated from the roots of the Korean native orchids, but R. endophytica var endophyica was only isolated from the roots of the commercial orchids introduced from foreign countries. Also, the polymorephic patterns of genomic DNA extracted from selected isolates were compared with those of DNA extracted from the orchid mycorrhizal fungi isolated previously and similar band patterns were observed among those isolates. Five isolates of R. repens were selected and cultured at the oatmeal agar for investigating their symbiosis with orchid plants. The symbiotic specificity between orchid plants and isolated orchid mycorrhizal fungi was observe by growing orchids about six months in the greenhouse. The symbiotic responses of the commercial orchid plants with selected isolates were quite different form different isolates due to the genetic variations.
Streptomyces albidoflavus C247 was isolated from the soil of the Gyeongsan golf course in Korea. Physiological, biochemical and 16S rDNA gene sequence analysis strongly suggested that the isolate belonged to Streptomyces albidoflavus. Preliminary screening revealed that the isolate was active against fungi and bacteria. Self-directing optimization was employed to determine the best combination of parameters such as carbon and nitrogen source, pH and temperature. Nutritional and culture conditions for the production of antibiotics by this organism under shake-flask conditions were also optimized. Maltose (5%) and soytone (5%) were found to be the best carbon and nitrogen sources for the production of antibiotics by S. albidoflavus C247. Additionally, 62.89% mycelial growth inhibition was achieved when the organism was cultured at $30^{\circ}C$ and pH 6.5. Ethyl acetate (EtOAc) was the best extraction solvent for the isolation of the antibiotics, and 100 ${mu}$/ml of EtOAc extract was found to inhibit 60.27% of the mycelial growth of Rhizoctonia solani AG2-2(IV) when the poison plate diffusion method was conducted.
Pseudomonas fluorescens Biovar III strains S-2 antagonistic to Rhizoctonia solani was subjected to Tn5 mutagenesis by the transposon vector pGS9. Ampicillin and kanamycin resistant (Ampr, Kmr) transconjugants were recovered at a frequency of 1.3$\times$10-7 per initial recipient cell, when recipient cells were washed twice in TE buffer before conjugation. Of the ca. 3000 transconjugants, a frequency of noninhibitory (Inh-), nonfluorescent (Flu-) and auxotorphic (Pro-) mutants were 0.27%, 0.47% and 0.40%, respectively. In these mutants, all Inh- mutants showed the same colony morphology as wild type, whereas all Flu- and Pro- mutants inhibited the growth of R. solani. These mutants were also susceptible to chloramphenicol, indicating only the Tn5 element, except for parts of pGS9, was integrated into the recipient genome. In a Southern blot analysis, the Tn5 element inserted into one site on the chromosome for each of the chosen mutants. However, Tn5 insertion sites of Inh-, and Pro- mutants were differed in each other. These indicate that the genes essential for R. solani inhibition, fluorescent production and auxotrophic are chromosomally located, but not linked to each other.
Rhizoctonia solani is one of the major pathogens that cause sheath blight disease in rice. Sheath blight is one of the most difficult diseases to control. Biological control (with the use of rhizobacteria) is one of the ways to control this disease. Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) is a rhizosphere bacterium that can be used to enhance plant growth. The composition of the rhizobacteria in organic and nonorganic soil is affected by the chemical characteristics of the soil - which influences plant physiology and root exudation patterns. This study aimed to obtain a species of rhizobacteria which shows PGPR activity, from organic and nonorganic rice fields and test their capability to suppress R. solani growth. Out of 23 isolates screened for PGPR activity, the following isolates showed high PGPR activity and were selected for in vitro antagonistic activity testing against R. solani: ISO6, ISO11, ISO15, ISN2, ISN3, and ISN7, The six isolates produced 43,42-75,23 ppm of IAA, possessed phosphorus solubilization capability, and chitinase-producing activity. ISO6 (54.88%) and ISN7 (83.33%) displayed high inhibition capacities against R. solani, in vitro. ISO6 and ISN7 inhibited the growth of R. solani lesions on rice leaves by 89% and 100% (without lesion), respectively, after 7 days of incubation. Analysis of their 16S rRNA sequences revealed that the ISO6 isolate was Citrobacter freundii and ISN7 isolate was Pseudomonas aeruginosa.
기질(S) 화합물로 30종의 5,6-dihydro-2-trifluoromethyl-1,4-oxathiin carboxanilide 유도체들을 합성하고 벼 잎집무늬 마름병균(Rhizoctonia solani)과 밀 붉은 녹병균(Puccinia recondita)에 대한 항균활성(in vivo) 값($pI_{50}$)을 측정하였다. (S)는 잘록병균보다 밀 붉은녹병균에 대하여 보다 큰 항균활성을 나타내었으며 두 종의 균에 대하여 3-methoxy, 11, 3-iso-propyloxy, 13 및 3-iso-propyl 치환체, 25가 제일 큰 활성을 보였다. 그리고 치환(X)-phenylcarbamoyl group의 변화에 따른 물리-화학 파라미터와 항균활성($pI_{50}$)으로부터 구조-활성관계(SAR)를 검토 한 결과, 벼 잎집무늬 마름병균에 대하여는 공명효과에 따른 전자밀게(R<0)의 소수성이 큰(${\pi}>0$) m-alkyl 치환기(X)가, 그리고 밀 붉은녹병균에 대하여는 분자 분극율(Sp.Pol.)과 분자의 음하전(ABSQ<0)을 위시하여 HOMO에너지(e.v.)가 클수록(HOMO<0) 높은 항균활성을 나타내었다. 또한, 전하-조절 반응에 의한 수용체-(S)간의 상호작용과 높은 활성발현 조건들이 검토되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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