Garlic occupies a special position among the many foods of vegetable origin because it is the sole food for Koreans during the their lives. And vitamin A has been ingested by forms of food or additives. Cadmium has been described as one of the most dangerous trace elements in the food and environment of man and livestocks. Since the de novo synthesis of stress proteins can be detected early after exposure to some agents, analysis of cadmium-induced changes in gene expression , ie. alterations in patterns of protein synthesis, may be useful to develop as biomarkers of exposure and damage for food hygiene. He acute and chronic combine effects of cadmium (Cd, CdCl2 20mg/kg), garlic oil(Dds: diallyl disulfide 50mg/kg, 3 times a week) and vitamin A(Ra: retinol acetate 50,000 IU/kg, 3 times a week) on Wistar male rats were evaluated concerning cadmium contents, tissues enzyme activity, HSP expression histopathological and electron microscopical examinations. The results of the study are as follows ; 1. Less cadmium was absorbed through the digestive tracts, but the ratio of contents in tissue were not changed by the simultaneous adminstration of diallyl disufide or retinol acetate. 2. ALT(alanine aminotransferase) , AST(aspartate aminotransferase), glucose, BUN (blood urea nitrogen), creatinine, the key indices of the clinical changes in hepatic and renal function were significantly hanged by the cadmium treatment after 1 week in liver, after 4 weeks in kidney. 3. Histopathological changes in cadmium treated rats were appeared at 8 weeks age treatment in kidneys. Homogenous eosinophilic material was accumulated in cortical and collecting tubular lumens at 16 weeks. Degenerated or necrotized tubular cells were observed in cortex and medulla. Degenerated seminiferous tubules and homogeneous eosinophilic material was seen in interstitial tissue of rat treated with cadmium for 16 weeks. Calcium deposits were seen in degenerated seminiferous tubules and the tubules showed severe calcification of rat treated with cadmium for 16 weeks. Electron microscope changes in kidney were observed in rats treated with CdCl2 20 mg/kg. Proximal convoluted tubule cells showed selling of cytoplasm and narrow lumen. Capillary endothelial cells showed cytoplasmic vacuoles and swelling. Degenerated epithelial cells were accumulated in tubular lumen of kidney. 4. Enhanced synthesis of 70 KDa relateve molecular mass proteins were detected in 2 hours after cadmium, exposure, with maximum activity occurring at 8~48 hours. Induction of HSP 70 was evident at proximal tubules and glomeruli in kidney. Testicular cells produced enough HSP to be detected normally. From the above results, it could be concluded that HSP70 induction by the cadmium treatment was a rapid reaction to indicated the exposure of xenobiotics, and retinol acetate reduced the cadmium induced nephrotoxicity.
에탄올 투여에 의한 산화적 손상에 대하여 비타민 A의 보충급여 영향을 조사하고자 흰쥐에게 AIN-76 요구량에 2배 수준으로 retinyl acetate와 $\beta$-carotene을 보충한 식이를 5주간 급여한 후 20% 에탄올 용액(3g/kg B.W)을 급성으로 복강내에 투여하였다. 그런 다음 간조직에서 생성되는 지질과산 화물 함량, 간조직에서의 관련 효소활성도와 항산화비타민의 함량을 분석한 결과는 다음과 같다. 간조직에서의 지질과 산화물 함량은 대조군에 비하여 $\beta$-carotene 공급군에서 유의적인 감소를 나타내었다. 그러나 retinyl acetate 공급군과 $\beta$-carotene 공급군 사이에서의 유의적인 차이를 나타내지 않았다. SOD 활성은 대조군에 비해 retinyl acetate 공급군이 높았고, catalase 활성과 GSH-Px 활성은 실험군 간에 유의적인 차이가 없었다. GST 활성은 에탄올만을 투영한 대조군에 비해 retinyl acetate와 $\beta$-carotene을 공급한 군에서 유의적으로 감소되었다. 간조직 내 retinol 함량은 대조군에 비해 retinyl acetate 공급군에서 유의적으로 높게 나타났으며, 이는 에탄올 급여로 인한 간조직 비타민 A의 소모를 retinyl acetate의 급여로 인해 완화시킨 것으로 여겨진다. 그러나 혈청에서는 실험군 간에 유의적인 차이가 없었다. 간조직내 $\alpha$-tocopherol의 함량은 retinyl acetate와 $\beta$-carotene 공급군에서 증가하는 경향을 나타내었다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 금성적인 에탄올의 투여에 대해 retinyl acetate나 $\beta$-carotene을 보충 급여한 경우 항산화효소계 중 superoxide dismutase의 활성이 유도되는 경향을 보였으며, 대표적인 항산화비타민으로 알려진 $\alpha$-tocopherol의 간조직 내 수준이 증가하는 것으로 나타났다.
