• BMB Reports
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• 제29권3호
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• pp.215-220
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• 1996

A general procedure to quantitate the reaction of carbodiimides with carboxy groups of proteins is described. Pyridoxamine reacts with the o-acylisourea intermediate generated during the reaction of carboxyl residues with carbodiimides. The extent of the reaction is determined by measuring the spectroscopic properties, absorption and emission, of pyridoxyl residues covalently attached to the proteins. Resolved pig brain aspartate aminotransferase (apoenzyme), inactivated by 1-ethyl-3-(3-dimethylamino propyl) carbodiimide, reacts with $[^{3}H]pyridoxamine$. After trypsin digestion, one peptide labeled with radioactive pyridoxyl was separated by reverse phase HPLC.

• 한국어병학회지
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• 제6권2호
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• pp.133-142
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• 1993

비타민은 동물과 어류에 있어 성장, 발육, 및 대사기능에 비교적 적은 양으로 요구되는 필수 미량원소이다. 이들 미세 영양분이 결핍됨으로써 식욕 감퇴에서부터 심한 조직 변형등의 증상들을 일으킨다. 수용성 vitamin B6는 비교적 적은양이 요구되며, 주로 보조 효소 기능을 가지고 있다. 비타민 B6라는 명칭은 유사한 대사 기능들을 가진 화학적으로 관련된 pyridoxine, pyridoxamine, pyridoxal들을 의미한다. 비타민 B6는 비 반추 포유류, 조류와 어류의 음식물을 통해 섭취되는 성분이며, 비타민 B6 화합물들은 식물과 미생물 등에 의해 합성된다. 대사적으로 활성형인 비타민 B6 보조효소는 pyridoxal-5-phsphate(PLP)이며, decarboxylases, aminotransferases, sulfhydrases, tryptophanases를 포함한 아미노산 대사에 관여하는 여러 효소들(PLP-dependant)에 coenzyme으로 작용한다. 비타민 B6 요구량이 육식 동물보다 고단백질을 섭취하는 어류에서 더 높다. B6는 탄수화물과 지질의 대사에도 역시 관여하며 heme과 serotonin의 합성에 필수적이다. 어류에서 결핍증(현상)은 빨리 나타나는데, 이러한 증세로는 신경계 분열, 경련, 유영 부조화, 피부병변, 부종, 안구 돌출, 근 긴장성 경련 등이 포함된다. 비타민 B6는 pyridoxal kinase와 pyridoxine(pyridoxamine) oxidase의 촉매 반응에 의해 생체내 활성형인 PLP로 된다. PLP는 PLP-의존성 효소에서 보조 효소로 필수적인 역할을 하는 관계로 이 논문에서는 비타민 B6 생합성 및 대사와 비타민 B6 의존성 효소(aminotransferase)의 특성과 작용기작에 대한 효소학적 연구를 중점으로 이들 enzyme들의 구조와 기능에 대한 최근 연구 동향을 살펴보고자 한다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권11호
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• pp.5333-5338
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• 2012

Vitamin B6 functions as a coenzyme in >140 enzymatic reactions involved in the metabolism of amino acids, carbohydrates, neurotransmitters, and lipids. It comprises a group of three related 3-hydroxy-2-methyl-pyrimidine derivatives: pyridoxine (PN), pyridoxal (PL), pyridoxamine (PM) and their phosphorylated derivatives [pyridoxal 5'-phosphate (PLP) and pyridoxamine 5'-phosphate (PMP)], In the folate metabolism pathway, PLP is a cofactor for the mitochondrial and cytoplasmic isozymes of serine hydroxymethyltransferase (SHMT2 and SHMT1), the P-protein of the glycine cleavage system, cystathionine ${\beta}$-synthase (CBS) and ${\gamma}$-cystathionase, and betaine hydroxymethyltransferase (BHMT), all of which contribute to homocysteine metabolism either through folate-mediated one-carbon metabolism or the transsulfuration pathway. Folate cofactors carry and chemically activate single carbons for the synthesis of purines, thymidylate and methionine. So the evidence indicates that vitamin B6 plays an important role in maintenance of the genome, epigenetic stability and homocysteine metabolism. This article focuses on studies of strand breaks, micronuclei, or chromosomal aberrations regarding protective effects of vitamin B6, and probes whether it is folate-mediated one-carbon metabolism or the transsulfuration pathway for vitamin B6 which plays critical roles in prevention of cancer and cardiovascular disease.

