Cytochrome oxidase was purified from bovine-heart mitochondria and its enzymatic properties were examined. The purified cytochrome oxidase was identified by its absorption spectrum and chromatogram through gel filtration. The specific activity, purification degree and yield of purified cytochrome oxidase were 18 nmol/mg/ml/min, 24.83 fold and 0.93%, respectively. The activity of the enzyme assayed by a ferrocytochrome $c-O_2$ system was optimized at $25^{\circ}C$ and pH 6.5. Examining the effect of nonionic detergents established that cytochrome oxidase was deactivated by Triton X-100. The oxidase was activated by Tween 80 and deactivated by Tween 20. The Michaelis constant and maximum velocity of the oxidase for ferrocytochrome c were 0.032~0.044 mM and 0.019~0.021 mM/min, respectively. After adaption to basal diet for a week, experimental diets containing 6 mg Cu/kg, or zero mg Cu/kg, or 12 mg Cu/kg were fed to a control group, a copper-free group and a copper-rich group of Sprague-Dawley rats, respectively, for 4 weeks. The specific activities assayed for the ferrocytochrome $c-O_2$ system of isolated cytochrome oxidase from the rat liver of control, copper-free, and copper-rich group were 1.00, 1.19, and 0.878 nmol/mg/ml/min, respectively. Their degrees of purification were 11.38, 10.82 and 8.78 fold, respectively. The specific activities for liver and heart mitochondrial cytochrome oxidase of copper-free/copper-rich groups assayed using the ferrocytochrome $c-O_2$ system were 81.4% and 96.4%/64.1% and 61.1%, respectively, compared with those of the control.
Neutral protease which was obtained from a genus of Aspergilli as the crystal form were investigated for their purification and properties. The results of biochemical and enzymatic studies for their purification and properties in this enzyme were as follows. 1) On the wheat media containing 70%-water and $CaCo_{3}$, Aspergilus oryzae S.H.W. 131 is satisfactorily grown under the basic optimum conditions temperature $27^{\circ}C$- $30^{\circ}C$at relative humidity 100% for three days. 2) The enzyme solution extracted with water is successively purified through the passing on column of Asmti-177N for decolorization of it. And ion exchanger such as DEAAE Sphadex A-50 or Shepadex G-100 and fraction collector is necessary for the sepearte treatments of this enzyme. After washing it with organic solvents as aceton-EtOH, etc., it should be dried on the vacuum dryer at $40^{\circ}C$) The protease activity is determined by the amounts of amino acids, tyrosine. 4) The optimum pH of neutral protease is 6.0-8.0. 5) In effectively decomposing with this neutral protease, the optimum temperature is $35^{\circ}C$. 6) It is interesting that the amounts of metal ion affects the activity of neutral protease. For examples, if it were treated with manganic ion, its activity would be more effective than any other that.
Pullulanase was produced from the Klebisella pneumonias NFB_320 with the conmposition of 0.1% pullualn 1.5% yeast extract, 0.2% $K_2$HPO$_4$ and 0.02% MgSO$_4$.7$H_2O$(pH5.5). The optimum temperature for activity of the pulluanase was 3$0^{\circ}C$ and the highest yield of the enzyme was obtained after cell growth at 3$0^{\circ}C$ for 18hr, and maintained until 24hr cultivation. The pullulanase was successively purified 52.6 folds with 7.8% yield by acetone precipitation. DEAE-cellulose column chromatography and gel fitrations. The purified enzyme hydrolyzed pullulan into maltotriose exclusively. Chemical and physical properties of purified pullulanase from Klebisella pneumonias NFB-320 were examined. The optimum pH and temperature for enzyme activity were 5.0 and 6$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable between pH4 and 7, and up 5$0^{\circ}C$. The effect of mo-dification on the rate of enzyme reaction was studies with various chemicals and metal ions. The enzyme has been found to be inactivated by I$_2$ and N-bromosussinimide(NBS), which probably indicated the involve- ment of tryptophan residues in the active center of the enzyme.
${\gamma}-Glutamylcysteine$ synthetase was purified from E. coli K-12 strain and its properties related to the in vitro synthesis of glutathione by enzymatic method were investigated. The activity of purified ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase was increased with increasing concentration of L-glutamate up to 60 mM, while it was decreased by about 50% and 40% under 60 mM of L-cysteine and 45 mM of glycine, respectively. The enzyme activity was reduced not only by ADP, one of the reaction products, but also by the reduced form of glutathione. Therefore, because the reduced glutathione as well as glycine which is the substrate for glutathione synthetase inhibit the activity of ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase, it is recommended to design a bioreactor system with two separate reactions for glutathione synthesis : one with ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase reaction and the other glutathione synthetase reaction. In addition since ADP, resulted from these reactions, reduces the activity of ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase, it is necessary to introduce an ATP regeneration system for glutathione synthesis.
Protease widely exists in the digestive tract of animals and humans, playing a very important role in protein digestion and absorption. In this study, a high protease-producing strain Planomicrobium sp. L-2 was isolated and identified from the digestive tract of Octopus variabilis. The strain was identified by physiological and biochemical experiments and 16S rDNA sequences analysis. A protease was obtained from the strain Planomicrobium sp. L-2 through ammonium sulfate precipitation, dialysis and enrichment, DEAE-Sephadex A50 anion-exchange chromatography, and Sephadex G-100 gel chromatography. The molecular weight and properties of the protease were characterized, including optimum temperature and pH, thermal stability, protease inhibitions and metal ions. According to our results, the protease from Planomicrobium sp. L-2 strain designated as F1-1 was obtained by three-step separation and purification from crude enzyme. The molecular weight of the protease was 61.4 kDa and its optimum temperature was $40^{\circ}C$. The protease F1-1 showed a broad pH profile for casein hydrolysis between 5.0~11.0. No residual activity was observed after incubation for 40 min at $60^{\circ}C$ and 60 min at $50^{\circ}C$. F1-1 protease was inhibited by $Mn^{2+}$, $Hg^{2+}$, $Pb^{2+}$, $Zn^{2+}$, and $Cu^{2+}$ ions, as well as PMSF, indicating that the protease F1-1 was a serine protease. Additionally, research basis provided by this study could be considered for industrial application of octopus intestinal proteases.
