• 제목/요약/키워드: random amplified polymorphic DNA(RAPD)

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Isozyme Polymorphism 및 Random Amplified Polymorphic DNA(RAPD) Pattern에 의한 표고 버섯 품종간 비교 (Differentiation of Lentinus edodes Isolates in Korea by Isozyme Polymorphisms and Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Analysis)

  • 박원목;고한규;박노조;홍기성;김규현
    • 한국균학회지
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    • 제25권3호통권82호
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    • pp.176-190
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    • 1997
  • Isozyme PAGE에 의한 isozyme polymorphism 및 random amplified polymorphic DNA(RAPD) pattern의 비교를 통하여 한국에서 수집된 63개의 표고 버섯(Lentinus edodes)품종의 유연관계를 조사하여 보았다. NTSYS PC program을 통하여 비교에 사용되어진 3가지 isozyme 즉 esterase, peroxidase, acid phophatase 등은 각각 10, 7, 3개의 isozyme polymorphism type으로 나뉘어질 수 있었고, 이러한 3개의 isozyme type들은 group-average method를 이용하여 최종적으로 6개의 집단으로 구분되어질 수 있었다. 또한 RAPD를 통한 표고 품종간 유연관계 비교는 사용되어진 총 20개의 random primer 들중 3개의 primer(OPA 03, OPA 18, OPA 19)가 품종간 polymorphism을 보였고 사용되어진 전체 random primer의 PCR product들의 집단 분석을 통해 최종적으로 5개의 집단으로 구분할 수 있었다. 사용되어진 두 가지 방법 즉, isozyme polymorphism및 RAPD pattern에 의해 구분되어진 63개 표고 버섯 품종의 subgroup level에서의 절대적인 유사성은 관찰할 수 없었다. Yii-Mattila(1996) 등에 의하면 품종간 비교시 isozyme analyses에서와는 달리 RAPD analyses에서는 많은 수의 strain-specific band들이 얻어질 수 있고 이것이 두 방법간의 유사성을 관찰하지 못하게 하는 원인이라고 보고하였다.

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RAPD marker를 이용한 참돔 집단의 유전적 특성 분석

  • 장요순;노충환;홍경표;명정구;김종만
    • 한국양식학회:학술대회논문집
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    • 한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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    • pp.34-34
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    • 2003
  • 한국산 선발계통 및 일본산 양식계통과 이들 두 계통간 잡종 참돔 집단의 유전적 특성을 분석하기 위하여, RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) marker를 탐색하였다. 10개의 염기로 이루어진 200개의 random primer 분석을 통하여 polymorphic pattern을 나타내는 23개의 random primer를 선발하였으며, 각 primer의 재현성을 확인하였다. 이들 중 OPA-11 primer는 크기가 각각 600 bp, 650 bp 및 750 bp 인 3개의 DNA 단편에 의하여 4개의 genotype을 나타냈으며, 각 genotype의 빈도는 집단간차이를 보였고, 한국산 선발계통 집단에서는 4개의 genotype이 모두 발견되는 반면, 일본산 양식계통 및 일본산 양식계통을 포함한 교배집단에서는 특정 genotype만 발견되었다. OPA-11 primer 유래의 polymorphic DNA 단편을 cloning하고 염기서열을 결정하였으며, SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) primer를 제작하고 분석하였다. 본 연구는 참돔집단의 유전적 특성 파악 및 집단 구별에 RAPD marker를 활용하였으며, 참돔 육종시 형질 및 기능관련 DNA marker 탐색에 적용하기 위하여, 이후의 연구에서는 SCAR과 RFLP 분석에 RAPD marker를 이용하여 100% 정확도를 갖는 RFLP maker를 찾고, MAS (Marker-Assisted Selection)에 적용하고자 한다.

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Construction of a Genetic Linkage Map of Shiitake Mushroom Lentinula Edodes Strain L-54

  • Hoi-Shan, Kwan;Hai-Lou, Xu
    • BMB Reports
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    • 제35권5호
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    • pp.465-471
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    • 2002
  • From fruiting bodies of L. edodes strain L-54, single-spore isolates (SSIs) were collected. Two parental types of L-54 were regenerated via monokaryotization. By means of random-amplified polymorphic DNA (RAPD), DNA samples from L-54, its two parental types, and 32 SSIs were amplified with arbitrary primers. Dedikaryotization was demonstrated, and 91 RAPD-based molecular markers were generated. RAPD markers that were segregated at a 1:1 ratio were used to construct a linkage map of L. edodes. This RAPD-linkage map greatly enhanced the mapping of other inheritable and stable markers [such as those that are linked to a phenotype (the mating type), a known gene (priA) and a sequenced DNA fragment (MAT)] with the aid of mating tests, bulked-segregant analysis, and PCR-single-strand conformational polymorphism. These markers comprised a genetic map of L. edodes with 14 linkage groups and a total length of 622.4 cM.

