A new heat shock protein 70 was identified in red-spotted grouper (Epinephelus akaara) based on an expression analysis. The cDNA of red-spotted grouper Hsp70 (designated RgHsp70) was cloned by the rapid amplification of cDNA ends (RACE) techniques. The full-length of RgHsp70 cDNA was 2,152 bp, consisting of a 5'-terminal untranslated region (UTR) of 105 bp, a 3'-terminal UTR of 274 bp, and an open reading frame (ORF) of 1,773 bp that encode a polypeptide of 590 amino acids with a theoretical molecular weight of 64.9 kDa and an estimated isoelectric point of 5.2. Multiple alignment and phylogenetic analyses revealed that the RgHsp70 gene shares a high similarity with other Hsp70 fish genes. RgHsp70 contained all three classical Hsp70 family signatures. The results indicated the RgHsp70 is a member of the heat shock protein 70 family. RgHsp70 mRNA was predominately expressed in the liver, with reduced expression noted in the head-kidney tissues. The expression analysis of different water temperatures (21, 18, 15 and $12^{\circ}C$) for sampled livers revealed that expression gradually increased at $12^{\circ}C$ compared to $21^{\circ}C$. In this study, the effects of water temperature lowering on the physiological conditions were investigated, and the results revealed that novel RgHsp70 may be an important molecule involved in stress responses.
This study aims to compare the word decoding skills, phonological awareness (PA), rapid automatized naming (RAN) skills, and letter knowledge of first graders with developmental dyslexia (DD) and those who were typically developing (TD). Eighteen children with DD and eighteen TD children, matched by nonverbal intelligence and discourse ability, participated in the study. Word decoding of Korean language-based reading assessment(Pae et al., 2015) was conducted. Phoneme-grapheme correspondent words were analyzed according to whether the word has meaning, whether the syllable has a final consonant, and the position of the grapheme in the syllable. Letter knowledge asked about the names and sounds of 12 consonants and 6 vowels. The children's PA of word, syllable, body-coda, and phoneme blending was tested. Object and letter RAN was measured in seconds. The decoding difficulty of non-words was more noticeable in the DD group than in the TD one. The TD children read the syllable initial and syllable final position with 99% correctness. Children with DD read with 80% and 82% correctness, respectively. In addition, the DD group had more difficulty in decoding words with two patchims when compared with the TD one. The DD group read only 57% of words with two patchims correctly, while the TD one read 91% correctly. There were significant differences in body-coda PA, phoneme level PA, letter RAN, object RAN, and letter-sound knowledge between the two groups. This study confirms the existence of Korean developmental dyslexics, and the urgent need for the inclusion of a Korean-specific phonics approach in the education system.
We cloned the complete cDNA of the ${\beta}-bubulin$ from the soft coral, Scleronephthya gracillimum $(K\ddot{u}kenthal)$ (Alcyonacea, Octocorallia, Anthozoa, Cnidaria), via the random sequencing of a cDNA library and the 5'-rapid amplification of cDNA end (RACE) technique. The full-length cDNA of the S. gracillimum ${\beta}-tubulin$ comprised 1541 bp, not including the poly $A^+$ stretch, also contained a complete open reading frame, which codes for a total of 445 amino acids. The amino acid residues 16402 appeared to be in a state of conservation in a variety of animals. Northern blot analysis clearly demonstrated that the sequence we have obtained is, indeed, the full-length cDNA of the ${\beta}-bubulin$ gene in S. gracillimum.
The complete coding sequence of Wild Argali ISG15 cDNA was generated by rapid amplification of cDNA ends. The ISG15 cDNA was 642 bp with an open reading frame of 474 bp, which encoded a 17.47 kDa protein composed of 157 amino acids. Its amino acid sequence shared 97.9%, 80.8%, 91.4%, 94.3%, 78.3% identity with those of ISG15cDNA from Ovis aries (accession no. NM001009735.1), Capra hircus (accession no. HQ329186.1), Bos taurus (accession no. BC102318.1), Bubalus bubalis (accession no. HM543269.1), and Sus scrofa (accession no. EU647216.1), respectively. The entire coding sequence was inserted into the pET-28a vector and expressed in E. coli. The recombinant protein corresponded to the expected molecular mass of 25 kDa as judged by SDS-PAGE, and it was detected in the bacterial inclusion bodies. The expressed protein could be purified by $Ni^{2+}$ chelate affinity chromatography and the results from the lymphocyte proliferation test showed that the product could stimulate lymphocyte proliferation very well (p<0.05), which further confirmed its biological activity.
Kim, Won-Ho;Cho, Kyoung-Won;Jung, In-Su;Choi, Keum-Hwa;Hur, Byung-Ki;Kim, Geun-Joong
한국생물공학회:학술대회논문집
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2003.10a
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pp.815-820
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2003
A huge database resulted from whole genome sequencing has provided a possibility of new information that is likely to extent the scope and thus changes the way of approach for the functional assigning of putative open reading frames annotated by whole genome sequence analyses. These are mainly realized by ease, one-step identification of putative genes using genomics or proteomics tools. A major challenge remained in biotechnology may translate these informations into better ways to screen or select a gene as a representative sequence. Further attempts to mine the related whole genes or partial DNA fragment from whole genome treasure, and then the incorporation of these sequences into a representative template, will result in the use of putative genes that can be translated into functional proteins or allowed the generation of new lineages as a valuable pool. Such screens enable rapid biochemical analysis and easy isolation of the target activity, thereby accelerating the screening of novel enzymes from the expanded library with related sequences. Information-based PCR amplification of whole genes and reconstitution of functional DNA fragments will provide a platform for expanding the functional spaces of potential enzymes, especially when used mixed- or metagenome as gene resources.
