Molecular cloning was carried out on the Danish strain of bovine viral diarrhea virus(BVDV) to construct strategy for the diagnostic tools and effective vaccine of BVD afterwards. A recombinant DNA clone(No. 29) was established successfully from cDNA for viral RNA tailed with adenine homopolymer at 3'-end. $^{32}P$-labeled DNA probes of 300~1,800bp fragments, originating from the clone 29, directed specific DNA-RNA hybridization results with BVDV RNA. Recombinant DNA of the clone 29 was about 5,200bp representing 41.6% of the full length of Danish strain's RNA, and restriction sites were recognized for EcoR I, Sst I, Hin d III and Pst I restriction enzymes in the DNA fragment.
A bacterium KL-57 which exhibited biosurfactant activity was isolated. This bacterium was identified as Bacillus subtilis. The biosurfactant-producing gene of B. subtilis KL-57 was cloned into R subtilis MI113 by using plasmid pTB523. The plasmid DNA from the clone was found to carry a 18 kb PstI insert. The biosurfactant-producing gene was cleaved into 4 fragments by SmaI, 3 fragments by PvulI or EcoRl, 4 fragments by PvulI and EcoRI double digestion, 5 fragments by AccI, and 2 fragments by KpnI, HindIII or BamHI. By subcloning the 18 kb Pstl insert, a 2.3 kb EcoRl fragment conferred the biosurfactant producing activity on B. subtilis cells. The 2.3 kb had one HindIII cleave site. But Two fragments, which corresponds HindIII/EcoRl termini, exhibited no biosurfactant activity.
We present here, some of the studies carried for estimation of rainfall over land and oceanic regions in and around South Korea. We use active and passive microwave measurements from TRMM ? TMI and Precipitation Radar (PR) respectively during a typhoon even named ? RUSA that took place during 30 Aug. 2002. We have followed due approach by Yao at. all (2002) and examined the performance of their algorithm using two main predictor variable, named as Scattering Index (SI) and Polarization Corrected Brightness Temperature (PCT) while using TMI data. The rainfall fnus estimated using PST and SI shows some Underestimation as compared to the 2A25 rainfall products from the PR in common area of overlap. A larger database thus would be used in future. To establish a new rain rate algorithm over Korean region based on the present case study.
Hypertension is a complex disease with strong genetic influences. Essential hypertension has been shown to be associated with insulin resistance. To clarify the genetic basis of insulin resistance in Hypertension, case-control association studies were performed to examine candidate genes for insulin resistance in hypertension. Polymorphisms investigated were the BstO I polymorphism of the $\beta$3-adrenergic receptor (ADRB3) gene, the Xba I Polymorphism of the glycogen synthase (GSY) gene, the Dde I polymorphism of the protein phosphatase 1 G subuit (PP1G) gene, the BstE II polymorphism of the glucagon receptor (GCG-R) gene, the Pst 1 polymorphism of the insulin (INS) gene and the Acc I polymorphism of the glucokinase (GCK) gene. No significant differences were observed in the distribution of alleles and genotypes of the ADRB3, GSY PP1G, GCG-R, INS, and GCK genes between hypertensive and normotensive groups. Although the frequencies in each of these polymorphisms were not significantly different between essential hypertensive and normotensive individuals, our results may provide additional information for linkage analysis and associative studies of disorders in carbohydrate metabolism or in cardiovascular disease.
Objectives: Outdoor workers are exposed to thermally stressful work environments. In this study, heat stress indices for harbor workers in summer were calculated to evaluate thermal comfort based on a human heat balance model. These indices are Physiological Subjective Temperature (PST), Dehydration Risk (DhR), and Overheating Risk (OhR) according to respective stage of cargo work in a harbor. In addition, we constructed a forecast system to provide heat stress information. Methods: Thermophysiological indices in this study were calculated using the MENEX model (i.e. the human heat balance model), which used as inputs the meteorological parameters, clothing insulation, and metabolic rate for each stage of cargo work in the harbor of Masan over the course of seven days, including a four-day heat wave. The forecast heat stress information constructed for Masan harbor was based on meteorological data supported by the Dong-Nae Forecast from the KMA (Korea Metrological Administration) and other input parameters. Results: According to higher metabolic rate, thermophysiological indices showed a critical level. In particular, PST was evaluated as reaching the 'Very hot' or 'Hot' level during all seven days, despite the heat occurring over only four. It is important in a regard to consider the work environment conditions (i.e. labor intensity and clothing in harbor). On a webpage, the forecast thermophysiological indices show as infographics to be easily understand. This webpage is comprised of indices for both current conditions and the forecast, with brief guidance. Conclusion: Thermophysiological indices show the risk level to health during a heat wave period. Heat stress information could help to protect the health of harbor workers. Further, this study could extend the applicability of these indices to a variety of outdoor workers in consideration of work environments.
Expression of the baculovirus major envelope glycoprotein gene(gp64) is regulated by transcription from botha early and late promoters. To develop a transient expression vector under the control of gp64 gene promoter, the gp64 gene of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus-K1(BmNPV-K1) was characterized. The gp64 gene was local-ized at EcoR I-Pst I 7.38-kb fragment of the BmNPV-K1 genome. The EcorR 1-Pst I 7.38-kb fragment was cloned and the nucleotide sequence of 2,277 bases including the coding region of gp64 gene was determined. Based on these results, transient expression vector using gp64 gene promoter was constructed and named as pBm64. E.coli lacZ gene was introduced onto pBm64 as a reporter gene and expressed transiently in B. mori 5(Bm 5) cells. The expression vector transfected into the cells was maintained stably for 1 to 5 days. In order to confirm the expression of the reporter gene by gp64 promoter, recombinant virus was constructed. The recombinant virus has two independent transcription units in opposite orientations with two promoters; gp64 and polyhedrin gene promoters each initiating transcription of $\beta$-galactosidase and polyhedrin, respectively. Polyhedra formation and expression of $\beta$-galactosidase in Bm5 cells infected with the recombinant virus were observed with phase contrast microscope and in situ staining.
