The rat is an accepted model for studying human psychiatric/neurological disorders. We provide a protocol for total soluble protein extraction using trichloroacetic acid/acetone (TCA/A) from rat (female) whole brain, 10 brain regions and the pituitary gland, and show that two-dimensional gel electrophoresis (2-DGE) using precast immobilized pH (4-7) gradient (IPG) strip gels (13 cm) in the first dimension yields clean silver nitrate stained protein profiles. Though TCA/A precipitation may not be "ideal", the important choice here is the selection of an appropriate lysis buffer (LB) for solubilizing precipitated proteins. Our results reveal enrichment of protein spots by use of individual brain regions rather than whole brain, as well as the presence of differentially expressed spots in their proteomes. Thus individual brain regions provide improved protein coverage and are better suited for differential protein detection. Moreover, using a phosphoprotein-specific dye, ingel detection of phosphoproteins was demonstrated. Representative high-resolution silver nitrate stained proteome profiles of rat whole brain total soluble protein are presented. Shortcomings apart (failure to separate membrane proteins), gel-based proteomics remains a viable option, and 2-DGE is the method of choice for generating high-resolution proteome maps of rat brain and brain regions.
Objectives : This study was performed in order to evaluate the effects of Salviae Miltiorrhizae Radix (SMR) water extract against the cerebral hemorrhage and the blood-brain barrier (BBB) impairment in the intracerebral hemorrhage (ICH). Method : ICH was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type IV in Sprague-Dawley rats. SMR was orally given three times every 20 hours during 3 days after the ICH induction. Hematoma volume, water content of brain tissue and volume of evans blue leakage were examined. Myeloperoxidase (MPO) positive neutrophils and tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) were observed with immunofluorescence labeling and confocal microscope. Results : SMR significantly reduced the hematoma volume of the ICH-induced rat brain. SMR significantly reduced the water content of brain tissue of the ICH-induced rat brain. SMR reduced the percentage of the evans blue leakage around the hematoma on the caudate putamen compared to the ICH group, especially on the cerebral cortex. SMR significantly reduced the volume of the evans blue leakage level in the peri-hematoma regions of the ICH-induced rat brain. SMR significantly reduced MPO positive neutrophils in the peri-hematoma regions of the ICH-induced rat brain. SMR reduced the TNF-${\alpha}$ expression in peri-hematoma regions of the ICH-induced rat brain. TNF-${\alpha}$ immuno-labeled cells were coincided with MPO immuno-labeled neutrophils in peri-hematoma regions of the ICH-induced rat brain. Conclusion : These results suggest that SMR plays a protective role against the blood-brain barrier impairment in the ICH through suppression of inflammation in the rat brain tissues.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.259-259
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1994
Protein kinase C (PKC) participates in many cellular signal transduction. Previously we found that PKC activity of whole rat brain was altered after an exposure to cold temperature of 4 $^{\circ}C$ (Lee and Choi, Exp. Neurobiol., 2, 6, 1993). In this time PKC activity in each region of rat brain was investigated in order to know each regions is affected mostly by the stress.
Objects : This study was performed in order to evaluate the effects of Agrimoniae herba (AH) ethanol extract on intrastriatal hemorrhage (ISH). Method : ISH was induced by the stereotaxic intrastriatal injection of bacterial collagenase type IV in Sprague-Dawley rats. AH was orally given once a day for 3 days after ISH. Hematoma volume and percentage edema were examined. Immunohistochemistry was processed for iNOS, c-Fos, MMP-9, and MMP-12 expressions in the brain sections and each immuno-labeling were calculated with image analysis. Results : results are as follows; 1. AH reduced the hematoma volume and percentage edema of the ISH-induced rat brain. 2. AH swollen apoptotic bodies and neurons in the peri-hematoma regions of the ISH-induced rat brain. 3. AH significantly reduced c-Fos, MMP-9 and MMP-12 positive cells in the peri-hematoma regions of the ISH-induced rat brain. 4. AH swollen iNOS expressions in the peri-hematoma regions of the ISH-induced rat brain. Conclusion : These results suggest that AH plays an anti-apoptotic neuroprotective effect through control of ISH, suppression of c-Fos, and down-regulation of MMP-9 and MMP-12 expressions in the brain tissues.
The effects of monosodium glutamate (MSG) on the activities if tyrosine hydroxylase (TH), dopamine ${\beta}$-hydroxylase (DBH), tryptophan hydroxylase (TPH) and monoamine oxidase (MAO) in various regions (cerebral cortex, striatum, midbrain, pons and medulla of nat brain have been determined. It was observed that up to 1mM MSGhad no significant effects on the activities of brain tyrosine hydroxylase, dopamine ${\beta}$-hydroxylase, tryptophan hydroxylase and monoamine oxidase in all regions of rat brain. These results indicated that MSG itself exerted no direct effect on the important enzymes synthsizing and metabolizing the monoaminergic neuronal system.
