It has been investigated what could be the selective marker distinguishing the immature from mature spermatozoa and whether fi -glucuronidase and fi -glucosidase are dependent on androgen in the luminal fluid of the epididymis or not. The contents of hexose, hexosamine and sialic acid in the epithelial cells, luminal fluid and spermatozoa of the epididymis were examined and the patterns of protein bands were compared in each group of the luminal fluid by SDS-PAGE. Lactate dehydrogenase, glucose-6-phosphatase, Na+ -K+ -ATPase and MgNa-ATPase showed higher activities in the cauda than the caput epididymal spermatozoa but only $Mg^2$+-ATPase activity appeared to be changed significantly. When the contents of hexose, hexosamine and sialic acid were analyzed and compared quantitatively, those of hexose were significantly different in the luminal fluid of caput and cauda epididymis, those of hexosamine in the epithelial cells and those of sialic acid in the epithelial cells and luminal fluid. When SDS-PAGE has been performed in each group, the band of MW 33-37 KD which was absent in the luminal fluid of caput epididymis appeared obviously in the luminal fluid of cauda epididymis and ako apeared in the cauda sperm crude membrane fraction. In addition, $\beta$ -glucuronidase and $\beta$ -glucosidase activities and their dependence on androgen were measured and the SDS-PAGE patiems of proteins and/or glycoproteins in the luminal fluid were examined. The activities of these two enzymes in the luminal fluid of the epididymis decreased significantly from the 5th day after castration. When testosterone was injected, the activity of $\beta$ -glucuronidase began to increase significantly from the 5th day following injection and that of $\beta$ -glucosidase from the loth day. On the other hand, the band of about MW 21 KD was newly observed in the lumen of caput epididymis when testosterone was administered.
This research was undertaken to determine the effects of the cyclophosphamide (CP) on the epididymal corpus of the male rat in terms of ultrastructural alteration and protein analysis by SDS-PAGE at different groups; control group, 1 week group, 3 weeks group and 5 weeks group were treated with saline (control group) or CP at doses of 20mg/kg/week, 1 time a week, respectively. In the cytoplasm of the principal cells on the epididymal corpus, the mitochondria were significantly swollen or disrupted. The lumens of rough endoplasmic reticulum (rER) were also dilated and the number of secretory vesicles and lysosomes were increased respectively. CP caused changes in protein concentrations in the corpus of epididymis after CP treatment. Total proteins of 31 to 36 species were expressed in the corpus fluid. Then the more CP was increased, the more concentration of proteins caused to decrease, synthesize or increase in epididymal corpus. In contrast to the control group, in particular 88KD and the other 8 proteins in the corpus fluid, were decreased or disappeared respectively, whereas acid phosphatase and the other 9 proteins in the corpus fluid, were increased or synthesized respectively. The other proteins are not showed distinctive difference. It is suggested that treatment with CP alters the specific cell organelles and proteins in segment of the epididymal corpus.
Some of the information concerning sexual function in the male diabetes has been focused upon the problems of endocrine or semen parameters. However, the characteristics of acrosome reaction and spermatozoa concentration at the epididymis and vas deferens have scarcely been studied, and the causes of the infertility has not been critically identified. So, we designed to inspect the spermatozoa concentration and the characteristics of acrosome reaction at epididymis and vas deferens of diabetic Wistar rat induced by streptozotocin (STZ, 70 mg/kg, ip). Experimental animal was sacrificed at 3 days and 14 days after the STZ injection. In the diabetes-induced rat, the levels of insulin and glucose had a pattern of inverse proportion. The spermatozoa concentrations in caput and corpus epididymis were significantly decreased in all diabetic condition. In cauda epididymis, however, there was significant decrease in sperm concentration at 14 days onward. In diabetic rat, the spontaneous reaction rate of spermatozoa of cauda and vas deferens were significantly higher than the control group. The ARIC (acrosome reaction to ionophore challenge) value of caudal sperm was 28.7 at control, 22.1 at 3 days, and 8.3 at 14 days. In the present study the spermatozoa concentration was decreased and the spontaneous reaction rate was increased by diabetes. In ARIC-test, it is revealed that the fertility of spermatozoa of 14 days group was lower than control or 3 days group. Diabetes mellitus may be provoke the decreased fertilization rate and subsequent infertility and subsequent infertility.
