유일한 탄소 및 에어지원으로 메탄올만을 이용하여 성장하는 새로운 절대 메탄올 자화세균을 토양으로 부터 분리하였다. 분리균주는 그람음성의 운동성이 없고 포자를 형성하지 않는 간균으로 정대호기성 세균이었다. 이 균주는 catalase 활성과 oxidase 활성을 가지고 있으며, nitrate를 nitrite로 환원시킬 수 있고 성장시 vitamin이나 특이한 생육인자를 요구하지 않았다. 세대시간은 1.6시간으로 메탄올 동화경로로는 ribulose monophosphate pathway(Entner-Doudoroff 변형경로)를 이용하나 α-ketoglutarate dehydrogenase 활성은 없었다. Ammonium ion은 glutamate dehydrogenase를 이용하여 동화하였다. DNA의 guanine plus cytosine 함량은 61.0 mol%이고 세포내 지방산으로는 누고 straight-chain saturated C$^{16:0}$ acids(palmitie acids)와 unsaturated C$^{16:1}$ acids(palmitoleic acids)를 가지고 있으나 이외에도 두 종류의 unidentified C$_{17}$ branched fatty acid도 포함하고 있었다. Major ubiquinone은 Q-8이나 Q-6와 Q-7을 특이하게 소량 가지고 있었다. Phospatidylethanolamine과 Phosphatidylglycerol이 주요한 phospholip의 구성물질이나 diphosphatidylgycerol도 소량 포함하고 있었다. 위와같은 생리적, 생화학적 자료로 부터 분리균주를 새로은 종 즉, Methylohacillus methanolovorus sp. nov.로 명명하였다.
Objectives : The various grape extracts derived from grape pulp, seed and skin, containing various types of polyphenols and flavonoids, have been known to have anti-inflammatory, antioxidant and improve cardiovascular condition as well as sun's damaging effects. However, there have been rare reports of various beneficial effects of grape fruit stem extract (GFSE), one of the waste products of grapes. We investigated anti-inflammatory and melanogenesis inhibitory effects of GFSE. Methods : One-hundred gram of grape fruit stem was extracted with 80% ethanol at room temperature for 3 days. After filtration, the ethanol was removed using vacuum evaporator, then lyophilized to obtain the dry extract which was stored at $-20^{\circ}C$ until used. NO levels were measured by using Greiss reagent. Prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) production was measured by ELISA assay. The expression levels of iNOS, COX-2, TRP-1 and TRP-2 were evaluated by western blot analysis. Results : GFSE reduced the level of nitric oxide and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) production in a dose-dependent manner, compared to control. Expressions of cyclooxygenase-2 (COX-2) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) protein were also effectively inhibited by the GFSE. In a tyrosinase inhibitory activity, GFSE significantly reduced the tyrosinase activity and melanin content in a dose dependent manner, compared to control. GFSE also decreased the expression of tyrosinase related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase related protein-2 (TRP-2), known as a melanocyte-specific gene product involved in melanin synthesis. Conclusions : Therefore, these results indicated that GFSE had powerful anti-inflammatory and anti-melanogenic effects.
Kim, Mu-Yong;Oh, Jeong-In;Paek, Kyoung-Sook;Hong, Chang-Yong;Kim, In-Chull;Kwak, Jin-Hwan
Archives of Pharmacal Research
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제19권1호
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pp.52-59
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1996
The in vitro activity of LB20304 was evaluated against clinical isolates and compared with those of Q-35, ciprofloxacin, sparfloxacin, lomefloxacin and ofloxacin. LB20304 demonstrated 16-to 64-fold more potent activity than ciprofloxacin against gram-positive bacteria. LB20304 inhibited 90% of the isolates of methicillin-susceptible Staphylococcus aureus(MSSA) at a concentration of $0.016\mug/ml\; (MIC_{90}). MIC_{90}$ values of LB20304 against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), methicillin-susceptible Staphylococcus epidermidis (MSSE), methicillin-resistant S. epidermidis (MRSE) and Streptococcus pneumoniae were $2\mug/ml,\; 0.016\mug/ml,\; 0.5\mug/ml \;and\; 0.031\mug/ml,$ respectively. LB20304 was also very active against gram-negative bacteria. Against Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter calcoaceticus, $MIC_{90}s of\; LB20304 were\; 0.031\mug/ml,\; 0.25\mug/ml,\; 2\mug/ml,\; 8\mug/ml\; and\; 0.5\mug/ml$, respectively. Its activity was comparable to that of ciprofloxacin but much better than those of Q-35, sparfloxacin, ofloxacin and lomefloxacin. LB20304 also exhibited the most potent acitvity among quinolones tested against laboratory standard strains, ofloxacin-resistant strains, .betha.-lactamase-producing strains and anaerobic strains. The inhibitory effect$ (IC_{50)$ of LB20304 on DNA gyrase from Micrococcus luteus, determined by the supercoiling assay, was 8-fold more potent than that of ciprofloxacin. LB20304 did not induce topoisomerase-associated DNA cleavage even at a concentration of 10 mg/ml, although ciprofloxacin induced DNA cleavage at a concentration of 1 mg/ml.