• Molecules and Cells
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• 제41권12호
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• pp.1033-1044
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• 2018

As sessile organisms, plants have evolved to adjust their growth and development to environmental changes. It has been well documented that the crosstalk between different plant hormones plays important roles in the coordination of growth and development of the plant. Here, we describe a novel recessive mutant, mildly insensitive to ethylene (mine), which displayed insensitivity to the ethylene precursor, ACC (1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid), in the root under the dark-grown conditions. By contrast, mine roots exhibited a normal growth response to exogenous IAA (indole-3-acetic acid). Thus, it appears that the growth responses of mine to ACC and IAA resemble those of weak ethylene insensitive (wei) mutants. To understand the molecular events underlying the crosstalk between ethylene and auxin in the root, we identified the MINE locus and found that the MINE gene encodes the pyridoxine 5′-phosphate (PNP)/pyridoxamine 5′-phosphate (PMP) oxidase, PDX3. Our results revealed that MINE/PDX3 likely plays a role in the conversion of the auxin precursor tryptophan to indole-3-pyruvic acid in the auxin biosynthesis pathway, in which TAA1 (TRYPTOPHAN AMINOTRANSFERASE OF ARABIDOPSIS 1) and its related genes (TRYPTOPHAN AMINOTRANSFERASE RELATED 1 and 2; TAR1 and TAR2) are involved. Considering that TAA1 and TARs belong to a subgroup of PLP (pyridoxal-5′-phosphate)-dependent enzymes, we propose that PLP produced by MINE/PDX3 acts as a cofactor in TAA1/TAR-dependent auxin biosynthesis induced by ethylene, which in turn influences the crosstalk between ethylene and auxin in the Arabidopsis root.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권4호
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• pp.405-410
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• 1995

In order to screen dextranase with high dextranolytic activity from microbial origins, dextranase producing fungal isolates were isolated from soil of the Taeion area. 197 strains with dextranolytic activities were isolated, out of which 3 strains with high dextranolytic activities were selected in the first screening. A strain (GR-98) with a best dextranolytic activity was selected in the second screening. The strain was identified to be similiar Aspergillus ustus by the morphological and cultural characteristics. The optimum culture temperature and initial pH for the dextranase production of the strain was 30$\circ$C and 7.0, respectively. The optimum culture medium was composed of 2% dextran, 0.3% KNO$_{3}$, 0.05% K$_{2}$HPO$_{4}$, 0.02% MgSO$_{4}$-7H$_{2}$O, 0.05% KC1, and 2.5 $\mu$g/ml pyridoxamine, and the enzyme production was maximum when the strain was subcultured at 30$\circ$C for 7 days.

• Food Science and Biotechnology
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• 제17권6호
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• pp.1131-1138
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• 2008

Diabetic complications are a leading cause of blindness, renal failure, and nerve damage. Additionally, diabetes-accelerated atherosclerosis leads to increased risk of myocardial infarction, stroke, and limb amputation. At the present time, 4 main molecular mechanisms have been implicated in hyperglyceamia-mediated vascular damage. In particular, advanced glycation endproducts (AGE), which are formed by complex, heterogeneous, sugar-derived protein modifications, have been implicated as a major pathogenic process for diabetic complications. Recently, AGE inhibitors such as aminoguanidin, ALT-946, and pyridoxamine have been reported. Such an integrating paradigm provides a new conceptual framework for future research on diabetes complications and on discovering drugs to prevent the progression of AGE-induced maladies.

• BMB Reports
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• 제30권2호
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• pp.125-131
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• 1997

This work reports studies of the catalytic and structural properties of pyridoxal kinase (ATP: pyridoxal 5' -phosphotransferase, EC. 2.7.1.35), Pyridoxal kinase catalyzes the phosphorylation of vitamin $B_6$ (pyridoxal, pyridoxamine, pyridoxine) using ATP-Zn as a phosphoryl donor. The enzyme purified from brain tissues is made up of two identical subunits of 40 kDa each. Native enzyme was inhibited by a substrate analogue, pyridoxal-oxime. Limited chymotrypsin digestion of pyridoxal kinase yields two fragments of 24 and 16 kDa with concomitant loss of catalytic activity. These fragments were isolated by DEAE ion exchange chromatography and used for binding studies with fluorescent ATP and pyridoxal analogues. The spectroscopic properties of both fluorescent pyridoxal analogue and Anthraniloyl ATP (Ant-ATP) bound to the 24 kDa fragment are indistinguishable from those of both pyridoxal analogue and Ant-ATP bound to the native pyridoxal kinase, respectively. The small 16 kDa fragment, generated by proteolytic cleavage of the kinase, does not bind any of the substrate analogues. Binding characteristics of Ant-ATP were extensively studied by measuring the changes in fluorescence spectra at various conditions. From the results presented herein, it is postulated that the structural domain associated with catalytic activity comprises approximately one-half of the molecular mass of pyridoxal kinase (24 kDa). whereas the remaining portion (16 kDa) of the enzyme contains a regulatory binding domain.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권3호
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• pp.207-212
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• 1989

