The first morphogenetic event of preimplantation development, compaction, was required efficient production of porcine embryos in vitro. Compaction of the porcine embryo, which takes place at post 4-cell stage, is dependent upon the adhesion molecule E-cadherin. The E-cadherin through ${\beta}$-catenin contributes to stable cell-cell adhesion. Rho-associated kinase (ROCK) signaling was found to support the integrity of E-cadherin based cell contacts. In this study, we traced the effects of ROCK-1 on early embryonic development and structural integrity of blastocysts in pigs. Then, in order to gain new insights into the process of compaction, we also examined whether ROCK-1 signaling is involved in the regulation of the compaction mediated by E-cadherin of cellular adhesion molecules. As a result, real-time RT-PCR analysis showed that the expression of ROCK-1 mRNA was presented throughout porcine preimplantation stages, but not expressed as consistent levels. Thus, we investigated the blastocyst formation of porcine embryos treated with LPA and Y27632. Blastocysts formation and their qualities in LPA treated group increased significantly compared to those in the Y27632-treated group (p < 0.05). Then, to determine whether ROCK-1 associates embryonic compaction, we explored the effect of activator and/or inhibitor of ROCK-1 on compaction of embryos in pigs. The rate of compacted morula in LPA treated group was increased compared to that in the Y27632-treated group (39.7 vs 12.0%). Furthermore, we investigated the localization and expression pattern of E-cadherin at 4-cell stage porcine embryos in both LPA- and Y27632-treated groups by immunocytochemical analysis and Western blot analysis. The expression of E-cadherin was increased in LPA-treated group compared to that in the Y27632-treated group. The localization of E-cadherin in LPA-treated group was enriched in part of blastomere contacts compared to that Y27632-treated group. ROCK-1 as a crucial mediator of embryo compaction may plays an important role in regulating compaction through E-cadherin of the cell adhesion during the porcine preimplantation embryo. We concluded that ROCK-1 gene may affect the developmental potential of porcine blastocysts through regulating embryonic compaction.
Han, Dae-Hyun;Kang, Lae-Hyong;Thayer, Jordan;Farrar, Charles
Composites Research
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v.28
no.4
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pp.155-161
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2015
A composite structure was fabricated with embedded impact detection capabilities for applications in Structural Health Monitoring (SHM). By embedding sensor functionality in the composite, the structure can successfully perform impact localization in real time. Smart resin, composed of $Pb(Ni_{1/3}Nb_{2/3})O_3-Pb(Zr,\;Ti)O_2$ (PNN-PZT) powder and epoxy resin with 1:30 wt%, was used instead of conventional epoxy resin in order to activate the sensor function in the composite structure. The embedded impact sensor in the composite was fabricated using Hand Lay-up and Vacuum Assisted Resin Transfer Molding(VARTM) methods to inject the smart resin into the glass-fiber fabric. The electrodes were fabricated using silver paste on both the upper and bottom sides of the specimen, then poling treatment was conducted to activate the sensor function using a high voltage amplifier at 4 kV/mm for 30 min at room temperature. The composite's piezoelectric sensitivity was measured to be 35.13 mV/N by comparing the impact force signals from an impact hammer with the corresponding output voltage from the sensor. Because impact sensor functionality was successfully embedded in the composite structure, various applications of this technique in the SHM industry are anticipated. In particular, impact localization on large-scale composite structures with complex geometries is feasible using this composite embedded impact sensor.
The purpose of the present study was to determine if monocarboxylate transporter(MCT) isoforms and Basigin(Bsg) are expressed in the efferent ductules(ED) and if MCT1 expression is under estrogen receptor(ER)α-regulation in the ED of male reproductive tract. The presence of MCT isoforms and Bsg mRNAs was detected by real-time polymerization chain reaction(PCR), and ERα-mediated regulation of MCT1 expression in the ED was indirectly determined by immuno- histochemistry. Current study found differential expression of MCT isoforms(MCT1, 2, 3, 4, and 8) and Bsg mRNAs in rat ED according to postnatal ages. In addition, comparison of MCT1 expression in the ED between wild type and ERα knockout mice at different postnatal ages showed basolateral localization of MCT1 in ciliated cells of the ED and, in part, ERα- mediated regulation of MCT1 expression. It is suggested that MCTs would play a role in regulation of function of the ED.