흰쥐 정자의 성숙과정중에 일어나는 부정소 상피세포, 내강 및 정자 사이의 상호관계를 알아보기 위하여 각 실험군 별로 웅성호르몬 투여에 따른 탄수화물 관기의 함량 변화를 측정하였고, tunicamycin 투여 후 hexosamine의 할량 변화를 살펴봄으로써 glycosylation되는 장소를 확인하였다. 부정소두와 부정소이 상피세포내의 hexose 함량은 거세 후 5일군부터 유의성있게 감소하였고, testosterone 투여시는 각각 5일 , 10일군부터 유의하게 증가하였으며 , hexosamine과 sialic acid의 경우도 통계적으로 유의하게 변화하는 시기는 달랐으나 hexose와 유사하게 증가와 감소하는 경향이 나타났으므로 이러한 하나하나의 탄수화물 관기의 함량 변화는 웅성호르몬에 의존적임을 알 수 있었다. Tunicamycin을 투여하여 hexosamine의 함량 변화를 측정하였을 때 투여 기간에 따라 상피세포와 내강액에서 유의하게 감소하였으나, 정자에서는 일관성있게 감소되지 않았으므로 정자가 직접 hexosamine또는 여러 당단백질 합성에 관여하는 것은 아니며 부정소상피세포나 내장에 의하여 영향받을 수 있다는 가능성을 확인하였다.
Objective : This study was conducted to investigate the effects of Panax Ginseng (인삼) on the sperm motility and spermatogenesis in the male rat. Methods : We used 8-week-old Sprague-Dawley rats, and administered the extract powder of Panax Ginseng to 5 rats (treated group) and normal saline (control group) once a day for 28 days. We isolated their testes surgically, then observed the change of the body weights before and after administration of Panax Ginseng extracts and normal saline. We observed the weight of the testes, epididymis, vascular gland, and prostate. Also, we examined the total, normal motile sperm concentration, and the concentration of testicular catalase and peroxidase. Results : We found that the concentration of normal, motile sperm in the testes of the Panax Ginseng group showed a significant difference compared with the control group. The angiogenesis of the seminiferous tubule was increased and the increasement of the number of spermatogonia, primary and secondary spermatocyte was observed in the Panax Ginseng group through a microscope. The body weight, the weight of the testes, epididymis, prostate and the concentration of testicular catalase and peroxidase were higher in the Panax Ginseng group but showed no significant difference. Conclusion : This study shows that Panax Ginseng may have an effect on the morphology and motility of sperm, the important factor in male fertility, and can promote the concentration of antioxidants, catalase and peroxidase, which is the important factor in spermatogenesis.
In mammals, puberty is a process of acquiring reproductive competence, triggering by activation of hypothalamic kisspeptin (KiSS)-gonadotropin releasing hormone (GnRH) neuronal circuit. During peripubertal period, not only the external genitalia but the internal reproductive organs have to be matured in response to the hormonal signals from hypothalamic-pituitary-gonadal (H-P-G) axis. In the present study, we evaluated the maturation of male rat accessory sex organs during the peripubertal period using tissue weight measurement, histological analysis and RT-PCR assay. Male rats were sacrificed at 25, 30, 35, 40, 45, 50, and 70 postnatal days (PND). The rat accessory sex organs exhibited differential growth patterns compared to those of non-reproductive organs. The growth rate of the accessory sex organs were much higher than the those of non-reproductive organs. Also, the growth spurts occurred differentially even among the accessory sex organs; the order of prepubertal organ growth spurts is testis = epididymis > seminal vesicle = prostate. Histological study revealed that the presence of sperms in seminiferous tubules and epididymal ducts at day 50, indicating the puberty onset. The number of duct and the volume of duct in epididymis and prostate were inversely correlated during the experimental period. Our RT-PCR revealed that the levels of hypothalamic GnRH transcript were increased significantly on PND 40, suggesting the activation of hypothalamic GnRH pulse-generator before puberty onset. Studies on the peripubertal male accessory sex organs will provide useful references on the growth regulation mechanism which is differentially regulated during the period in androgen-sensitive organs. The detailed references will render easier development of endocrine disruption assay.
