Most of the current licenced hepatitis B vaccines are being produced by recombinant DNA technology in large fermentation cultures of Saccharomyces cerevisiae of yeast cells which carry the gene coded for hepatitis B virus surface antigen. These vaccines are proved very effective clinically and the immunogenicity of vaccines could be maintained for a long time under refrigeration. To develope the stabilizer that could increase the stability of hepatitis B virus vaccine which could be stored for a long period at room temperature or higher conditions, glucose, lactose and sucrose solutions in phosphate buffered saline were added into hepatitis B vaccine respectively to make 2.5%, 5%, 7.5% and 10% final concentration in vaccines. These sugar-vaccine mixtures were stored at room temperature for one month, two months and three months respectively and then inoculated into ICR mice intramuscularly. On the fourteenth day after inoculation, mice were bled and sera were tested for the evaluation of efficacies of vaccines. The results showed that 5% glucose, 7.5% lactose and sucrose increased the stability of vaccines in some degree and this method could be applied for the production of other viral vaccines and bacterial vaccines.
Subunit vaccines are safer and more stable than live vaccines although they have the disadvantage of eliciting poor immune response. To develop a subunit vaccine, an effective delivery system targeting the key elements of the protective immune response is a prerequisite. In this study, oxidized carbon nanospheres (OCNs) were used as a subunit vaccine delivery system and tuberculosis (TB) was chosen as a model disease. TB is among the deadliest infectious diseases worldwide and an effective vaccine is urgently needed. The ability of OCNs to deliver recombinant Mycobacterium tuberculosis (Mtb) proteins, Ag85B and HspX, into bone marrow derived macrophages (BMDMs) and dendritic cells (BMDCs) was investigated. For immunization, OCNs were mixed with the two TB antigens as well as the adjuvant monophosphoryl lipid A (MPL). The protective efficacy was analyzed in vaccinated mice by aerosol Mtb challenge with a virulent strain of Mtb and the bacterial burdens were measured. The results showed that OCNs are highly effective in delivering Mtb proteins into the cytosol of BMDMs and BMDCs. Upon immunization, this vaccine formula induced robust Th1 immune response characterized by cytokine profiles from restimulated splenocytes and specific antibody titer. More importantly, enhanced cytotoxic $CD8^+$ T cell activation was observed. However, it did not reduce the bacteria burden in the lung and spleen from the aerosol Mtb challenge. Taken together, OCNs are highly effective in delivering subunit protein vaccine and induce robust Th1 and $CD8^+$ T cell response. This vaccine delivery system is suitable for application in settings where cell-mediated immune response is needed.
목 적 : 혈장백신의 항체의 지속성에 관한 보고는 다양하지만, 유전자재조합 백신의 추적관찰에 대한 연구는 많지 않아 저자들은 신생아시기에 유전자재조합 백신을 기본접종 후 접종방법에 따른 5년 후 항체의 지속성과 기본접종 후 각각의 항체역가에 따른 5년 후 항체음전율에 대해 알아보고자 본 연구를 시도하였다. 방 법 : 1993년 4월부터 12월까지 부산 문화병원에서 태어난 신생아 420례중 유전자재조합 백신을 기본접종 후 5년까지 추적관찰이 가능했던 114례를 대상으로 하였다. 기본접종 후와 5년 후 항체역가의 검사는 RIA로 시행하였다. 결 과 : 1) 2개월 접종을 하였을 경우 5년째 항체음성률은 5%이고, 6개월 접종을 하였을 경우 5년째 항체 음성률은 25.5%이었다(P value <0.05). 2) 2개월접종시 항체역가가 199.9 이하시 5%, 200~499.9시 0%, 500~999.9시 0%, 1,000 이상시 0%가 5년 추적검사시 항체음전이 되었다. 3) 6개월 접종시 항체역가가 199.9 이하시 66.7%, 200~499.9시 40%, 500~999.9시 23.9%, 1,000 이상시 22.5%가 5년 추적검사시 항체음전이 되었다. 결 론 : 이 연구에서는 유전자재조합 백신의 5년후 항체음전율은 5~25.5%였고, 항체가의 지속성은 접종방법과는 통계학저인 유의성을 보이지 않았고, 기본접종 후의 항체역가에 따른 5년 후 항체음전율과도 통계학적인 유의성은 보이지 않았다.
Vaccination is one of the most important and cost-effective methods of preventing infectious diseases. Over the past decade, scientific in molecular biology and immunology have improved understanding of many diseases and led to the development of novel strategies for vaccination. An ideal vaccine would induce effective immunity specific for the type of infection, have long duration, require minimal or no boosters, have safety, would not induce adverse reaction, and be easy to administer. The desire to meet these criteria has resulted in the development of vaccines that do not depend on the use of the viable disease agent. It is not the intent of this review to give an extensive review of the field of vaccinology, but rather to address characteristics of conventional and genetically engineered vaccines.
Noroviruses (NoVs) are one major etiologic agent in acute gastroenteritis (AGE) in all ages and are the primary cause of food-borne gastroenteritis worldwide. GII-4 NoVs has predominated since 1990s, and novel recombinant strains have been reported worldwide. Researchers face difficulties in making vaccines and therapeutic agents against NoVs due to the lack of cell culture and animal-model systems and the rapid emergence of novel variant strains. Recently, a randomized clinical trial for intranasal NoVs vaccine has been reported, which casts a light in the way of vaccine production. This review discusses the recent findings on the structure, immunity, and vaccination of NoVs.
