With the recent isolation of a new betanodavirus in shellfish, Korean Shellfish Nervous Necrosis Virus (KSNNV), it has also been identified the reassortant KSNNV of two RNA segments, in which one segment is KSNNV genotype but the other one is known genotype. In this study, we confirmed that the ressortant KSNNVs obtained in previous screening study of our laboratory for betanodaviruses in shellfish were KS/RGNNV and RG/KSNNV type by performing two consecutive multiplex RT-PCR on each RNA1 and RNA2 segment (R1- and R2-discriminative multiplex two-step RT-PCR, respectively) to determine the genotype of each segment based on the size of amplicon. In the pathogenicity analysis, none of the reassortants induced specific external symptoms or mortality of VNN, but viruses of 2 × 104~105 copies/mg or more were detected at 14 days after injection (107 copies/fish) in brain tissues of 4 species except for crucian carp and common carp among the 6 species of juvenile fish used. In addition, the histopathological features of weak but distinct vacuole formation were also found in the brain of these infected fish, but no difference was found between the two reassortants KS/RGNNV-KG and RG/KSNNV-CM.
We developed a reassortant RNA virus vector derived from $Cucumber$$mosaic$$virus$ (CMV), which has advantages of very wide host range and can efficiently induce gene silencing in a few model plants. Certain CMV isolates, however, show limited host ranges presumably because they naturally co-evolved with their own hosts. We used a reassortant comprised of two strains of CMV, Y-CMV and Gn-CMV, to broaden the host range and to develop a virus vector for virus-induced gene silencing (VIGS). Gn-CMV could infect chili pepper and tomato more efficiently than Y-CMV. Gn-CMV RNA1, 3 and Y-CMV RNA2-A1 vector were newly reconstructed, and the transcript mixture of RNA1 and 3 genomes of Gn-CMV and RNA2 genome of Y-CMV RNA2 containing portions of the endogenous phytoene desaturase (PDS) gene (CMV2A1::PDSs) was inoculated onto chili pepper (cv. Chung-yang), tomato (cvs. Bloody butcher, Tigerella, Silvery fir tree, and Czech bush) and $Nicotiana$$benthamiana$. All the tested plants infected by the reassortant CMV vector showed typical photo-bleaching phenotypes and reduced expression levels of $PDS$ mRNA. These results suggest that the reassortant CMV vector would be a useful tool for the rapid induction of the RNA silencing of endogenous genes in chili pepper and tomato plants.
Since the 2009 pandemic human H1N1 influenza A virus emerged in April 2009, novel reassortant strains have been identified throughout the world. This paper describes the detection and isolation of reassortant strains associated with human pandemic influenza H1N1 and swine influenza H1N2 (SIV) viruses in swine populations in South Korea. Two influenza H1N2 reassortants were detected, and subtyped by PCR. The strains were isolated using Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells, and genetically characterized by phylogenetic analysis for genetic diversity. They consisted of human, avian, and swine virus genes that were originated from the 2009 pandemic H1N1 virus and a neuraminidase (NA) gene from H1N2 SIV previously isolated in North America. This identification of reassortment events in swine farms raises concern that reassortant strains may continuously circulate within swine populations, calling for the further study and surveillance of pandemic H1N1 among swine.
Rotavirus infection is the leading cause of severe diarrhea disease in infants and young children worldwide. Rotavirus infects every child at least once by her/his $5^{th}$ birthday. It has been known that single episode of rotavirus infection can protect or alleviate subsequent illness caused by both homotypic and heterotypic rotaviruses. There are two currently licensed rotavirus vaccines. One is human-bovine rotavirus reassortant pentavalent vaccine ($RotaTeq^{TM}$), which contains five reassortant rotavirus (expressing protein G1, G2, G3, G4 and P[8]) and was licensed in Korea for use among infants in 2007. Another is live-attenuated human rotavirus vaccine ($Rotarix^{TM}$) derived from 89-12 strain which represents the most common of the human rotavirus VP7(G1) and VP4(P[8]) antigens. $Rotarix^{TM}$ was licensed in Korea in 2008. Both live oral rotavirus vaccines are efficacious in preventing severe rotavirus gastroenteritis.