The enzyme invertase contributes to sugar unloading, pathogen defense, differentiation and development in plants. We cloned the complete cDNA of a soluble acid invertase from pea seedlings (Pisum sativum) via RT-PCR and the rapid amplification of the cDNA end (RACE) technique. The full-length cDNA of the soluble pea invertase comprised 2237 bp and contained a complete open reading frame encoding 647 amino acids. The deduced amino acid sequence showed high homology to soluble acid invertases from various plants. Northern blot analysis demonstrated the soluble acid invertase gene of P. sativum was strongly expressed in sink organs such as shoot tips and root tips, and induced by abscisic acid, gibberellic acid and jasmonic acid in shoots. Especially, gibberellic acid enhanced the gene expression of the soluble acid invertase in a time-dependent manner. This study presents that the gene expression patterns of a soluble acid invertase from pea are strongly consistent with the suggestion that individual invertase gene product has different functions in the growing plant.
Because of today's rapid growth of digital contents market and many benefits of electronic book, many people have considerable interest in E-book. Furthermore multifarious consortiums take an active part in standardization of I-book, and many E-book tools have been provided by software manufactures all over the world. E-book tools include editor for production of E-Book, viewer for reading, and the like. Especially in E-book viewer, annotation function has to be Included to put arrangement, summation, recording, comment, emphasis and after comprehension to practical use. In this paper, a E-book viewer with annotation is designed according to the specifications of EBKS, Korean standard. The proposed viewer is aimed to implement in PDA with embedded Linux, but developed in Windows 2000 platform. Because development environment and application environment are different each other, Qt-Library and cross-compiler are used for cross-platform development. The viewer support various functions such as adjusting of font size, hypertext linking, retrieval of specific word, and so forth. And in addition to these basic functions, annotation function is designed for the viewer, which can be used for re-usage and sharing of important information.
Pham, Anh Tuan;Park, Nam-Il;Kim, Haeng-Hoon;Park, Sang-Un
Korean Journal of Agricultural Science
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v.37
no.3
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pp.367-371
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2010
Farnesyl diphosphate synthase (FPS) catalyzes the biosynthesis of farnesyl diphosphate, a precursor for many important terpenoid products. A cDNA encoding FPS was first isolated from Allium sativum (AsFPS) using rapid amplification of cDNA ends (RACE) PCR. The sequence of AsFPS contains an open reading frame encoding a protein of 341 amino acids with a predicted molecular mass of 39.61 kDa. Alignment of AsFPS deduced amino acid revealed high identities with other plants ranging from 79% to 85% and showed 2-high conserved aspartate-rich motifs known to be important for FPS activity. Furthermore, AsFPS expression was stronger in the green organs such as bulbils, scapes, leaves, stems, but weaker in bulbs and roots than on-green organs of A. sativum.
The phenomenon of vocal vibrato may be regarded as an acoustic representation of one of the most rapid and continuous changes in pitch and intensity that the human vocal mechanism is capable of producing. Singers are likely to use vibrato effectively to enrich their voice. The purpose of this study was to obtain acoustic measurements (vF0 and vAm) of 45 subjects (15 trot and 15 ballad singers and 15 non-singers) and to compare acoustic measurements of the vowel /a/ produced by 3 groups on 2 voice sampling conditions (prolongation and singing of /a/). Thirty singers of trot and ballad were selected by a producer and a concert director working for the KBS (Korean Broadcasting System). The MDVP was used to measure the acoustic parameters. A two-way MANOVA was used for statistical analyses. The results were as follows; Firstly, there was no significant difference among the 3 groups in vF0 and vAm in prolongation of /a/, but in singing voice, there was a significant difference among 3 groups in vF0 and vAm. Secondly, there was an interaction between music genre and voice sampling condition in vF0, and vAm. Finally, trot singers sing with more vibrato than ballad singers. It was concluded that it is very important to analyze singers' voice including various voice conditions (prolongation, reading, conversation, and singing) and to identify differences of singing voice characteristics among music genre.
A cDNA clone encoding a MDR-like ABC transporter protein was isolated from Brassica rapa seedlings, through rapid amplification of cDNA ends (RACE). This gene (named as Brmdr 1; GenBank accession no.: DQ296184 ) had a total length of 4222 bp with an open reading frame of 3900 bp, and encoded a predicted polypeptide of 1300 amino acids with a molecular weight of 143.1 kDa. The BrMDR1 protein shared 71.0, 62.5, 60.0 and 58.2% identity with other MDR proteins isolated from Arabidopsis thaliana (AAN28720), Coptis japonica (CjMDR), Gossypium hirsutum (GhMDR) and Triticum aestivum (TaMDR) at amino acid level, respectively. Southern blot analysis showed that Brmdr1 was a low-copy gene. Expression pattern analysis revealed that Brmdr1 constitutively expressed in the root, stem petals and stamens, but with lower expression in leaves and open flowers. The domains analysis showed that BrMDR1 protein possessed two transmembrane domains (TMDs) and two nucleotide binding domains (NBDs) arranging in "TMD1-NBD1-TMD2-NBD2" direction, which is consistent with other MDR transporters. Within NBDs three characteristic motifs common to all ABC transporters, "Walker A", "Walker B" and C motif, were found. These results indicate that BrMDR1 is a MDR-like ABC transporter protein that may be involved in the transport and accumulation of secondary metabolites.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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