Wang, Jinhui;Tian, Ye;Zhou, Zhengfu;Zhang, Liwen;Zhang, Wei;Lin, Min;Chen, Ming
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2106-2115
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2016
To identify the global effects of (p)ppGpp in the gram-positive bacterium Deinococcus radiodurans, which exhibits remarkable resistance to radiation and other stresses, RelA/SpoT homolog (RSHs) mutants were constructed by direct deletion mutagenesis. The results showed that RelA has both synthesis and hydrolysis domains of (p)ppGpp, whereas RelQ only synthesizes (p)ppGpp in D. radiodurans. The growth assay for mutants and complementation analysis revealed that deletion of relA and relQ sensitized the cells to $H_2O_2$, heat shock, and amino acid limitation. Comparative proteomic analysis revealed that the bifunctional RelA is involved in DNA repair, molecular chaperone functions, transcription, the tricarboxylic acid cycle, and metabolism, suggesting that relA maintains the cellular (p)ppGpp levels and plays a crucial role in oxidative resistance in D. radiodurans. The D. radiodurans relA and relQ genes are responsible for (p)ppGpp synthesis/hydrolysis and (p)ppGpp hydrolysis, respectively. (p)ppGpp integrates a general stress response with a targeted re-programming of gene regulation to allow bacteria to respond appropriately towards heat shock, oxidative stress, and starvation. This is the first identification of RelA and RelQ involvement in response to oxidative, heat shock, and starvation stresses in D. radiodurans, which further elucidates the remarkable resistance of this bacterium to stresses.
The properties of piezoelectric and dielectric for 0.05Pb$(Mn_{0.4}W_{0.2}Nb_{0.4})O_3$ - $0.95PbZr_{x}Ti_{1-x}O_{3}$ compositions have been investigated. In the composition of 0.05Pb$(Mn_{0.4}W_{0.2}Nb_{0.4})O_3$-$0.95PbZr_{0.51}Ti_{0.49}O_{3}$, the values of $k_p$ and ${\varepsilon_{33}}^T/{\varepsilon}_0$ are maximized, but $Q_m$ was minimized ($k_p$=56.5[%], $Q_m$=1130, $d_{33}$=258[pC/N], ${\varepsilon_{33}}^T/{\varepsilon}_0$=1170). The grain size was suppressed and the uniformity of gram was improved at the $1100[^{\circ}C]$. Dielectric constant increase at the Ti rich, but decrease at the Zr rich after poling. Because the dielectric constant after poling is determined by compromising effects between dipole switching and electostriction inducing stress(dielectric constant increasing factor) and dipole rotation to the poling direction (dielectric constant decreasing factor).
An obligate methanol-oxidizing bacterium, Methylobacillus sp. strain SK1, which grows only on methanol was isolated from soil. The isolate was nonmotile Gram-negtive rod. It does not have internal membrane system. The colonies were small, whitish-yellow, and smooth. The guanine plus cytosine content of the DNA was 48 mol%. Cellular fatty acids consisted predominantly of large amounts of straight-chain saturated $C_{16:0}$ acid and unsaturated $C_{16:1}$ acid. The major ubiquinone was Q-8, and Q-10 was present as minor component. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Poly-.betha.-hydroxybutyrate, endospores, or cysts were not observed. the isolate could grow only on methanol in mineral medium. Growth factors were not required. The isolate was unable to use methane, formaldehyde, formate, methylamine, and several other organic compounds tested as a sole source of carbon and energy. Growth was optimal at 35.deg.C and pH 7.5. It could not grow at 42.deg.C. The doubling time was 1.2h at 30.deg.C when grown with 1.0%(v/v) methanol. The growth was not affected by antibiotics inhibiting cell wall synthesis and carbon monoxide but was completely suppressed by those inhibiting protein synthesis. Methanol was found to be assimilated through the ribulose monophosphate pathway. Cytochromes of b-, c-, and o- types were found. Cell-free extracts contained a phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity, which required ammonium ions as an activator. Cells harvested after the late exponential phase seemed to contain blue protein.ein.