5품종의 유색미(DZ 78, Elwee, LK1A-2-12-1-1, LK1-3-6-12-1-1, 길림흑미) 겨 70% 에탄올 추출물 및 염화메틸렌 및 에틸아세트로 추출한 지용성 분획들의 DPPH radical 소거활성을 측정하고 페놀성화합물 및 피틴산, 그리고 불검화물로서 retinol, tocopherol과 stigmasterol의 함량을 정량하였다. 또한 GC-MS를 사용하여 염화메틸렌 및 에틸아세트 분획이 함유한 구성분을 동정하고 상대적 함량을 측정함으로써 항산화 활성의 발현에 필요할 것으로 보이는 성분들을 조사하고자 하였다. 그 결과, 유색미의 항산화성은 일반미보다 약 30%정도 더 높았고, 페놀성화합물의 함량은 일반미보다 26배까지 더 많았다. 특히 길림흑미는 retinol이나 tocopherol, stigmasterol 같은 불검화물의 함량이 일반미보다 2.3배 이상 더 많았다. 그러나 항산화성과 색도 및 불검화물의 함량과는 전반적인 상관성은 없었다. 항산화성이 강한 길림흑미 및 LK1A-2-12-1-1의 염화메틸렌 분획은 각각 (Z)-9-Hexadecenyl ester-9-octadecanoic acid 및 2-Hydroxyl-1-1(hydroxymethyl)ethyl-9-octadecanoic acid의 상대적 함량이 높았다. 반면, 에틸아세트 분획에서는 1H Indene과 Methyl ester-tetradecanoic acid 및 Methyl ester-hexadecanoic acid가 5품종 유색미에서 공통적으로 검출되어, 이들 화합물이 항산화성에 관여할 가능성을 시사하였다.
본 연구는 에탄올을 급여하는 동안 일어나는 지질과산화에 의한 간 손상과 이에 대하여 $\beta$-carotene, retinyl acetate, 13-cis-retinoic acid의 효과를 비교ㆍ검토하고자 실시되었다. 혈 장내 MDA 함량은 에탄올 급여군 중 비타민 A를 결핍시킨 FE군과 $\beta$-carotene을 공급한 DE군에서는 감소되지 않았으나, retinyl acetate와 13-cis-retinoic acid 공급시킨 RE군과 RAE군에서 감소되었다. 간 미토콘드리아내 MDA함량은 에탄을 급여군 중 FE군과 $\beta$E군에서 높은 함량을 보인데 반해 RE군과 RAE군에서는 낮은 수준을 보였다. 에탄올 비급여군인 pair-fed군중에서는 비타민 A를 결핍시킨 FP 군에 비해 $\beta$-carotene과 retinyl acetate를 각각 공급한 5P와 RP군의 MDA 함량은 감소하였는데 반해 retinoic acid를 공급한 RAP군의 MPA 수준은 차이를 보이지 않았다. 혈장내 AP 활성도는 에탄올과 함께 $\beta$-carotene과 retinoic acid를 공급시킨 군에서 각각의 pair-fed군에 비하여 높은 활성도를 보였으며 간 마이크로솜내 G6P 활성도는 에탄올 급여군 중 비타민 A 결핍군만 pair-fed군에 비해 유의적으로 감소되었으며 비타민 A를 보충시켰을 때에는 활성도가 증가되었다. 간 사이토졸내 SOD 활성도는 에탄을 급여와 함께 비타민 A를 결핍시킨 군에 비해 13-ciz-retinoic acid을 공급시킨 군이 가장 높았으며 Pair-fed 군 중에서는 retiny acetate 공급군에서 가장 낮은 높은 활성도를 보였다. 간 사이토졸내 GSH-Px 활성도는 에탄올 급여군과 pair-fed 군 사이에 일정한 경향은 없었으며 간 사이토졸네 GST 활성도는 에탄올 급여군 중 $\beta$-carotene과 retinyl acetate 공급군이 각각의 pair-fed군에 비해 증가되었다. 간조직내 $\beta$-carotene함량은 $\beta$-carotene, 공급군에서만 검출되었고 에탄을 급여군이 pair-fed군에 비해 6배정도 높은 함량을 보였으며 혈장과 간조직 내 retinol 함량은 에탄올 급여로 낮은 함량을 보였으나 비타민 A형태 중 retinyl acetate 공급군이 가장 높았다. 간조직 내 retinoic acid 함량은 에탄을 급여군 중 $\beta$-carotene과 retinyl acetate 공급군이 각각의 Pair-fed 군에 비해 유의적인 감소를 보였다. 상기 연구 결과를 보면 에탄올 급여로 지질과 산화물 함량이 증가되고 관련 항산화 효소계의 활성도 변화로 보아 간 손상에 지질과산화 반응이 관여된 것으로 보여 지며 에탄올의 영향에 대한 비타민 A의 효과에는 retiny1 acetate가 항산화제로 작용하여 간조직의 급격한 손상을 효율적으로 경감시킬 수 있는 것으로 나타났다.