토양으로부터 분리 한 균주 YS-221-B로부터 $\alpha$-D-Glucosidase Inhibitor 생산조건을 검토한 결과는 다음과 같다. 최적 pH와 온도는 8.0, 3$0^{\circ}C$였으며, 탄소원으로는 mannitol, 1-Inositol, erythritol과 같은 당알코올이 양호하였으며, 질소원으로는 asparagine, beef extract가 양호하였다. Riboflavin, folic acid, thiamine과 같은 vitamin의 첨가에 의해서 저해물질 생산이 10~20% 증가되었으며, 금속이온 중에 $Zn^{++}$, $Mg^{++}$은 약 20% 정도 물질생산을 촉진시켰으나 Li$^+$, Co$^{++}$ $Ca^{++}$, Fe$^{++}$ 등은 감소시켰다. 그리고 pH8.0, 3$0^{\circ}C$에서 8~9일간 배양함으로써 저해물질 생산이 최고에 달하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제34권2호
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• pp.141-150
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• 2002

식품에 함유된 수용성 비타민의 분석을 위하여 식품 중 단백질, 탄수화물 등과 결합하고있는 수용성 비타민을 추출 과정에서 파괴를 최소화하기 위하여 지금까지 통상적으로 행하여온 어떤 화학적 처리도 병용하지 않고 단백질 분해효소인 bromelain과 소의 췌장에서 추출한 protease 및 ${\alpha}-amylase$를 이용하여 결합을 절단하는 순수한 효소처리방법만을 이용하여 추출하였다. 추출된 비타민 시료용액을 $C_{18}$ Sep-Pak solid phase extraction column으로 정제하여 추출된 비타민을 한 column상에서 한번에 모두 역상 HPLC로 분석하는 방법을 개발하였다. 이 방법으로 표준 수용성 비타민의 회수율과 돼지고기 및 감자 중의 수용성 비타민분석 결과와 이 들 식품에 수용성 비타민을 강화하였을 때 강화 비타민의 회수율을 측정한 결과를 A.O.A.C.방법에 따라 추출 정제하여 분석한 결과와 비교하였다. Bromelain 처리와 A.O.A.C.법에서 표준수용성 비타민 중 folic acid가 가장 낮은 37.63%와 48.18%를 나타내었고 protease 처리에서는 pyridoxal이 가장 낮은 75.45%를 나타내었다. Niacinamide를 제외하고는 효소처리법이 A.O.A.C.법보다 높은 회수율을 보였다. 돼지고기 중 수용성비타민은 효소 처리방법에서 aminobenzoic acid, pyridoxal, pyridoxine, niacinamide 및 thiamin 등 6가지가 검출되었고 $C_{18}$ Sep-Pak column에 의한 정제에도 불구하고 불순 peak들이 많이 나왔으나 정량에 방해되는 불순 peak는 없었고 A.O.A.C.방법에 의한 추출 정제 시 niacinamide와 thiamin정량에 있어서 불순 peak에 의하여 정확한 정량이 불가능하였다. 돼지고기에서 특히 단백질과 공유결합을 형성하고 있는 비타민 $B_6$의 경우 문헌에 보고된 값들 보다 상당히 높은 값으로 정량되어 단백질 함량이 높은 시료에 대하여 별도의 정제과정이 추가로 필요한 것으로 나타났다. 비타민 강화 돼지고기 중의 강화 비타민의 회수 율은 표준 비타민 보다 회수율이 높고 정확하였다. 감자의 경우 protease처리에서 aminobezoic acid, pyridoxal, pyridoxine 및 thiamin 등 4가지가 검출되었고 bromelain 처리에서는 pyridoxal이 검출되지 않았다. 효소처리법에서 돼지고기와 마찬가지로 $C_{18}$ Sep-Pak column에 의한 정제로도 불순 peak가 많았으나 정량에 방해되는 불순 peak는 없었다. A.O.A.C.방법에서 pyridoxamine과 thiamin정량에서 불순 peak로 인하여 정확한 정량이 불가능하였다. 비타민 $B_6$의 경우 돼지고기와 달리 문헌에 나타난 값들과 비슷한 결과를 얻었는데 이는 단백질 함량이 낮은 관계로 판단된다. 비타민 강화 감자에서 강화 비타민의 회수 율도 돼지고기와 마찬가지로 상당히 정확하였고 A.O.A.C.법보다 높게나왔다.

