The process to acquire intron-GUS gene-expressed transformants from somatic embryos (including embryogenic calli) of Rosa hybrida cv. 'Sweet Yellow' using Agrobacterium-meditated transformation method was reported in this study. Somatic embryos including embryogenic calluses were infected with Agrobacterium tumefaciens AGL1 strain (O.D = 0.7~1.6) including intron-GUS gene for 30 min, and were co-cultured for 3 days. After co-cultivation, they were cultured on embryo germination medium (EGM) supplemented with $250\;mg{\cdot}L^{-1}$ cefotaxim at $4^{\circ}C$ for 7 days. Then, transient GUS gene expression was observed. Shoots were regenerated from the shoot primodia induced from the intron-GUS gene-transferred either somatic embryos or embryogenic calli cultured on EGM supplemented with both cefotaxim $250\;mg{\cdot}L^{-1}$ and ppt $2\;mg{\cdot}L^{-1}$. Before induction of rooting from shoots cultured on shoot growing medium supplemented with both cefotaxim $250\;mg{\cdot}L^{-1}$ and ppt $2\;mg{\cdot}L^{-1}$, the shoots were cultured on multi-shoot induction medium supplemented with both cefotaxim $250\;mg{\cdot}L^{-1}$ and ppt $2\;mg{\cdot}L^{-1}$ to induce multi-shoots. When expression of the gene from a part of the multi-shoots was identified by GUS transient assay, the putative transgenic multishoots were transferred to rooting medium supplemented with cefotaxim $250\;mg{\cdot}L^{-1}$. After the formation of healthy roots, transgenic plantlets were transferred to the greenhouse after acclimatization. The expression rate of the intron-GUS gene in the multi-shoots was 100%.
Ray, Durga;Kim, Yeon Ha;Choe, unjeong;Kang, Ho Young
Journal of Life Science
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v.31
no.1
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pp.28-36
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2021
Edwardsiella piscicida is a significant cause of hemorrhagic septicemia in fish and gastrointestinal infections in humans. Survival bacteria require specialized mechanisms to adapt to environmental fluctuations. Hence, to understand the mechanism through which E. piscicida senses and responds to environmental osmolarity changes, we determined the protein expression profile and physiological properties under various salinity conditions in this study. The OmpR protein is a part of the Env-ZOmpR two-component system that has been implicated in sensing salt stress in bacteria. However, the physiological role played by this protein in E. piscicida remains to be elucidated. Therefore, in this work, the function of the OmpR protein in response to salt stress was investigated. Phenotypic analysis revealed that, in the mutant, three of the biochemical phenotypes were different from the wild type, including, citrate utilization, hydrogen sulfide, and indole production. Introduction of the plasmid containing the entire ompR gene to the mutant strain returned it to its parental phenotype. The retarded growth rate also partially recovered. Furthermore, in our studies, OmpR was not found to be related to cell motility. Taken together, our results from the mutational analysis, the growth assay, MALDI-TOF MS, qRT-PCR, and the phenotype studies suggest that the OmpR of E. piscicida is implicated in osmoregulation, growth, expression of porins (ETAE_1826), virulence-related genes (EseC, EseD and EvpC), and certain genes of unknown function (ETAE_1540 and ETAE_2706).
In this study, we assessed the technological characteristics and safety of 88 Enterococcus faecium strains isolated from meju; the strains possess the glutamate decarboxylase gene gadA/B involved in γ-aminobutyric acid production. The study was conducted to evaluate the possibility of introducing E. faecium meju isolates as food fermentation starters. We observed that a NaCl concentration of 6% (w/v) facilitated the growth and acid production of all strains. At a NaCl concentration of 7%, 21 strains (24%) exhibited a low growth rate, 72 strains (82%) a weak acid production, and 16 strains (18%) showed no acid production. All strains exhibited protease activity at a NaCl concentration of 4%. At a NaCl concentration of 5%, 86 strains exhibited weak activity, and one strain showed no protease activity. We could not detect any lipase activity in the investigated strains. None of the strains exhibited an acquired antibiotic resistance to the seven antibiotics tested in the present study, namely ampicillin, chloramphenicol, ciprofloxacin, gentamicin, penicillin G, tetracycline, and vancomycin. We could identify the Enterococcus endocarditis antigen gene efaA and the tyrosine decarboxylase gene tdc contributing to tyramine production, in 88 meju isolates. We could not detect the Enterococcus surface protein gene esp, which is specifically possessed by human-originated E. faecium strains, in any of the 88 strains tested in the study.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.13
no.2
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pp.747-754
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2012
The purpose of this study was to compare inter-regional accident modes using the National Hospital Discharge Patient Injury Survey. In order to determine economic status of each region, 234 cities and counties were categorized as 5 groups according to their financial self-reliance ratio. The main results are as follows. First, transport accidents had increased by the age group of 25 to 44 but decreased thereafter. Second, the frequency of car accidents was the highest among several types of transport accidents. Most common site of transport accidents was roads and highways. Third, there was significant difference in the modes of transport accident among regions. Fourth, emergency admission rate was quite different according to regional groups but it was no significant difference by economic status. Lastly, there was significant difference in injury patterns by region groups. In regions which were high economic status, there were relatively less serious injury patterns such as sprain, strain, dislocation while regions which were in low economic status had experienced serious injury including fracture, stab wound, and open fracture. We could find the difference in accident modes by regional economic status. Therefore, health authority should consider different accident prevention strategies by regional groups.