RAPD를 이용한 고추(Capsicum annuum) 유전자원의 분류 (Classification of Capsicum annuum Germplasm Using Random Amplified Polymorphic DNA)

  • 남승현;최근원;유일웅
    • 원예과학기술지
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    • 제16권4호
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    • pp.503-507
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    • 1998
  • 본 연구는 RAPD표지를 이용하여 국내외에서 수집된 고추 유전자원들간의 유전적관계를 평가하고자 수행되었다. Random primer를 이용한 고추의 PCR반응은 $MgCl_2$ 3mM, Taq. DNA polymerase 1.5U, 주형 DNA 10ng, dNTPs $200{\mu}M$, random primer 200nM 그리고 $42^{\circ}C$의 annealing 온도조건으로 최적화하였다. 80개의 random primer로부터 높은 밴드선명도와 재현성을 보이는 16개가 선발되었으며 70%의 GC함량을 갖는 primer들이 GC함량이 60%인 것보다 DNA증폭에 있어 효과적이었다. 31개의 고추품종및 계통들에 대해 71개의 polymorphic밴드와 22개의 monomorphic밴드를 포함하는 총 93개의 DNA밴드가 선발된 16개의 random primer들로부터 형성되었다. Primer당 약 4.4개의 polymorphic밴드가 형성되었다. 이들 71개의 polymorphic밴드를 이용하여 유사도지수가 구해졌으며 이를 근거로 31고추 계통 또는 품종들을 뚜렷이 구분하는 dendrogram이 작성되었다.

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Genetic Distance Study among Deoni Breed of Cattle Using Random Amplified DNA Markers

  • Appannavar, M.M.;Govindaiah, M.G.;Ramesha, K.P.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제16권3호
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    • pp.315-319
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    • 2003
  • Random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis was done with 19 oligonucleotide primers to study genetic similarities and divergence among different types of Deoni breed of cattle viz., Balankya, Wannera and Waghya. Six random primers produced low to high numbers of polymorphic bands between pooled DNA of different Deoni types. Of the 48 RAPD markers obtained 33 were common to all Deoni types, 3 were individual specific and 12 were polymorphic for different Deoni types. The mean average percentage difference values among Deoni types showed that Balankya and Wannera had less genetic divergence when compared to Waghya.

RAPD 및 약제저항성을 이용한 감귤 검은점무늬병균의 유전적 다양성 분석 (Genetic Diversity of Phomopsis citri with Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) and Fungicide Resistance)

  • 고영진;서정규;이태선;송장훈;권혁모;문덕영;문두길;한해룡
    • 한국식물병리학회지
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    • 제14권2호
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    • pp.171-176
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    • 1998
  • Gentic diversity of 42 isolates of Phomopsis citri was analyzed with random amplified polymorphic DNA(RAPD) and fungicide resistance. RAPD profiles of genomic DNA of the isolates of P. citri and the degrees of their resistance to the fungicides mancozeb and propineb suggested the occurrence of genetic differentiation of P. citri distributed in Cheju. The isolates showed genetically diverse RAPD profiles according to the host species collected even from the same collection site and also according to the geographic origin collected even from the same host species. High levels of resistance to fungicides mancozeb and propineb were observed among the isolates of P. citri. However, there was no correlation between RAPD profiles of genomic DNA and levels of fungicide resistance of the isolates, suggesting that fungicide resistance of P. citri occurred irrespective of the host and geographic origin.

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Random Amplified Polymorphic DNA Analysis for Typing Extended-Spectrum-β-Lactamase of Klebsiella pneumoniae

  • Yang, Byoung-Seon
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제37권3호
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    • pp.149-154
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    • 2005
  • 대학병원의 임상검체에서 extended-spectrum-${\beta}$-lactamase (ESBL)생성 Klebsiella pneumoniae 51균주를 분리하였다. ESBL생성 K. pneumoniae 51균주는 광범위한 항생제에 내성을 보였고 대부분의 균주는 amikacin, gentamycin과 ciprofloxacin항생제에 내성을 나타내었다. 대학병원에서 분리한 51균주를 randomly amplified polymorphic DNA (RAPD)로 분석한 결과 충남대학병원 21균주와 충북대학병원에서 분리한 10균주는 Ia 와 Ib에 속하였고 경상대학 병원에서 분리한 20균주는 IIa, IIb에 속하였다. ESBL 생성 K. pneumoniae 51균주는 RAPD 분석으로 4가지의 유전형으로 구분 할 수 있었고 유전적으로 다양하였다. 이상의 결과로 RAPD 분석은 유전형분석에 빠르고 단순하고 경제적인 방법임을 알 수 있었다.