Myrosinase from radish was purified by DEAE Bio-Gel, Con-A, and Superose-6 column. The purified myrosinase(II) possessed 2 subunits, and their molecular as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis were 53 and 39 KD, respectively. The specific activity of purified enzyme was 37,500 units/mg. The enzyme was purified approximately 44-fold compared to the crude enzyme. Optimum pH of the myrosinase was $6.5{\sim}7.0$ in phosphate and Tris-HCl buffer solutions. Optimum temperature of the enzyme was $37{\sim}38^{\circ}C$. The enzyme was stable at pH 7.0, and less than $30^{\circ}C$. Cu or Hg ion significantly inhibited the enzyme activity, but ascorbic acid enhanced, resulting in a maximum activity by 1 mM ascorbic acid. Among the ascorbic acid analogues, dehydroascorbic acid did not affect, whereas others showed a little effect, but less than ascorbic acid itself. Individual 2-mercaptoethanol and dithiothreitol (reducing agents) did not enhance the enzyme activity. but 2-mercaptoethanol effect was enhanced when mixed with ascorbic acid.
The aim of this study was to isolate antioxidant peptides from an enzymatic hydrolysate of Spirulina platensis. A novel antioxidant peptide was obtained by ultrafiltration, gel filtration chromatography, and reverse-phase high-performance liquid chromatography, with the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging assay used to measure the antioxidant activity, and the sequence was determined to be Pro-Asn-Asn (343.15 Da) by electrospray ionization tandem mass spectrometry. This peptide was synthesized to confirm its antioxidant properties, and it exhibited 81.44 ± 0.43% DPPH scavenging activity at 100 μg/ml, which was similar to that of glutathione (82.63 ± 0.56%). Furthermore, the superoxide anion and hydroxyl free-radical scavenging activities and the SOD activity of the peptide were 47.84 ± 0.49%, 54.01 ± 0.82%, and 12.55 ± 0.75%, respectively, at 10 mg/ml. These results indicate that S. platensis is a good source of antioxidant peptides, and that its hydrolysate may have important applications in the pharmaceutical and food industries.
Decrease in the amount of cotyledonary spermidine in Glycine max under anaerobic conditions related to an increase in spermidine dehydrogenase. Under the same conditions, no enzymatic activity of diamine oxidase was observed. Exposure of Glycine max both to spermidine and 1,3-diaminopropane under anaerobic conditions resulted in a decrease in spermidine contents. Correlated with the decrease in spermidine contents, there was a drastic increase in spermidine dehydrogenase. The molecular weight of the purified enzyme estimated by Sephacryl S-300 gel column and SDS gel electrophoresis were 130,000 dalton and 65,000 dalton, respectively, indicating that the enzyme is a dimer. The optimal pH for activity was 9.3. The $K_m$ value for spermidine was 0.61 mM. Neither metal ions nor polyamine and derivatives affected enzymatic activity, but the enzyme was inhibited by DTNB, NEM and PCMB, suggesting that a cysteine residue of the enzyme is associated with or involved in enzyme activity. To our knowledge, this is the first report describing properties of the enzyme from plants. Considered together, the data in this paper indicate that both spermidine and 1,3-diaminopropane, novel activators, enhance the spermidine dehydrogenase activity and control the intracellular spermidine contents.
An $\alpha$-D-galactosidase ($\alpha$-D-galactoside galactohydrolase, EC 3. 2. 1. 22) from earthworm was purified by affinity chromatography using N-$\varepsilon$-aminocaproyl-$\alpha$-D-galactopyranosylamine coupled to sepharose and its properties were examined. The specific activity of the purified enzyme, tested with p-nitrophenyl-$\alpha$-D-galactopyranoside as substrate, was 314 units/mg protein, representing an 122-fold purification of the original crude extract. The final preparation obtained from by Sephadex G-25 chromatography showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 48,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified galactosidase was showed maximum activity at pH 4.5 and 4$0^{\circ}C$, and was stable in the pH and temperature ranges from 4.0 to 5.5 and 30 to 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity was inhibited by Zn2+, Hg2+ and Co2+. When the purified $\alpha$-galactosidase treated to guar gum for 6 hour, gel-promoting property was increased. It was clear that enzymatic elimination of galactose from guar gum by purified $\alpha$-galactosidase would lead to a significant increase in gelation ability.
Serratia marcescens ATCC 25419 protease was purified to homogeneity by ammonium sulfate treatment, and DEAE-cellulose anion exchange chromatography. The specific activity of the enzyme was increased 448-fold during purification with an overall yield of 43.0%. Metal reactivation on the purified protease from S. marcescens was studied. S. marcescens protease was a metalloenzyme to be completely inhibited its activity by EDTA and the enzyme outstandingly inhibited by Hg, Fe, Cu, but the activity was increased approximately 20% by Co. The reactivation of the apoenzyme was effective with Mn, Co, Zn in pH range from 6 to 8. Among metalloenzymes prepared to the addition of Mn, Co, Zn to restore the degree of activity of native enzyme, Zn-enzyme was similar to the native enzyme in respects with enzyme activity, alkali-inactivation, thermo-stability.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.