Mitochondrial DNA(mt DNA) of Mammalian is the circular one which the 16.5K base pairs and show the maternal inheritance. Evolutional speed of nucleotide sequence is very fast. So that polymorphic analysis of mt DNA provide the useful informations to investigate the genetic relations of interspecies. Authors trials were focussed to compare with the polymorphic differences of mitochondrial DNA between Jindo and Japanese mongrel dogs. DNA was extracted from bloods of 21 head of Jindo dogs and 20 head of Japanese dogs and isolated using 10 kinds of restriction endonucleases(Apa I, BamH I, Bgl II, EcoR I, EcoR V, Hinc II. Hind III, Pst I, Sty I, Xba I) and then separated by the agarose gel electrophoresis. After sourthern blotting hybridization was completed using the mtDNA of Japanese mongrel dogs as a probe. Autoradiography was used to compare the polymorphism of mtDNA both dogs. The results obtained were as follows; 1. mt DNA of Jindo dog showed polymorphism resulting cleavage with four kinds of restriction endonuclease, Apa I, EcoR V, Hinc II, Sty I. While in the Japanese mongrel dogs observed the polymorphism in the five kinds of restriction endonuclease supplemented with EcoR I. 2. Compared with both dogs the frequency differences of DNA polymorphism were recognized in the specific restriction endonuclease Apa I. Consequently in the restriction endonuclease Apa I both dogs classified with three types as A, B, C however in the Jindo dogs frequency of C type was 71.5 percent but in Japanese mongrel dogs observed 45 percent in the A type. 3. DNA polymorphism obtained from the use of five kinds of restriction endonuclease were classified with seven types. In Jindo dogs frequency was highest in the type 6 as 71.4 percent but in the Japanese mongrel dogs showed 35 percent in the type 5. 4. Genetic distances calculated by NEI method showed 0.0089 in Jindo dogs and was 0.0094 in the Japanese mongrel dogs.
A gene, $phbC_{2.4.1}$ encoding poly-3-hydroxybutyric acid (PHB) synthase of Rhodobacter sphaeroides 2.4.1 was cloned by employing heterologous expression in Escherichia coli. R. sphaeroides chromosomal DNA partially digested with MboI was cloned in pUC19 followed by mobilization into E. coli harbouring $phbA,B_{AC}$ in pRK415, which code for ${\beta}$-ketothiolase and acetoacetyl CoA reductase of Alcaligenes eutrophus, respectively. Two E. coli clones carrying R. sphaeroides chromosomal fragment of $phbC_{2.4.1}$ in pUC19 were selected from ca. 10,000 colonies. The PHB-producing colonies had an opaque white appearance due to the intracellular accumulation of PHB. The structure of PHB produced by the recombinant E. coli as well as from R. sphaeroides 2.4.1 was confirmed by [$H^{+}$]-nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. Restriction analysis of the two pUC19 clones revealed that one insert DNA fragment is contained as a part of the other cloned fragment. An open reading frame of 601 amino acids of $phbC_{2.4.1}$ with approximate M.W. of 66 kDa was found from nucleotide sequence determination of the 2.8-kb SaiI-PstI restriction endonuclease fragment which had been narrowed down to support PHB synthesis through heterologous expression in the E. coli harbouring $phbA,B_{AC}$. The promoter (s) of the $phbC_{2.4.1}$ were localized within a 340-bp DNA region upstream of the $phbC_{2.4.1}$ start codon according to heterologous expression analysis.
Objectives: The purpose of this study is to investigate the usefulness of psychological measurements in depression symptoms as compared with non-depressions and hwabyung. Methods: A total of 21 patients, who were diagnosed with depression and hwabyung, were evaluated by using the SCL-90-R, BDI, STAI, STAXI, ISI, HRSD, 20-Item Alexithymia Scale, BSDS and NEO-PI. Thereafter, they were statistically analyzed. Results: 1) In the results of SCL-90-R, the PST score group of hwa-byung group without depression was significantly higher when compared to the score from the depression group without hwa-byung. 2) In the results of NEO-PI, the NEO-PI-O score of hwa-byung group without depression was significantly higher when compared to the score from the depression group without hwa-byung. 3) In the results of 20-Item Alexithymia Scale, the total score and score of difficulty for identifying feelings scale from the depression group was significantly higher when compared to the score of non depression group. Conclusions: The results found are expected to serve as a useful resource for future studies when developing the instruments of oriental medical evaluations for hwa-byung.
Bacillus thuringiensis serovar. darmstadiensis produced bipyramidal endo-toxin. The toxin protein was purified by Renografin-76 step gradient centrifugation and investigated by electron microscope. Analysis of total plasmid DNA patterns showed that four different size of plasmids existed in wild type B. thuringiensis serovar. darmstadiensis. Total plasmids DNA was isolated and transformed into pst I site of pBR322 cloning vector. Ten clones containing crystal toxin gene were forst screened colony hybridization by using PUYBT 9044 probe ontained B. thuringiensis kurskaki HD 1 toxin gene. Cloned-DNA was digested with EcoR1 and HindIII and transformed to pIBI30 sequencing vector. Finally, 2.6kb and 3.6kb size fragments contatined toxin-gene were cloned with restriction analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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