Park Sun-Whan;Chung Dong-Hoon;Ahn Byung-Yoon;Lee Pyung-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권7호
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pp.1017-1025
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2006
Hantaviruses possess three RNA segments of negative sense. Co-infection of closely related hantaviruses may result in generation of a progeny virus with genomic polyploidy, containing a partial or complete set of genome originated from more than one parental virus. To characterize the formation of viral genomic polyploidy, cultured Vero-E6 cells were co-infected with two closely related hantaviruses, Hantaan and Maaji, and the progeny viruses examined. The genotype of plaque-purified viruses was analyzed by a virus-specific RT-PCR. Seventy percent (67/96) of the progeny virus was categorized as Hantaan and 3.3% (2/96) was classified as Maaji, whereas 20% (21/96) was considered polyploidy as they contained both types of the S RNA segment. Most of the polyploidy progeny viruses were unstable and gave rise to either one of the parental viruses or a reassortant after several rounds of plaque purification. No recombination between the heterologous pair of S RNA was observed for those polyploid viruses during three consecutive plaque-to-plaque passages. These data suggest that the viral polyploidy formation constitutes a primary mechanism underlying the generation of a newly emerged hantavirus.
Background: The H5 avian influenza viruses (AIVs) of clade 2.3.4.4 circulate in wild and domestic birds worldwide. In 2017, nine strains of H5N6 AIVs were isolated from aquatic poultry in Xinjiang, Northwest China. Objectives: This study aimed to analyze the origin, reassortment, and mutations of the AIV isolates. Methods: AIVs were isolated from oropharyngeal and cloacal swabs of poultry. Identification was accomplished by inoculating isolates into embryonated chicken eggs and performing hemagglutination tests and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The viral genomes were amplified with RT-PCR and then sequenced. The sequence alignment, phylogenetic, and molecular characteristic analyses were performed by using bioinformatic software. Results: Nine isolates originated from the same ancestor. The viral HA gene belonged to clade 2.3.4.4B, while the NA gene had a close phylogenetic relationship with the 2.3.4.4C H5N6 highly pathogenic avian influenza viruses (HPAIVs) isolated from shoveler ducks in Ningxia in 2015. The NP gene was grouped into an independent subcluster within the 2.3.4.4B H5N8 AIVs, and the remaining six genes all had close phylogenetic relationships with the 2.3.4.4B H5N8 HPAIVs isolated from the wild birds in China, Egypt, Uganda, Cameroon, and India in 2016-2017, Multiple basic amino acid residues associated with HPAIVs were located adjacent to the cleavage site of the HA protein. The nine isolates comprised reassortant 2.3.4.4B HPAIVs originating from 2.3.4.4B H5N8 and 2.3.4.4C H5N6 viruses in wild birds. Conclusions: These results suggest that the Northern Tianshan Mountain wetlands in Xinjiang may have a key role in AIVs disseminating from Central China to the Eurasian continent and East African.
Dharmayanti, Ni Luh Putu Indi;Hewajuli, Dyah Ayu;Ratnawati, Atik;Hartawan, Risza
Journal of Veterinary Science
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제21권4호
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pp.56.1-56.13
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2020
Background: The live bird market (LBM) plays an important role in the dynamic evolution of the avian influenza H5N1 virus. Objectives: The main objective of this study was to monitor the genetic diversity of the H5N1 viruses in LBMs in Indonesia. Methods: Therefore, the disease surveillance was conducted in the area of Banten, West Java, Central Java, East Java, and Jakarta Province, Indonesia from 2014 to 2019. Subsequently, the genetic characterization of the H5N1 viruses was performed by sequencing all 8 segments of the viral genome. Results: As a result, the H5N1 viruses were detected in most of LBMs in both bird' cloacal and environmental samples, in which about 35% of all samples were positive for influenza A and, subsequently, about 52% of these samples were positive for H5 subtyping. Based on the genetic analyses of 14 viruses isolated from LBMs, genetic diversities of the H5N1 viruses were identified including clades 2.1.3 and 2.3.2 as typical predominant groups as well as reassortant viruses between these 2 clades. Conclusions: As a consequence, zoonotic transmission to humans in the market could be occurred from the exposure of infected birds and/or contaminated environments. Moreover, new virus variants could emerge from the LBM environment. Therefore, improving pandemic preparedness raised great concerns related to the zoonotic aspect of new influenza variants because of its high adaptivity and efficiency for human infection.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.135.3-136
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2003
In the present study, type A influenza live virus, NC-22-8, which is a combination of a cold-adapted attenuated donor virus (HTCA-A101) and a wild type virus (A/New Caledonia/20/99), was constructed and the efficacy of this new virus was assessed by immunogenicity and protection tests in the mouse model. NC-22-8 (1'$10^7, 1'10^5, 1'10^3$ pfu/mouse) was intranasally administered to mice. Four weeks later, the titers of specific IgG and haemagglutinin inhibiton (HI) were measured from blood and the titer of secretary IgA (sIgA) was also detected from boncho alveolar lavage (BAL) and mucosal fluid. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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