Background: Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) infection is a primary cause of livestock diarrhea. Therefore, effective vaccines are needed to reduce the incidence of ETEC infection. Objectives: Our study aimed to develop a multivalent ETEC vaccine targeting major virulence factors of ETEC, including enterotoxins and fimbriae. Methods: SLS (STa-LTB-STb) recombinant enterotoxin and fimbriae proteins (F4, F5, F6, F18, and F41) were prepared to develop a multivalent vaccine. A total of 65 mice were immunized subcutaneously by vaccines and phosphate-buffered saline (PBS). The levels of specific immunoglobulin G (IgG) and pro-inflammatory cytokines were determined at 0, 7, 14 and 21 days post-vaccination (dpv). A challenge test with a lethal dose of ETEC was performed, and the survival rate of the mice in each group was recorded. Feces and intestine washes were collected to measure the concentrations of secretory immunoglobulin A (sIgA). Results: Anti-SLS and anti-fimbriae-specific IgG in serums of antigen-vaccinated mice were significantly higher than those of the control group. Immunization with the SLS enterotoxin and multivalent vaccine increased interleukin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) concentrations. Compared to diarrheal symptoms and 100% death of mice in the control group, mice inoculated with the multivalent vaccine showed an 80% survival rate without any symptom of diarrhea, while SLS and fimbriae vaccinated groups showed 60 and 70% survival rates, respectively. Conclusions: Both SLS and fimbriae proteins can serve as vaccine antigens, and the combination of these two antigens can elicit stronger immune responses. The results suggest that the multivalent vaccine can be successfully used for preventing ETEC in important livestock.
Yang Joo Kang;Deuk-Su Kim;Seyoung Kim;Young-Jin Seo;Kisung Ko
BMB Reports
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제56권7호
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pp.392-397
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2023
In this study, recombinant Fc-fused Prostate acid phosphatase (PAP) proteins were produced in transgenic plants. PAP was fused to immunoglobulin (Ig) A and M Fc domain (PAP-IgA Fc and PAP-IgM Fc), which were tagged to the ER retention sequence KDEL to generate PAP-IgA FcK and PAP-IgM FcK. Agrobacterium-mediated transformation was performed to produce transgenic tobacco plants expressing four recombinant proteins. Genomic PCR and RT-PCR analyses confirmed the transgene insertion and mRNA transcription of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK in tobacco plant leaves. Western blot confirmed the expression of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK proteins. SEC-HPLC and Bio-TEM analyses were performed to confirm the size and shape of the plant-derived recombinant PAP-Fc fusion proteins. In mice experiments, the plant-derived IgA and IgM Fc fused proteins induced production of total IgGs including IgG1 against PAP. This result suggests that IgA and IgM Fc fusion can be applied to produce recombinant PAP proteins as a prostate cancer vaccine in plant expression system.
Molecular cloning was carried out on the Danish strain of bovine viral diarrhea virus(BVDV) to construct strategy for the diagnostic tools and effective vaccine of BVD afterwards. A recombinant DNA clone(No. 29) was established successfully from cDNA for viral RNA tailed with adenine homopolymer at 3'-end. $^{32}P$-labeled DNA probes of 300~1,800bp fragments, originating from the clone 29, directed specific DNA-RNA hybridization results with BVDV RNA. Recombinant DNA of the clone 29 was about 5,200bp representing 41.6% of the full length of Danish strain's RNA, and restriction sites were recognized for EcoR I, Sst I, Hin d III and Pst I restriction enzymes in the DNA fragment.
Haemophilus parasuis causes contagious porcine Gl$\ddot{a}$sser's disease leading to severe losses in the swine industry. In this study, we established an efficient Escherichia coli-based system for the expression of H. parasuis major outer-membrane protein (MOMP) that has been known as a good vaccine candidate against Gl$\ddot{a}$sser's disease. Use of an E. coli-derived pelB leader sequence made it possible to produce recombinant MOMP (rMOMP) as the soluble forms without an additional refolding process. Using two different animal models, it was evaluated that the rMOMP was capable of inducing a significant immune response and providing protection against H. parasuis infection.
We investigated whether maternal antibodies (mAbs) elicited by dams immunized with recombinant vaccine candidates against avian pathogenic Escherichia coli (APEC) can passively confer protective immunity to chicks. In the present study, pBP244 plasmids carrying selected antigens of APEC were transformed into Salmonella Typhimurium JOL912, which was used as a vaccine candidate against APEC. The hens were immunized with the vaccine candidates using prime or booster doses. The levels of IgG and sIgA specific to the selected antigens increased significantly following prime immunization. To evaluate the persistence of passively transferred mAbs, the levels of IgY and IgA were determined in egg yolks and whites, respectively. The eggs from the immunized group showed consistently increased levels of IgY and IgA until week 16 post-laying (PL) and week 8 PL, respectively, relative to the control group. The presence of mAbs was observed in chicks that hatched from the hens, and titers of plasma IgY were consistently raised in those from the immunized hens by day 14 post-hatching. Further, chicks from the immunized hens were protected from challenge with a virulent APEC strain, whereas those from non-immunized hens showed acute mortality.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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