A hyperthermophilic bacteria (strain HJ6) was isolated from a hot springs located in the Arima-cho, Hyogo, Japan. The cells were long-rod type ($2-4{\mu}m$), about $0.4{\mu}m$ in diameter. The pH and temperature for optimal growth were 6.5 and $80^{\circ}C$, respectively. Phylogenetic analysis based on the 16S rDNA sequence and biochemical studies indicated that HJ6 belonged to the genus Thermus thermophilus (Tt). The gene encoding the Trehalose synthase (TS) was cloned and sequenced. The open reading frame (ORF) of the TtTS gene was composed of 2,898 nucleotides and encoded a protein (975 amino acids) with a predicted molecular weight of 110.56 kDa. The deduced amino acid sequence of TtTS showed 99% and 83% identities to the Thermus caldophilus TS and Meiothermus ruber TS, respectively. TtTS gene was expressed in Escherichia coli cells, and the recombinant protein was purified to homogeneity. The optimal temperature and pH for Trehalose synthase activity were found to be $80^{\circ}C$ and 7.5, respectively. The half-life of heat inactivation was about 40 min at $90^{\circ}C$. The maximum trehalose conversion rate of maltose into trehalose by the enzyme increased as the substrate concentration increased, and reached 55.7% at the maltose concentration of 500 mM, implying that the enzyme conversion was dependent of the substrate concentration.
This study was carried out to determine the antioxidative, antimutagenic, and anticancer effects of functional food manufactured from fermented soybean(FFMFS) using DPPH free radical donating method, Ames test and cytotoxicity, respectively. FFMFS extracted with ethanol and then further fractionated to n-hexane, chloroform, ethyl acetate(EtOAc), butanol and water, stepwise. Among five fractions, the EtOAc fractions showed highest electron donating activities (31.6 $\mu\textrm{g}$/mL). The inhibition rate of ethanol extract(200 $\mu\textrm{g}$/plate) of FFMFS in the S. typhimurium TA100 strain showed 84.8% against the mutagenesis induced by MNNG. In addition, the suppression of EtOAc fractions with same concentration of FFMFS the S. typhimurium TA98 and TA100 strains showed 88.7% and 92.8% inhibition against Trp-P-l, respectively. The cytotoxic effects of FFMFS against the cell lines with human lung carcinoma(A549), human gastric carcinoma(AGS) and human breast adenocarcinoma(MCF-7) were inhibited with the increase of the extract concentration. The treatment of 1.0 mg/mL FFMFS of EtOAc fraction showed strong cytotoxicities of 84.5%, 88.7% and 85.6% against A549, AGS and MCF-7, respectively.
The sliding wear behavior of Ni-base hardfacing alloy, Deloro 50, was investigated at the contact stresses of 15ksi and 30ksi under the various wear environments. In air at room temperature, Deloro 50 showed lower wear resistance than Stellite 6 even at 15ksi due to the occurrence of severe adhesive wear. This seems to be caused by the lower hardness and work- hardening rate of Deloro 50 than those of Stellite 6. In water at room temperature, Deloro 50 showed as good wear resistance as Stellite 6 at 15ksi. It was considered to be due to that water could effectively prevent metal to metal contact through contacting asperities. However, Deloro 50 showed severe adhesive wear at 30ksi in water at room temperature. It seems to be that the water could not suppress adhesion wear at 30ksi. At $300^{\circ}C$ in air, Deloro 50 exhibited higher wear resistance than Stellite 6 even at 30ksi. It was considered that the oxide glaze layers formed on wear surface during sliding, effectively prevented direct metal-to-metal contacts.