Retinlyl Palmitate, the skin normalizerm is useful to promote greater skin elasticity, to diminish lipid peroxidation and skin roughness following UV exposure, and promote a youthfulgeneral skin appearance. In manufacturing creams, Retinyl Palmitate, which is a derivative of retinol, is used since reionol is easily oxidized by heat and light. However, only a small mount of retinol, is used since using a large amount of it may be harmful to its stability. In this study, thermal stability and UV stability of W/O-, W/S-, O/W-, and MLV-type creams containing 5% of retinyl palmitate and 10% of tocopheryl acetate are measured by Chroma Meters, and the content of RP is quantitatively analyzed by HPLC at 25 $^{\circ}C$ and 45 $^{\circ}C$. Also, how RP has been changed by heat, light, etc. is measured by HPLC, and toxicity of the changed substance is studied. Particle size of each type of the cream if measured, cellular renewal is measured by using DHP and Chroma Meters in order to study their efficacy and effect, moisture content is measured by using Corneometer and Tewameter, and how much wrinkles are improved is studied by using Image Analyzer. Development of MLV-type cream containing 5% of RP and 10% of TA, and satisfying conditions for better creams has been successful.
Twenty crossbred (HF${\times}$Tharparkar) dry pregnant cows were divided into four equal groups. They were supplemented with 1,000 I.U. $\alpha$-tocopheryl acetate from 0 (group I), 15 (group II), 30 (group III) and 60 (group IV) days before parturition to 1month of lactation. All the cows were kept under similar feeding and management conditions. Blood plasma samples collected on specific days were analyzed for $\alpha$-tocopherol, retinol, total antioxidant activity (FRAP), immunoglobulin and calcium. Plasma $\alpha$-tocopherol concentration at 30 days prepartum averaged 3.5, 4.1, 4.4 and $3.9{\mu}g/ml$ and decreased by 50.0, 41.4, 34.1 and 33.3 percent on the day of parturition in the four respective groups. After calving, plasma vitamin E started to recover earlier in groups II, III and IV as compared to group I. Mean plasma $\alpha$-tocopherol concentration at 21 days postpartum was significantly higher in groups II, III and IV (2.9, 3.5 and $3.1{\mu}g/ml$) compared to group I ($1.9{\mu}g/ml$) cows. Plasma retinol concentration also showed a substantial decrease in all the groups on the day of calving but recovered to its normal value at 3 weeks postpartum. Plasma total antioxidant activity averaged 901, 895, 859 and $875{\mu}mol/l$ in the four respective groups on 30 days prepartum and decreased on the day of calving in all the groups, but the decrease was less in groups III and IV. Plasma immunoglobulin concentration was higher in group IV, followed by groups III, II and I, respectively, showing better immune status of vitamin E supplemented cows due to less oxidative stress. Supplementation of vitamin E resulted in higher plasma calcium concentration. The data showed that vitamin E supplementation should be started at least 30 days prepartum to reduce oxidative stress in periparturient cows.