• 한국식품과학회지
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• 제34권3호
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• pp.459-465
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• 2002

마요네즈 원료용의 상업적인 가염난황에 대한 기초자료를 얻기 위하여, 3종류의 난황 즉, 살균 난황-미가염(Yolk A), $61.5^{\circ}C$ 3.5분간 살균한 후에 10%(w/w) 가염한 난황(Yolk B), 10%(w/w) 가염한 후에 $63.5^{\circ}C$ 3.5분간 살균난황(Yolk C)을 각각 제조하여 1년간 $-15^{\circ}C$와 $-20^{\circ}C$의 냉동고 내에 저장하면서, 이들의 품질특성에 대해 조사하였다. 미가염 살균 난황(Yolk A)은 냉동저장에 의해 겔화되어 마요네즈의 원료로서 사용할 수 없었다. 가염에 의해 난황의 점도는 $3{\sim}5$배 정도 증가하였다. 가염전 살균한 난황(Yolk B)의 점도는 가염후 살균한 난황(Yolk C)의 점도에 비해 높았다. 가염전 살균한 난황의 경우, $-15^{\circ}C$보다 $-20^{\circ}C$에서 저장한 것이 점도 증가가 컸으며, 가염후 살균한 난황의 경우에는 그 반대였다. 두 종류의 난황 모두, 냉동기간이 길어짐에 따라 해동후의 점도가 증가하였다. 난황의 유화력은 난황의 냉동저장 기간의 장단과, 냉동저장 온동 $-15^{\circ}C$ 및 $-20^{\circ}C$ 사이에서 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 냉동저장 기간중 미생물의 수는 감소하였으며, 가염전 살균한 난황과 가염후 살균한 난황 사이에는 유의적인 차이는 없었다. 이러한 결과는 상업적으로 살균된 10% 가염난황은 $-15{\sim}-20^{\circ}C$에서 1년 동안 안정하게 저장할 수 있으며, 난황의 살균 조건, 냉동저장 조건의 조절에 의해 바람직한 품질특성을 갖는 마요네즈용 가염 냉동난황의 제조가능성을 제시하였다.지 않던 청태는 $55^{\circ}C$에서 30분간 열처리하였을 때 약한 활성을 나타내었으며, $100^{\circ}C$로 처리시 실활되었다. 거두와 서리태, 선비콩, 황태, 강남콩은 $55^{\circ}C$에서 30분 및 $100^{\circ}C$에서 10분의 열처리로 활성이 점차 증가하였으나 $100^{\circ}C$에서 30분 처리시 활성을 대부분 혹은 완전 상실하였다. 울타리콩의 혈전용해활성은 $100^{\circ}C$에서 30분간 가열시에도 높은 비활성도를 유지하여 내열성이 매우 큰 것으로 나타났다. 의한 정제로도 불순 peak가 많았으나 정량에 방해되는 불순 peak는 없었다. A.O.A.C.방법에서 pyridoxamine과 thiamin정량에서 불순 peak로 인하여 정확한 정량이 불가능하였다. 비타민 $B_6$의 경우 돼지고기와 달리 문헌에 나타난 값들과 비슷한 결과를 얻었는데 이는 단백질 함량이 낮은 관계로 판단된다. 비타민 강화 감자에서 강화 비타민의 회수 율도 돼지고기와 마찬가지로 상당히 정확하였고 A.O.A.C.법보다 높게나왔다.여한 흰쥐의 체중증가량과 사료 섭취 효율을 50 ppm의 카드뮴만을 급여한 흰쥐의 이들 측정값과 비교할 때 유의적인 차이가 없었다. 그러나 50 ppm의 카드뮴액과 함께 3% 갈근 추출액을 급여한 흰쥐군은 50 ppm의 카드뮴액만을 급여한 흰쥐군과 비교하여 신장내 카드뮴 함량과 GPT 및 LDH 활성도, renin 활성도가 유의적으로 감소되었고 신장 무게는 정상 흰쥐와 같은 수준으로 회복하였고 GOT 활성도 역시 정상 흰쥐와 같은 수준으로 감소를 보여 갈근이 카드뮴 중독 흰쥐에서 신장 등의 장기내 카드뮴 축적의 감소로 카드뮴 중독 작용의 경감 효과를 갖는 것으로 나타났다.실이나 최근 세계화는 곧 우리의