Journal of Nuclear Fuel Cycle and Waste Technology(JNFCWT)
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v.9
no.2
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pp.93-98
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2011
Saline corrosion is one of the major degradation mechanisms for stainless steel type 304 (SS304) dry storage cask during the spent fuel interim storage period. Slow strain rate test (SSRT) and neutral salt spray test (NSS) were performed at $85^{\circ}C$ and $200^{\circ}C$ with 0.5 wt% sodium chloride mist sprayed on the cold-rolled SS304 specimens of different degrees of reduction in this study. The weight changes of the NSS specimens tested at $85^{\circ}C$ for 2000 hours differed greatly from those at $200^{\circ}C$. The weight loss of NSS specimens was not significant at $85^{\circ}C$ but the weight gain decreased gradually with increasing the cold-rolled reduction. The yield strength (YS) and ultimate tensile stress (UTS) values obtained from the SSRT tests for lightly cold-rolled specimens in the salt spray environment at $85^{\circ}C$ and $200^{\circ}C$ are slightly lower than in air. But for those with 20% reductions, the specimen strengths were no longer changed by the saline corrosion. The preliminary results demonstrated that the quality and performance of cold-rolled SS304 is acceptable for fabrication of dry storage casks. However, more work on the corrosion behavior of cold-rolled stainless steel in the saline atmosphere is needed to better understand its long-term performance.
Purpose: To evaluate the efficacy of antibiotic-loaded cement spacers (ALCSs) for the treatment of diabetic foot infections with osteomyelitis as a salvage procedure and to analyze the risk factors of treatment failure. Materials and Methods: This study reviewed retrospectively 39 cases of diabetic foot infections with osteomyelitis who underwent surgical treatment from 2009 to 2017. The mean age and follow-up period were $62{\pm}13years$ and $19.2{\pm}23.3months$, respectively. Wounds were graded using the Wagner and Strauss classification. X-ray, magnetic resonance imaging (or bone scan) and deep tissue cultures were taken preoperatively to diagnose osteomyelitis. The ankle-brachial index, toe-brachial index (TBI), and current perception threshold were checked. Lower extremity angiography was performed and if necessary, percutaneous transluminal angioplasty was conducted preoperatively. As a surgical treatment, meticulous debridement, bone curettage, and ALCS placement were employed in all cases. Between six and eight weeks after surgery, ALCS removal and autogenous iliac bone graft were performed. The treatment was considered successful if the wounds had healed completely within three months without signs of infection and no additional amputation within six months. Results: The treatment success rate was 82.1% (n=32); 12.8% (n=5) required additional amputation and 5.1% (n=2) showed delayed wound healing. Bacterial growth was confirmed in 82.1% (n=32) with methicillin-resistant Staphylococcus aureus being the most commonly identified strain (23.1%, n=9). The lesions were divided anatomically into four groups; the largest number was the toes: (1) toes (41.0%, n=16), (2) metatarsals (35.9%, n=14), (3) midfoot (5.1%, n=2), and (4) hindfoot (17.9%, n=7). A significant difference in the Strauss wound score and TBI was observed between the treatment success group and failure group. Conclusion: The insertion of ALCSs can be a useful treatment option in diabetic foot infections with osteomyelitis. Low scores in the Strauss classification and low TBI are risk factors of treatment failure.
In this study, a smart material applicable to speed bumps was developed using low-cost starch and waterbased suspensions, and their properties were investigated. Viscosity and shear stress according to the shear rate was measured by a rheometer to observe shear thickening behavior according to starch concentration. The shear thickening phenomenon and applicability to speed bumps were identified macroscopically via drop weight test and bike driving test, measuring the vibration after impact with a driving speed of 5-25 km/h. As a result of the viscosity measurement, shear thickening occurred after the shear thinning region at the beginning, and the critical strain causing the shear thickening phenomenon decreased as the concentration of starch increased. Also, the viscosity and shear stress increased significantly with the increase of the starch concentration. As a result of the drop weight test and the bike driving test, the suspension was changed to a solid-like state in a short time, and the impact energy was absorbed in the fluid. The shear thickening phenomenon easily occurred as the concentration of the fluid and the applied impact (velocity) increased. Therefore, it can be proposed the development of a smart speed bump material that operates in the range of 5-25 km/h with a Non-Newtonian fluid based on water and starch.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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