In High-Intensity Focused Ultrasound (HIFU) treatment, effective localization of HIFU focus is important for developing a safe treatment plan. While Magnetic Resonance Imaging guided HIFU (MRIgHIFU) can visualize the ultrasound path during the treatment for localizing HIFU focus, it is challenging in ultrasound imaging guided HIFU (USIgHIFU). In the present study, a real-time ultrasound beam visualization technique capable of localizing HIFU focus is presented for USIgHIFU. In the proposed method, a short pulse, with the same center frequency of an imaging ultrasound transducer below the regulated acoustic intensity (i.e., Ispta < 720 mW/㎠), was transmitted through a HIFU transducer whereupon backscattered signals were received by the imaging transducer. To visualize the HIFU beam path, the backscattered signals underwent dynamic receive focusing and subsequent echo processing. From in vitro experiments with bovine serum albumin gel phantoms, the HIFU beam path was clearly depicted with low acoustic intensity (i.e., Ispta of 94.8 mW/㎠) and the HIFU focus was successfully localized before any damages were produced. This result indicates that the proposed ultrasound beam path visualization method can be used for localizing the HIFU focus in real time while minimizing unwanted tissue damage in USIgHIFU treatment.
In the case of acquisition and displaying medical Images such as ultrasonography and endoscopy on VGA monitor of PC system, image degradation of tear-drop appears through scan conversion. In this study, we compare several methods which can solve this degradation and implement the hardware system that resolves this problem in real-time with PC. It is possible to represent high quality image display and real-time processing and acquisition with specific de-interlacing device and PCI bridge on our hardware system. Image quality is improved remarkably on our hardware system. It is implemented as PC-based system, so acquiring, saving images and describing text comment on those images and PACS networking can be easily implemented.metabolism. All images were spatially normalized to MNI standard PET template and smoothed with 16mm FWHM Gaussian kernel using SPM96. Mean count in cerebral region was normalized. The VOls for 34 cerebral regions were previously defined on the standard template and 17 different counts of mirrored regions to hemispheric midline were extracted from spatially normalized images. A three-layer feed-forward error back-propagation neural network classifier with 7 input nodes and 3 output nodes was used. The network was trained to interpret metabolic patterns and produce identical diagnoses with those of expert viewers. The performance of the neural network was optimized by testing with 5~40 nodes in hidden layer. Randomly selected 40 images from each group were used to train the network and the remainders were used to test the learned network. The optimized neural network gave a maximum agreement rate of 80.3% with expert viewers. It used 20 hidden nodes and was trained for 1508 epochs. Also, neural network gave agreement rates of 75~80% with 10 or 30 nodes in hidden layer. We conclude that artificial neural network performed as well as human experts and could be potentially useful as clinical decision support tool for the localization of epileptogenic zones.
Wnt proteins are a family of secreted glycoproteins that are evolutionarily conserved and considered to be involved in extensive developmental processes in metazoan organisms. The characterization of wnt genes may improve understanding the parasite's development. In the present study, a wnt4 gene encoding 491amino acids was amplified from cDNA of metacestodes of Taenia solium using reverse transcription PCR (RT-PCR). Bioinformatics tools were used for sequence analysis. The conserved domain of the wnt gene family was predicted. The expression profile of Wnt4 was investigated using real-time PCR. Wnt4 expression was found to be dramatically increased in scolex evaginated cysticerci when compared to invaginated cysticerci. In situ hybridization showed that wnt4 gene was distributed in the posterior end of the worm along the primary body axis in evaginated cysticerci. These findings indicated that wnt4 may take part in the process of cysticerci evagination and play a role in scolex/bladder development of cysticerci of T. solium.
To determine the differences in the in-vitro ovum maturation process of bovine, we compared the expression of MMPs in these oocytes and cumulus cell throughout oocytes maturated. In an attempt to investigate the effect of MMP activation and inhibitors in total protein of cumulus cell and, oocytes during oocytes maturation, we examined and monitored the localization and expression of MMPs (MMP-2 and MMP-9), TIMPs (TIMP-2 and TIMP-3), as well as their expression profiles (Real-time PCR, Gelatin Zymography and ELISA). Our results that the bovine oocytes MMP-2 and MMP-9 level was significantly associated with the rate of maturity of oocytes (P<0.05). In cumulus cell, MMP-2 was highly expressed in all stages of the oocyte's maturation. The final oocytes maturation exhibited strong gelatinase activity. There was no significant correlation between cumulus cell MMP-9 and the maturation rate of oocytes. However, for the oocyte cytoplasm MMP-9 expression was significant correlation to the maturation oocytes. There was no significant correlation between cumulonimbus cells MMP-9 and oocyte maturation rates; however, for oocyte cytoplasm, MMP-9 expression was significantly correlated with mature oocyte. However, the TIMP-1 and TIMP-2 protein expression patterns are not correlated with the maturation rate of the oocyte. Our results suggest that MMP different expression pattern may regulate the morphological remodeling of oocyte's in the cumulus cell. Further, the MMP-2 expression has a strong relation with a higher maturation rate of the oocyte.