산업적으로 유용한 미생물 유래 셀룰로오스를 생산 이용하기 위해 전국 각지 양조식초의 덧으로부터 세룰로오스의 생산성이 높고 조질의 균일성을 나타내는 균주를 분리하였다 분리균 GS11은 gram 음성이고 간균(0.6$\times$2.2~3.2 $\mu\textrm{m}$)의형태를 하고 있으며 편모를 가지고 있어 운동성을 보였다. 또한 세포내 지방산 조성은 다량의 불포화 지방산 {{{{ {C}_{18:1} }}}}과 포화지반산 {{{{ {C}_{16:0 } }}}}, {{{{ {C}_{14:0 } }}}} 이 대부분을 차지하였고 DNA 염기조성 (G+C) 함량은 58.4% 이였으며 ubiqunone 은 {{{{ { Q}_{10 } }}}}을 갖는 것으로 나타났다 이러한 형태학적 생리.생화학적 특성의 결과에 따라 본 균주는 Acetobacter xylinum GS11으로 동정되었다 A. xylinum, GS11 의배양기간 동안 셀룰로오스 생산성을 검토하고자 250mL 삼각플라스크에 균주를 접종하여 $30^{\circ}C$에서 12일간 정치배양하였다 그결과 기질인 glucose의 소비는 접종 후 급소하게 감소하여 셀룰로오스 생산에 이용되었으며 셀룰오스의 생산은 배양 9일 경에 2.8g/l로 최대의 생산량을 나타냈다.
From the outer membrane portion of Gram-negative Klebsiella pneumoniae, the activity of 2-furaldehyde dehydrogenase depending upon beta-nicotinamide adenine dinucleotide was detected. Cytoplasmic membrane was preferentially extracted from crude membrane with $Mg^{2+}$ and Triton X-100, and then outer membrane was collected by ultracentrifugation. The crude enzyme was obtained by solubilization of outer membrane with lysozyme, ethylene diamine tetraacetate and Triton X-100. Thereafter 2-furaldehyde dehydrogenase was partially purified through column chromatography on QAE-Sephadex Q-50 and Sephadex G-150 and the enzyme activity was analyzed by means of high performance liquid chromatography. The optimal pH for the activity of the enzyme was about 9.5 and the optimal temperature was about $85^{\circ}C$. The partially purified enzyme retained tis activity at $85^{\circ}C$ for 5 hours. The optimal concentration of Triton X-100 for the activity of the enzyme was about 1.5% in the reaction mixture.
DNA칩의 성능은 칩을 구성하는 probe에 의해 결정된다. 좋은 probe는 homogeneity, sensitivity, specificity와 같은 속성을 갖추어야 한다. 이중 specificity는 probe의 특정 유전자에 대한 선별적 결합 능력을 나타내는 것으로 이를 계산하는데 가장 많은 시간이 요구된다. 본 논문은 유전자의 개별 후보 probe들에 대한 선정 작업을 실행하기 전에 q-gram을 이용하여 비교가 필요한 유전자들만을 전체 유전자의 길이가 n인 경우 O(1/$4^an^2$)의 시간에 선별하는 전처리 알고리즘을 제안한다. 그리고 제안한 알고리즘을 사용함으로써 기존 방법들보다 빠른 probe 선정이 가능함을 실제 데이터를 사용하여 보인다.
Graziani, Ana Claudia;Stets, Maria Isabel;Lopes, Ana Luisa Kalb;Schluga, Pedro Henrique Caires;Marton, Soledad;Ferreira, Ieda Mendes;de Andrade, Antero Silva Ribeiro;Krieger, Marco Aurelio;Cardoso, Josiane
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권4호
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pp.838-843
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2017
Sepsis is a major health problem worldwide, with an extremely high rate of morbidity and mortality, partly due to delayed diagnosis during early disease. Currently, sepsis diagnosis requires bacterial culturing of blood samples over several days, whereas PCR-based molecular diagnosis methods are faster but lack sensitivity. The use of biosensors containing nucleic acid aptamers that bind targets with high affinity and specificity could accelerate sepsis diagnosis. Previously, we used the systematic evolution of ligands by exponential enrichment technique to develop the aptamers Antibac1 and Antibac2, targeting the ubiquitous bacterial peptidoglycan. Here, we show that these aptamers bind to four gram-positive and seven gram-negative bacterial sepsis agents with high binding efficiency. Thus, these aptamers could be used in combination as biological recognition elements in the development of biosensors that are an alternative to rapid bacteria detection, since they could provide culture and amplification-free tests for rapid clinical sepsis diagnosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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