Objectives The object of this study was to evaluate the effect of Yikgeebohyul-tang aqueous extracts (YKBHT) on the propylthiouracil (PTU)-induced rat hypothyroidism. Methods The rats were divided into 6 groups : intact vehicle control, PTU control, LT4, YKBHT 500, 250 and 125 mg/kg treated groups. Hypothyroidism was induced by daily subcutaneous treatment of PTU 10 mg/kg for 28 days. YKBHT aqueous extracts were administered once a day as an oral dose of 500, 250 and 125 mg/kg for 42 days. The changes were observed : weight of body, thyroid gland, liver, testis, epididymis and prostate, serum thyroid hormone levels, serum male sex hormone levels, serum lipid profiles, liver and testis antioxidant system. These results were compared with LT4 0.5 mg/kg intraperitoneally treated rats. Results These PTU induced hypothyroidism and related hepatic and male reproductive organ damages were favorably and dose-dependently inhibited by treatment of YKBHT 500, 250 and 125 mg/kg, and YKBHT also effectively regulated the PTU-induced abnormal antioxidant defense factor changes in the both liver and testis. Although, LT4 also inhibited PTU-induced hypothyroidism and relative liver damages. But it deteriorated the hypothyroidism related testis, epididymis and prostate damages through testicular oxidative damages. Conclusions : The result of this study suggests that YKBHT has favorable effects on the hypothyroidism and related liver and reproductive organ damages with augmentation of antioxidant defense factor in the testis and liver. YKBHT 500, 250 and 125 mg/kg dose-dependently inhibited PTU-induced hypothyroidism and related liver and male reproductive organ damages in rats.
Ethane 1,2-dimethane sulfonate(EDS), a Leydig cell specific toxicant, has been widely used to create the reversible testosterone withdrawal rat model. Though the maintenance of epididymal structure and function is highly dependent on the testosterone secreted from testis, its derivatives, dihydroxytestosterone(DHT) and estrogen, might have crucial roles. The aim of present study was to monitor the expression patterns of sex steroid receptors, cytochrome P450 aromatase(P450arom) and $5{\alpha}$-reductase in the rat epididymis up to 7 weeks after EDS injection. Adult male rats($350{\sim}400g$) were injected with a single does of EDS(75 mg/kg i.p.) and sacrificed on weeks 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7. The transcriptional activities of the target genes were evaluated by semi-quantitative RT-PCRs. The transcript level of estrogen receptor alpha($ER{\alpha}$) in EDS group was significantly higher than control level on week 1(P<0.01). After week 2, there was no significant difference in $ER{\alpha}$ levels between EDS group and control. The transcript level of estrogen receptor beta($ER{\beta}$) in EDS group was significantly higher than control level on week 1(P<0.05), lowered on weeks 2 and 3(P<0.05 and P<0.01, respectively), fluctuated during weeks 4 and 6, and elevated on week 7(P<0.05). The androgen receptor (AR) message levels increased significantly week 2(P<0.01), then returned to control level on week 3. In contrast, expression of cytochrome P450 aromatase(P450arom) decreased sharply during weeks $1{\sim}3$(P<0.01 on weeks 1 and 2; P<0.05 on week 3), then went back to control level on week 4. The mRNA level of $5{\alpha}$-reductase type 2($5{\alpha}$-RT2) increased significantly on week 4(P<0.01), then returned to control level. The present study indicated that EDS administration could induce reversible alterations in the transcriptional activities of sex steroid hormone receptors and androgenconverting enzymes in rat epididymis. EDS injection model will be useful to clarify the regulation mechanism of mammalian epididymal physiology.
Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2001.05a
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pp.164-164
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2001
This study investigated expression pattern of PHGPx gene in male rat reproductive organs exposed to 17$\beta$-estradiol. First, in view of quantitative change, the exposure to 17$\beta$-estradiol for 1 week increased PHGPx mRNA level in testis and prostate. PHGPx mRNA level in epididymis decreased weakly as compared to control group.(omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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