Amount of lead burden in a tissue reflects poisoning of lead in that tissue, so is the removal of lead directly connected to curement of lead poisoning. The purpose of present study was to investigate the relative effects of penicillamine and thiamine tetrahydrofurfuryl disulfide (TTFD) or thiamine propyl disulfide (TPD) in the removal of lead from rat brain tissue treated with excessive lead. Wistar rat pups of both sexes were used in this experiment. Within 1 day of parturition, experimental mothers nursing their pups as well as rat pups were given drinking water containing 0.2% lead acetate, TTFD 20mg/1.2 L (2 mg/kg/day), TPD 20 mg/1.2 L (2mg/kg/day), penicillamine 40 mg/1.2 L (40 mg/kg/day), 0.2% lead acetate+TTFD 20mg/1.2 L (2 mg/kg/day), 0.2% lead acetate+ TPD 20 mg/1.2 L (2 mg/kg/day) or 0.2% lead acetate+ penicillamine 40 mg/1.2 L (40 mg/kg/day) ad libitum, throughout the entire period of experiment. Rat pups in the control group received normal tap water. The animals were sacrificed by decapitation on the day when they become 2 or 8 weeks of age. Brains were dissected into five regions: telencephalon, diencephalon, midbrain, pons/medulla and cerebellum. The dissected brain tissues were lyophillized and then solubilized by acid mixture (nitric acid + sulfuric acid). Lead levels in the solubilized brain tissues were measured by the inductively coupled plasma. In lead-exposed rats, lead levels were significantly higher than those of control group in all brain legions, lead levels in brain regions of TTFD or TPD group were generally lower than those of control group. The simultaneous administration of lead with TTFD or TPD to animals caused significant decrement of lead from all brain regions. In the elimination of lead from brain regions, effectiveness of TTFD or TPD was equivalant to penicillamine.
The present study investigated the protective effects of green tea against acute ethanol-induced lipid peroxidation and the change of antioxidative enzyme activities in various regions of rat brain : cortex, cerebellum, striatum and hippocampus. The following parameters were examined : malondialdehyde(MDA) levels and activities of superoxide dismutase(SOD), catalase and glutathione peroxidase(GSH-Px). Male Sprague-Dawley rats were given the experimental containing 1% green tea powder or control diet for 4 weeks, and at the end of feeding diet group received acute ethanol(5g/kg body weight) or equicaloric sucrose solution intragastrically. Green tea powder significantly decreased MDA levels in the striatum compared to control-non alcohol treated group to 1% green tea-non alcohol treated group without altering the antioxidative enzyme activities. Green tea resulted in a significant increase in GSH-Px activities in the hippocampus compared to either control-non alcohol treated group(0.043units/mg protein) or 1% green tea-non alcohol treated group(0.071units/mg protein). In conclusion, these results suggest that moderate consumption of green tea leaves can exert protective effects against ethanol-induced oxidative stress in brain regions, by reducing MDA concentrations in the striatum and enhancing GSH-Px activities in the hippocampus. (Korean J Nutrition 34(5) : 525∼531, 2001)
Present study investigates the protective effects of green tea against acute ethanol administration on lipid peroxidation and antioxidant system in various regions of rat brain ; cortex, cerebellum, striatum and hippofampus. The following parameters were examined : malondialdehyde(MDA) concentrations and activities of superoxide dismutase(SOD), catalase and glutathione peroxidase(GSH-Px). Male Sprague-Dawley rats of 9 month old were given control diets or those containing 1% green tea powder for 4 weeks, and at tole end of feeding each diet group was received acute ethanol(5g/kg body weight) or equicaloric sucrose solution administration. Results indicated that green tea powder significantly decreased malondialdehyde(MDA) levels in the striatum(81.85nmol/g tissue) and hippocampus(71.68nmol/g tissue), compared to control group(145.68nmol/g tissue in the striatum, 119.04nmol/g tissue in the hippocampus). Also, a significant decrease was observed in the striatum of green tea-ethanol treated group compared to control group. Green tea significantly blocked an ethanol-induced catalase activation in the hippocampus, which means an ethanol administration drew a significant increase only in control diet groups. In conclusion, these results suggest that moderate consumption of green tea leaves ctrl have protective effects against ethanol induced oxidative stress on various regions of rat brain, by significantly reducing MDA concentrations in the striatum and hippocampus and inhibiting ethanol induced catalase activation in the hippocampus.
This study was performed to investigate the effects of green tea or antioxidant vitamins on lipid peroxidation and antioxidant enzyme system in various regions of rat brain aged 9 and 12 months. Male Sprague-Dawley rats were raised on the experimental diets; 3% green tea powder diet, antioxidant vitamins diet containing the $\beta$-carotene, vitamin C, vitamin E in the level same as in the 3% green tea powder diet, and control diet far 3 weeks. We measured concentrations of malondialdehyde (MDA) and the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase, and glutathione peroxide (GSH-Px) in various brain regions such as cortex, cerebellum, striatum, and hippocampus. Green tea powder or antioxidant vitamin supplementation decreased MDA concentrations in the striatum and the hippocampus, and increased SOB activities in the striatum, and GSH-Px activities in the cortex. There was no significant difference in the observed antioxidative effects between the green tea powder and antioxidant vitamin supplementation. A significant difference between 9 month- and 12 month-old rats was found in MDA concentrations and GSH-Px activities in all brain regions. These results suggest that green tea powder can have protective effects on various regions of rat brain and that these effects on lipid peroxidation and antioxidant enzymes are different by age. In inhibiting lipid peroxidation, there was no difference between green tea powder and antioxidant vitamins.
The heterotrimeric G protein subunits (G ) are region-specifically expressed in brain such as hypothalamus and pituitary gland in abundant, suggesting that is may be associated with “stress-axis”. This study was designed to examine the effect of stress on the region-specific expression of various G subunits in rat brain. The localization of mRNAs encoding seven of G and striking region-specific patterns of expression were observed in 12 different regions of both non-stressed and stressed rat brain; (1) frontal cortex area, (2) cerebral cortex area, (3) striatum, (4) hippocampus area, (5) thalamus, (6) brain stem, (7) cerebellum area, (8) hypothalamus, (9) septum, (10) amygdala, (11) preoptic area, and (12) pituitary gland. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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