도열병균, Magnaporthe grisea, 균주간의 유전적 유연관계를 분석하고 그들의 유전에 관한 '기본 정보를 얻고자 DNA polymorphism 분석을 실시하였다. 기주가 다른 도열병 균주들이 공시되었고 cloning에 의해 벼 도열병균 KJ201레이스 균주로부터 생성된 임의 선발 genomic clone들이 공시균주들간의 polymorphism을 밝히기 위해 사용되었던 바 그중 repectitive sequence를 보유한 repeated copy clone 하나가 선발되었다. Clone pMJ6에 의해 밝혀진 repetitive sequence는 Southern hybridization시 벼 분리균주에는 약 30개, 다른 기주 분리균에도 20∼33개의 밴드를 형성하였다. 반면 피 분리균주에는 단지 두 개의 밴드만을 나타내 분리기주가 다른 균주간에 뚜렷한 polymorphism이 존재하였으며 parsimony 분석에서도 역시 아주 먼 cluster를 형성하여 피 분리균은 다른 기주 분리균과 유전적으로 상당히 먼 것으로 추정되었다. 공시균의 genomic DNA를 HindIII로 처리했을 때 pMJ6에 의한 밴드양상은 공시균을 EcoRI으로 처리했을 때의 MGR probe의 밴드 양상과 유사하여 이 repeated copy clone이 도열병균주간의 유전적 유연관계를 분석하는데 MGR 못지않게 유용할 것으로 보인다.
The genetic diversity of plant growth-promoting rhizobacterial (PGPR) fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane (Saccharum officinarum L.) rhizosphere was analyzed. Selected isolates were screened for plant growthpromoting properties including production of indole acetic acid, phosphate solubilization, denitrification ability, and production of antifungal metabolites. Furthermore, 16S rDNA sequence analysis was performed to identify and differentiate these isolates. Based on 16S rDNA sequence similarity, the isolates were designated as Pseudomonas plecoglossicida, P. fluorescens, P. libaniensis, and P. aeruginosa. Differentiation of isolates belonging to the same group was achieved through different genomic DNA fingerprinting techniques, including randomly amplified polymorphic DNA (RAPD), amplified ribosomal DNA restriction analysis (ARDRA), repetitive extragenic palindromic (REP), enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC), and bacterial repetitive BOX elements (BOX) analyses. The genetic diversity observed among the isolates and rep-PCR-generated fingerprinting patterns revealed that PGPR fluorescent pseudomonads are associated with the rhizosphere of sugarcane and that P. plecoglossicida is a dominant species. The knowledge obtained herein regarding the genetic and functional diversity of fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane rhizosphere is useful for understanding their ecological role and potential utilization in sustainable agriculture.
Mycobacterium leprae detection is difficult even with molecular biological techniques due to the low sensitivity of current methodologies. In this report, real-time PCR targeting the M. leprae-specific repetitive element (RLEP) sequence was developed as a new diagnostic tool and evaluated using clinical specimens. For this, M. leprae DNAs were extracted from skin biopsy specimens from 80 patients and analyzed by real-time PCR using TaqMan probe. Then, the detection efficiency of the real-time PCR was compared with that of standard PCR. In brief, the rate of positive detection by the standard PCR and real-time PCR was 32.50% and 66.25%, respectively. The results seemed to clearly show that the TaqMan real-time PCR developed in this study may be a useful tool for sensitive detection of M. leprae from clinical specimens.
The aim of this work was to validate a rapid and an accurate method for detecting Mycobacterium leprae in clinical specimens using nested PCR targeting M. leprae-specific repetitive element (RLEP) sequence. The primers were derived from the RLEP sequence which yield a 272 bp outer product and a 230 bp inner product. The specificity and the sensitivity of the nested PCR were compared with those of single PCR for detecting M. leprae using DNAs isolated from reference strain and various species of Mycobacterium. The results showed that the sensitivity of the nested PCR was about 100 to 1,000 times higher than that of the single PCR and also showed that both the single and the nested PCR were highly specific to M. leprae. Subsequently, the usefulness of the single and nested PCR was evaluated with clinical samples isolated from leprosy patients. The number of positive detections by the single and the nested PCR with a total of 20 specimens from leprosy patients were 9 (45%) and 20 (100%), respectively. The results clearly showed that nested PCR has highest sensitivity in detecting M. leprae from clinical specimens. Therefore, nested primers targeting RLEP sequence developed in this study seems to be useful to detect the presence of M. leprae.
DNA 다형성을 이용한 누에 유전자 해석기술을 개발하기 위하여 광식성 누에 계통 J111과 비광식성계통 $C_3$의 DNA를 분리하여 유전자 은행을 제작하였다. 누에 유전자 은행은 genomic DNA를 EcoRI로 절단한후 pUC18에 ligation 시켜 DH5$\alpha$ E. coli에 형질전환 시켰다. 형질전환 후 얻어진 colony는 15개 누에 품종의 genomic DNA에 hybridization하였을 때 누에의 품종에 관계없이 highly repetitive, moderately repetitive 및 single 혹은 low copy number 로 구분되었다. RFLP마커에 적합한 single 및 low-copy number band만을 형성하는 colony probe을 신속하게 선발하고자 colony또는 genomic DNA로 hybridization하였다. Single 및 low-copy number의 특성을 가진 219개의 clone을 선발하여 Hind III등 8종의 제한효소별로 처리한 genomic DNA를 이용하여 다형성을 검정하여 J111과 $C_3$ 계통간 다형성을 보인 46개의 clone을 선발하였다. 선발된 clone의 일부를 J111과 $C_3$를 교배하여 얻은 $F_2$의 blot에 hybridization 결과 RFLP clone들이 양친검정에 이용가능하여 누에 RFLP 연관 지도 작성의 기반을 조성하게 되었다.
