The possibility of inadvertent introduction of therapeutic gene expressing viral vectors has raised safety concerns about germ-line infection. Particularly, for indications such as prostate cancer and ovarian cancer, the proximity of the point of viral administration to organs of the reproductive system raises concerns regarding inadvertent germ-line transmission of genes carried by the virus vector. To evaluate the safety of in vivo adenovirus mediated gene transfer, we explored the biodistribution, persistance and potential germ-line transmission of p53-expressing adenovirus (Ad-CMV-p53). Both male and female Balb/c mice were injected with $1{\times}10^9$ PFU of Ad-CMV-p53. The PCR analysis showed that there were detectable vector sequences in liver, kidney, spleen, seminal vesicle, epididymis, prostate, ovary, and uterus. The RT-PCR analysis for detecting inserted gene, p53 showed that Ad-CMV-p53 viral RNA were present in spleen, prostate and ovary. Direct injected male and female mice of adenovirus vector into testis and ovary were mated and their of offspring were evaluated for germ-line transmission of the adenoviral vector. The PCR and RT-PCR analysis showed no evidence of germline transmission, although vector sequences were detected in DNA extracted from gonadal tissues. Real-time PCR result confirmed a significant decrease of adenovirus in gonad tissues 1 week after injection. We have also analysed the cell specific localization of viral DNA in gonad tissues by using in-situ PCR. Positive signals were detected in interstitial tissue but not in seminiferous tubule in sperm. In the case of ovary, adenovirus signal were localized to the stromal tissue, but no follicular signals were observed. Together, these data provide strong evidence that the risk of the Inadvertent germ-line transmission of vector sequences following intraperitoneal or direct injection into genito-urinary system of adenovirus is extremely low.
Kim, Jin-Su;Lee, Dong-Soo;Lee, Byung-Il;Lee, Jae-Sung;Shin, Hee-Won;Chung, June-Key;Lee, Myung-Chul
The Korean Journal of Nuclear Medicine
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v.36
no.6
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pp.317-324
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2002
Purpose: The use of statistical parametric mapping (SPM) program has increased for the analysis of brain PET and SPECT images. Montreal Neurological Institute (MNI) coordinate is used in SPM program as a standard anatomical framework. While the most researchers look up Talairach atlas to report the localization of the activations detected in SPM program, there is significant disparity between MNI templates and Talairach atlas. That disparity between Talairach and MNI coordinates makes the interpretation of SPM result time consuming, subjective and inaccurate. The purpose of this study was to develop a program to provide objective anatomical information of each x-y-z position in ICBM coordinate. Materials and Methods: Program was designed to provide the anatomical information for the given x-y-z position in MNI coordinate based on the Statistical Probabilistic Anatomical Map (SPAM) images of ICBM. When x-y-z position was given to the program, names of the anatomical structures with non-zero probability and the probabilities that the given position belongs to the structures were tabulated. The program was coded using IDL and JAVA language for 4he easy transplantation to any operating system or platform. Utility of this program was shown by comparing the results of this program to those of SPM program. Preliminary validation study was peformed by applying this program to the analysis of PET brain activation study of human memory in which the anatomical information on the activated areas are previously known. Results: Real time retrieval of probabilistic information with 1 mm spatial resolution was archived using the programs. Validation study showed the relevance of this program: probability that the activated area for memory belonged to hippocampal formation was more than 80%. Conclusion: These programs will be useful for the result interpretation of the image analysis peformed on MNI coordinate, as done in SPM program.
For the purpose of utilization in 3-D conformal radiotherapy and whole body radiosurgery, the Whole Body 3-Dimensional Topographic Radiation Therapy System has been developed. Whole body frame was constructed in order to be installed on the couch. Radiopaque catheters were engraved on it for the dedicated coordinate system and a MeV-Green immobilizer was used for the patient setup by the help of side panels and plastic rods. By designing and constructing the whole body frame in this way, geometrical limitation to the gantry rotation in 3-D conformal radiotherapy could be minimized and problem which radiation transmission may be altered in particular incident angles was solved. By analyzing CT images containing information of patient setup with respect to the whole body frame, localization and coordination of the target is performed so that patient setup error may be eliminated between simulation and treatment. For the verification of setup, the change of patient positioning is detected and adjusted in order to minimize the setup error by means of comparison of the body outlines using 3 CCTV cameras. To enhance efficiency of treatment procedure, this work can be done in real time by watching the change of patient setup through the monitor. The method of image subtraction in IDL (Interactive Data Language) was used to visualize the change of patient setup. Rotating X-ray system was constructed for detecting target movement due to internal organ motion. Landmark screws were implanted either on the bones around target or inside target, and variation of target location with respect to markers may be visualized in order to minimize internal setup error through the anterior and the lateral image information taken from rotating X-ray system. For CT simulation, simulation software was developed using IDL on GUI(Graphic User Interface) basis for PC and includes functions of graphic handling, editing and data acquisition of images of internal organs as well as target for the preparation of treatment planning.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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