본 연구에서는 나노입자의 제조 방법인 용매 확산 방법 (emulsification diffusion method)을 이용하여 poly (DL-lactide-co-glycolide) (PLGA) 나노입자를 제조하고 지용성 vitamin A (Retinol)와 Vitamin E acetate를 담지하였다. 고분자 용액은 물에 잘 혼합되는 유기 용매인 에탄올과 아세톤의 이종 혼합 용매를 사용하여 제조하였고 유화제는 생체적합성이 우수한 polyethyleneglycol-polypropyleneglycol diblock copolymer를 사용하였다. 고분자의 농도, 유화제의 농도, 물/오일상의 비, 고분자/약물의 비 등의 인자들이 나노입자의 형성과 약물의 담지 효율에 미치는 영향을 조사하였다. 활성 성분이 로딩된 나노입자를 제조한 후, 입자의 크기와 분포도는 광산란 입도 분석기를 이용하여 측정하였고 담지 효율은 UV-visible spectroscopy를 이용하여 평가하였다. 제조된 나노입자는 50-200 nm의 크기와 단분산 형태의 크기분포를 보였으며 담지 효율은 50-60%까지 얻을 수 있었다. 또한, 유기상과 수용액상에서 이종 혼합 용매와 고분자의 농도에 대한 적당한 조건을 조절함으로써 PLGA 나노입자의 높은 수율과 우수한 물리적 특성을 얻을 수 있었다.
Retinol은 열과 빛에 쉽게 산화되기 때문에 그 유도체인 Retinyl Palmitate를 사용하고 있으나 이것 또한 안정성이 우려되어 많은 양을 사용하지 못하고 있다. 본 연구에서는 Retinyl Palmitate 5% 와 Tocopgeryl Acetate 10%를 함유한 W/O, W/S, O/W, MLV Type의 크림에서 열적 안정성 및 UV 안정성을 CHROMA METERS로 측정하였으며, $25^{\circ}C$, $45^{\circ}C$에서 RP의 함량을 HPLC로 정량 분석하였다. 또한 RP가 열, 빛 등에 의해서 어떤 물질로 변화하였는지를 측정하였으며, 변화된 물질의 독성에 대한 연구를 하였다. 각각의 크림 TYPE 마다 입자 SIZE를 측정했으며, DNA와 CHROMA METERS를 사용하여 CELLULAR RENEWAL을 측정하였다.
The present study was conducted to evaluate effects of the increased dietary vitamin A supplementation on the vitamin A, vitamin E and ascorbic acid concentrations in the plasma and liver and activities of some enzymes in the liver of the growing chicken. One hundred and twenty female chickens at 4 weeks of age were divided in 6 equal groups in accordance with their body weight. They were housed in cages and fed on standard wheat-barley-based broiler diet balanced in the major nutrients. Vitamin A was supplemented in the form of retinyl acetate. Control diet was supplemented with 10 IU/g and experimental feeds were supplemented with 50, 100, 500, 1000 and 2000 IU/g. At days 42 and 56 of the development 8 chickens from each group were killed, plasma and liver were collected for vitamin and enzyme analyses. The increased vitamin A supplementation was associated with its increased accumulation in the liver and with a reduction of ${\alpha}-tocopherol$ concentrations in the plasma and liver. The blood plasma was more resistant to vitamin A concentration changes and the retinol level was elevated only when the vitamin A dose exceeded 100 IU/g feed. Ascorbic acid concentration in the liver was elevated when moderately high vitamin A supplementation was used but significantly decreased at the highest vitamin A dose. Similar changes were observed with glycogen concentration in the liver. Activities of hexokinase, glucose-6-phosphatase and lactate dehydrogenase in the chicken liver were also dependent on vitamin A supplementation, decreasing with highest vitamin A doses. Therefore the observations showed that the vitamin A excess compromises antioxidant system of the growing chickens suggesting that prooxidant activity may be responsible for at least part of the toxicity of vitamin A.
Development of alternative testing methods for the replacement of hazardous reagents with less hazardous ones is strongly enforced because exposure of human and environment to hazardous reagents are restricted and hazardous reagents are gradually prohibited from using in various testing methods. Thus, in this study, we developed 8 monographs from the Korean Pharmaceutical Codex by substituting the use of the hazardous reagents including ICH class 1 such as benzene, chloroform and dioxane to the use of less toxic ones like ICH class 2 or 3 reagents. We also improved their qualification and quantification performance. Among 8 monographs, the 6 newly developed TLC methods for the identification of nifedipine, oxolamine citrate, ketoprofen lysinate, chlorquinaldol, retinol acetate, and riboflavin showed a clear spot of corresponding material without any interference in spite of the replacement with ICH class 2 or 3 reagents. For the quantification of domperidone and trimebutine, HPLC methods were developed for the substitution of UV/VIS spectrometry and titrimetry, respectively. These HPLC methods were validated for the linearity, recovery, reproducibility, and inter-laboratory variations. In conclusion, the newly developed methods could be expected to become valuable tools for revising the Korean Pharmaceutical Codex.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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