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Genetic Variability Based on Randomly Amplified Polymorphic DNA in Kacip Fatimah (Labisia pumila Benth & Hook f) collected from Melaka and Negeri Sembilan States of Malaysia

  • Bhore, Subhash J.;Nurul, A.H.;Shah, Farida H.
    • Journal of Forest and Environmental Science
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    • 제25권2호
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    • pp.93-100
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    • 2009
  • In Malaysia, Labisia pumila Benth & Hook f, popularly known as 'Kacip Fatimah' has been used traditionally to treat various elements of the woman's health in Malay community. The objective of this study was to develop randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) based DNA markers for the identification of L. pumila and to distinguish its three varieties from each other. Total DNA from nine accessions of L. pumila was extracted by CTAB method and polymerase chain reactions (PCR) were carried out to amplify the segments of DNA using different primers to develop DNA barcode using RAPD technique. To find out variety-specific DNA marker/s, twenty different 10-mer primer sequences with annealing temperature from 36-$40^{\circ}C$ were evaluated in triplicate. Out of 20 random primers, two primers (OPA-1 and OPA-2/A10) were selected which produced reliable RAPD band patterns. To have DNA based handle, two RAPD amplification products were cloned and sequenced to determine the identity of the DNA. RAPD analysis using two random primers generated 72 discrete bands ranging in size 200 bp-3,000 bp. Fifty nine of these were polymorphic loci (82%) and thirteen were non-polymorphic loci (18%). A total of 32 bands polymorphic loci (72%) were amplified with primer OPA-1 and analyzed by cluster analysis and UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic) to present a dendogram depicting the degree of genetic relationship among nine accessions of L. pumila. Our results shows the reasonable genetic diversity among the L. pumila varieties and within varieties; and two RAPD marker sequences obtained could be used to identify L. pumila at species level.

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멸종위기 희귀식물인 갯방풍 자생지별 유전변이 및 유전적 다양성 연구 (Geographical Variation and Genetic Diversity of Glhenia littoralis Fr. Schmidt et Miquel based on the Analysis of Internal Transcribed Spacer(ITS) sequence and Random Amplified Polymorphic DNA(RAPD))

  • 문병철;추병길;지윤의;윤택숙;김호경
    • 한국한의학연구원논문집
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    • 제14권3호
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    • pp.49-56
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    • 2008
  • Glehnia littoralis Fr. Schmidt et Miquel is an important medicinal plants in East Asian countries. This plant species naturally distributed in Korea, Japan, China, and Taiwan, but it is a rare plants living in the coastal dune in Korea. To investigate the genetic variation, genetic diversity and genetic evolutionary relationships of 14 different geographical G. littoralis, ITS sequence and random amplified polymorphic DNA (RAPD) were analyzed. On the basis of ITS sequences, it was clearly showed that the ITS1 and ITS2 sequences among 14 populations are identical regardless of geographical origin excepting 2 bp in pair-wise comparison of ITS1. Furthermore, RAPD results also showed that 14 different geographical G. littoralis produce various polymorphic patterns without critical relationship among neighboring regions. These combined results suggest that the geographical variation and genetic evolution of G. littoralis is stable and provide important information on genetic diversity, and conservation of this rare plant species in situ and ex situ.

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PCR-RAPD 기법에 의한 무지개송어 Genome DNA 의 다형현상 (Genomic Polymorphisms of Genome DNA by Polymerase Chain Reaction-RAPD Analysis Using Arbitrary Primers in Rainbow Trout)

  • Yoon, J.M.
    • 한국가축번식학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.303-311
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    • 1999
  • 본 연구는 정자세포로부터 분리된 genome 내 DNA를 PCR 기법으로 증폭시킨 후 random amplified polymorphic DNA(RAPD) 분석을 통해 무지개송어의 품종 내 유전적 특성과 변이성을 해석하고 품종의 특이 유전적 표지를 개발하기 위해서 수행되었다. 20 종류의 primer를 사용하여 RAPD 양상을 검색한 후 다형현상의 출현빈도와 band 수에 기초하여 이들 중 6개의 primer를 선정하여 이용하였다. 그 중에 4개의 primer는 17개의 RAPD marker를 나타내었고, 그중 primer 당 8개인 48개 (28%)의 band 가 다형성을 보여주었다. 6개의 primer 중 4개는 개체들 사이에 다형성을 나타내는 band를 나타내었다. Bandsharing 의 경우 연어와 비교될 만큼 무지개송어는 3개의 특이적인 DNA marker를 가지고 있었다 (2.3. 2.0 및 1.3kb). 같은 무작위 primer를 이용해서 나타난 개별적인 band는 단일 primer 가 무지개송어의 정자핵 DNA의 경우 적어도 3개의 독립적인 genome 내 다형성을 탐지해 낼 수 있다는 것을 제시하고 있다. 이러한 primer에 의해서 나타난 RAPD 다형성은 개체식별을 위한 유전적 표지인자로서 사용될 수 있는 가능성을 제시하였으며, RAPD-PCR은 많은 어종에서 다형현상을 밝혀내는 기술이라 할 수 있다. 본 연구는 RAPD marker가 풍부하고 재현성이 있으며 RAPD 다형성을 지닌 marker를 사용하여 이러한 중요한 양식대상어종에서 미래의 gene mapping과 MAS 를 위한 기초를 제공해 줄 수 있다. RAPD 다형성은 어류의 품종 분화를 위한 유전적 표지로서 유용한 것으로 결론지을 수 있을 것이다.

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