본 연구에서는 E. coli. Salmonella, Shigella, Vibrio 등 4속의 주요 식중독유발 그람 음성 세균들을 대상으로 반복성 염기서열인 REP DNA sequence를 응용한 REP-PCR을 실시하였다. 이전의 보고에서 이들 4속의 식중독 유발세균 중 각각 혹은 일부를 대상으로 반복성 염기서열을 이용한 PCR을 적용한 사례는 있지만 그때 적용한 primer, PCR 반응조건 및 전기영동조건 등이 다양하였다. 그러므로 본 연구에서는 이와같은 4속의 세균들에 대하여 최적화된 동일한 primer와 PCR 반응조건 및 전기영동조건을 표준조건으로서 적용하였다. 그 결과로서 모든 4속의 식중독 세균 균주마다 REP-PCR 후 생성되는 fingerprinting pattern에서 속마다 1-3개의 공통적이며 독특한 band가 생성되는 것이 확인되어 이러한 pattern을 이용한 속 수준의 분리 동정과 그와 같은 주요 band들 이외의 부수적인 band들을 고려하여 종 수준까지의 분리도 가능함을 확인하였다. 따라서 본 연구를 통하여 반복적 DNA 염기서열을 이용한 REP-PCR이 주요 식중독 세균의 분리 동정 방법으로 사용될 수 있음을 확인하였다. 또한 본 연구를 통하여 얻은 결과는 더 많은 속(genus)의 식중독세균을 대상으로 한 새로운 분리 동정 방법을 확립하기 위하여 사용될 수 있을 것이다.
This paper introduces a novel repetitive delivery scheme for the left and right views in service-compatible (SC) 3D video that provides full backward compatibility to a legacy DTV system while retaining HD 3D visual quality without additional bandwidth or a codec over the legacy broadcasting channel. The proposed SC delivery scheme transmits individual view sequences of a 3D video in interlaced form, that is, a left-view sequence of a 3DTV program to be used repeatedly is transmitted first and stored locally, and the right-view sequence of the 3D program is then transmitted. This paper specifically describes the signaling, synchronization, and storage format methods used to validate the proposed SC delivery scheme. The experiment results show that the proposed SC delivery scheme can be effectively applied for an SC 3DTV service without degrading the DTV quality using only legacy DTV platforms.
DNA fingerprint patterns of 8 Brucella reference strains and 15 B. abortus field isolates were characterized by repetitive element sequence-based PCR (rep-PCR) using BOX- and ERIC-primers in this study. AMOS PCR differentiated all Brucella field isolates from B. abortus RB51, a vaccine strain by producing a B. abortus-specific 498 bp band. Rep-PCR using BOX-primer produced 13 to 18 bands with sizes of between 230 and 3,300 bp, and discriminated Brucella strains to the species level except B. canis and B. suis. PCR products amplified with ERIC primers were, however, not appropriate for differentiating the Brucella isolates. DNA fingerprint patterns for all B. abortus field isolates were identical among them and were put on one cluster with B. abortus biovar 1 reference strain in the dendrogram, indicating they were highly clonal. These results suggested that rep-PCR using BOX primer might to be a useful tool for calculating genetic relatedness among the Brucella species and for the study of brucellosis epidemiology.
This paper describes an intensive analysis of a harmonic identification algorithm in non-ideal voltages source systems. The dq-axis Fourier with a positive sequence voltage detector (DQFP) is a novel harmonic identification algorithm for active power filters. A compensating current control system based on repetitive control is presented. A design and stability analysis of the proposed current control are also given. The aim of the paper is to achieve a robustness of the harmonic identification in a distorted and unbalanced voltage source. The proposed ideas are supported by a hardware in the loop technique based on a $eZdsp^{TM}$ F28335 and the Simulink program. The obtained results are presented to demonstrate the performance of the harmonic identification and the control strategy for the active power filter in non-ideal systems.
본 연구는 특정 아미노산들로 구성된 단위체가 반복되는 형태를 가지는 반복단위 단백질을 유전공학적으로 합성하는 방법들과 응용사례들을 소개하고 있다. 유전공학적 합성법은 단위체의 반복횟수를 정확하게 제어하면서 인식부위의 제한을 없애서 원하는 단백질만을 발현할 수 있도록 발전해왔으며, 최근 소개된 RDL과 CCM 방법에 의하여 가능해졌다. 반복단위 단백질의 응용사례로는 대표적으로 ELP, SLP, Prolamin 등의 단백질을 합성하여 생체재료나 약물전달시스템을 개발하는데 응용하거나, ELFSE의 drag-tag 개발에 응용되는 연구들이 진행되고 있다. 화학적으로 합성된 고분자에 비해 유전공학적으로 합성된 반복단위 고분자의 경우, 고유의 물리적 성질과 함께 환경에 미치는 유해함이 상대적으로 적다는 점 때문에 미래의 신소재로 기대되고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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