KIPS Transactions on Computer and Communication Systems
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v.6
no.9
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pp.369-376
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2017
Recently, an RSSI-based fingerprinting localization technology has been widely used in indoor location-based services. In the conventional fingerprinting method, as many APs as possible are used to increase the accuracy of location estimation. In another study, a part of APs having the strongest RSSI signal intensity are selected and used to reduce the time spent for positioning. However, it does not reflect the influence of RSSI occurred from the changes of the surrounding environments such as human movement or moving obstacles in a real environment. The environmental changes may cause the difference between the predicted RSSI signal strength value and the measured value, and thus occur an unpredictable error in the position estimation. Therefore, in order to mitigate the error caused by environmental factors, it is necessary to select APs suitable for indoor positioning estimation considering the changes in the surrounding environments. In this paper, we propose a method to select stable APs considering the influence of surrounding environments and derive a suitable positioning algorithm. In addition, we compare and analyze the performance of the proposed method with that of the existing AP selection methods through experiments.
Fibronectin fragments found in the synovial fluid of patients with osteoarthritis (OA) induce the catabolic responses in cartilage. Nuclear high-mobility group protein Box 1 (HMGB1), a damage-associated molecular pattern, is responsible for the regulation of signaling pathways related to cell death and survival in response to various stimuli. In this study, we investigated whether changes induced by 29-kDa amino-terminal fibronectin fragment (29-kDa FN-f) in HMGB1 expression influences the pathogenesis of OA via an HMGB1-modulated autophagy signaling pathway. Human articular chondrocytes were enzymatically isolated from articular cartilage. The level of mRNA was measured by quantitative real-time PCR. The expression of proteins was examined by western blot analysis, immnunofluorescence assay, and enzyme-linked immunosorbent assay. Interaction of proteins was evaluated by immunoprecipitation. The HMGB1 level was significantly lower in human OA cartilage than in normal cartilage. Although 29-kDa FN-f significantly reduced the HMGB1 expression at the mRNA and protein levels 6 h after treatment, the cytoplasmic level of HMGB1 was increased in chondrocytes treated with 29-kDa FN-f, which significantly inhibited the interaction of HMGB1 with Beclin-1, increased the interaction of Bcl-2 with Beclin-1, and decreased the levels of Beclin-1 and phosphorylated Bcl-2. In addition, the level of microtubule-associated protein 1 light chain 3-II, an autophagy marker, was down-regulated in chondrocytes treated with 29-kDa FN-f, whereas the effect was antagonized by mTOR knockdown. Furthermore, prolonged treatment with 29-kDa FN-f significantly increased the release of HMGB1 into the culture medium. These results demonstrated that 29-kDa FN-f inhibits chondrocyte autophagy by modulating the HMGB1 signaling pathway.
The aim of this study was to investigate the expression and significance of microsomal prostaglandin synthase-1 (mPGES-1) and Beclin-1 in the development of prostate cancer (PCa). Immunohistochemistry was performed on paraffin-embedded sections with rabbit polyclonal against mPGES-1 and Beclin-1 in 40 PCa, 40 benign prostatic hyperplasia (BPH) and 10 normal prostate specimens for this purpose. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was applied for mRNA expression of mPGES-1 and Beclin-1, while MTT assays were used to ascertain the best working concentration of the mPGES-1 inhibitor (CAY10526). The effect of CAY10526 treatment on expression of Beclin-1 in DU-145 cells was studied using Western blot analysis. Localization of Beclin-1 and mPGES-1 was in endochylema. Significant differences in expression was noted among PCa, BPH and normal issues (P<0.05). Beclin-1 expression inversely correlated with mPGES-1 expression in PCa tissue (P<0.05). CAY10526 could significantly block mPGES-1 expression and the proliferation of DU-145 cells (P<0.05), while increasing Beclin-1 levels (P<0.05). Overexpression of mPGES-1 could decrease the autophagic PCa cell death. Inhibiting the expression of mPGES-1 may lead to DU-145 cell death and up-regulation of Beclin-1. The results suggest that inhibition of mPGES-1 may have therapeutic potential for PCa in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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