• 미생물학회지
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• 제19권4호
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• pp.192-198
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• 1981

Protoplasts from Trichoderma koningii were fractioned at varing digestion periods. There were distinct differences between the fractionated protoplasts in CMCase activity and protein content ; namely, protein contents and CMCase activities in the early-protoplasts were higher than the late-produced protoplasts. Reversion frequencies of the early-produced protoplasts. Reversion frequencies of the early-produced protoplasts (0-1hr.) and the late-produced protoplasts (1-2.5 hr.)were 1.25% and 0.56%, respectively. From these results it was assumed that the early-produced protoplasts were more active in physiological metabolism. Meanwhile, in osmotically stabilized liquid medium two distinct reversion patterns of these protoplasts were found. In the first, normal germ tube was developed from the opposite side of the protoplast after the production of an aberrent tube. In the second, reversion occurred through germination of protoplast, but this patterns was uncommon. It is suggested that the the physiological and morphological heterogeneities in protoplast reversion are related to the heterogeneous origins of protoplasts from highly differentiated mycelium.

• 한국균학회지
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• 제13권2호
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• pp.79-82
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• 1985

식용으로 재배면적이 증가하고 있는 느타리버섯과 사철느타리버섯의 유전연구와 균주개 발을 위하여 원형질체의 재생 및 환원에 관한 실험 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 느타리버섯의 원형질체 재생에 알맞는 삼투압 조절제는 0.6 M KCl과 0.6 M Sucrose였으며, 균사의 생장을 촉진하는 amino acid와 vitamin을 혼합한 배지에서 원형질체 환원율이 약 5배로 증가하였다. 2. 삼투압 조절제가 첨가된 배지에서 재생후 2일부터 원형질체가 재생하여 $5{\sim}10$일에 균총을 육안으로 확인하였으며, 환원율이 $0.24{\sim}3.19%$로 사철느타리버섯과 wild type이 느타리버섯과 영양요구성 균주보다 환원율이 다소 높았다.

• 한국균학회지
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• 제15권1호
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• pp.38-41
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• 1987

Neohaplonts were obtained to improve mushroom strain from dikaryon strains of Flammulina Velutips, Ganoderma lucidum, Lyophyllum ulmarium, Pleurotus cornucopiae and Pleurotus spodoleucus by protoplast reversion. The noehaplont frequency from reversion colonies of protoplasts was 4.47-47.7%. Four more types of morphological characteristics were detected from neohaplonts of protoplast reversion in L. ulmarium, P. cornucopiae and P. spodoleucus, but one or two types were neohaplonts in F.velutipes and G. lucidum. Growth rate of neohaplonts was slow compared with dikaryon strains.

• 농업과학연구
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• 제19권1호
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• pp.33-39
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• 1992

Chitin합성 저해제인 buprofezin이 Coriolous versicolor, Ganoderma lucidum, 및 G. applanatum 균사의 생장과 원형질체 나출 및 재생에 미치는 영향을 조사한 결과 buprofezin은 C. versicolor, G. lucidum 및 G. applanatum의 균사생장을 심히 저해하였고 첨가농도가 높을수록 균사생장 억제가 심하였다. Buprofezin처리에 의하여 기균사 및 oidia 형성량은 증가하였으나 균사의 형태에는 변화가 없었다. G. applanatum은 buprofezin 처리에 의하여 원형질체 나출량과 재생율이 현저히 증가하였으나, G. lucidum은 원형질체의 나출량과 재생율이 감소하는 경향을 보였으며 C. versicolor의 경우에는 원형질체 나출량이 증가하였으나, 재생율은 무처리와 차이를 보이지 않았다.

• 한국균학회지
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• 제15권1호
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• pp.14-18
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• 1987

This experiment was undertaken to investigate proper conditions for protoplast formation from Lyophyllum ulmarium. Combination of Novozym 234, ${\beta}-Glucuronidase$ and ${\beta}-D-Glucanase$ with 0.6 M Sucrose was the most effective for isolation of protoplasts. The optimal reaction time of mycelium with the lytic mixture was 3 hrs in shaking condition at 120 strokes $min-^1$. When the mycelium of L. ulmarium was cultured for 6 days on yeast glucose agar medium at $25^{\circ}C$, the formation of protoplasts was effective. The yeast glucose agar medium stabilized with 0.6 M sucrose was the most effective for reversion of protoplasts.

• 한국균학회지
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• 제16권4호
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• pp.214-219
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• 1988

맛느타리버섯(Pleurotus sapidus)의 원형질체 분리 및 환원에 영향을 미치는 제 요인의 최적조건을 구명한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 원형질체의 분리에 알맞는 균사체의 배양은 ${30}^{\circ}C$의 버섯완전배지에서 4일이며, 세포벽 분해효소는 Novozym 234, ${\beta}-D-Glucanase$, ${\beta}Glucuronidase$를 각각 15mg/ml씩 혼합 사용하였을 때 가장 양호하였다. 또한 삼투압 조절제로는 0.6M Sucrose를 pH 조절없이 사용하고 ${30}^{\circ}C$에서 2시간동안 반응시키는 것이 가장 효과적이었다. 원형질체의 환원은 삼투압 조절제로 0.6M Sucrose를 사용하고, 0.75%의 한천을 피복하였을때 환원율이 2%로 최대였다.

• 한국균학회지
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• 제14권3호
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• pp.215-223
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• 1986

원형질체(原形質體)를 이용한 버섯의 육종연구(育種硏究)를 하는데 있어서 원형질체(原形質體) 재생(再生) 및 환원(還元)은 필수적인 과정이라고 할 수 있다. 식용(食用)버섯의 일종(一種)인 P. cornucopiae 노랑 느타리버섯의 원형질체(原形質體) 재생(再生)에 적합한 제조건(諸條件)에 대해서 조사한 바를 요약하면 다음과 같다. 원형질체(原形質體) 재생(再生)에 적합한 삼투압 조절제(調節劑)와 농도(濃度)는 0.6M sucrose로 MCM에서 5.21%의 높은 재생률(再生率)을 보였고, agar를 포함하지 않은 0.6M sucrose 삼투압 조절제(調節劑)나 0.6M液 sucrose+MMM 체배지(體培地)만을 overlaying한 경우에 재생률(再生率)이 높았다. 노랑 느타리버섯의 균사(菌絲) 생장(生長)을 촉진시킨 아미노산, 핵산 구성 성분의 종류(種類)와 원형질체(原形質體) 재생률(再生率)을 증가시킨 종류(種類)는 유사하며 큰 차이가 없었으나 비타민에서는 다소 다른 경향을 나타냈다. 재생률(再生率)을 증가시킨 영양원(營養源)들을 혼합했을 때 무첨가 배지 MMM에 비해 아미노산 혼합, 핵산 구성 성분 혼합에서는 재생률(再生率)이 증가했으며 비타민 혼합에서는 오히려 감소하였고 아미노산, 핵산 구성 성분, 비타민 모두가 첨가된 데서 가장 높은 재생률(再生率)을 나타냈다. 고체(固體) 배지(培地)에서 원형질체(原形質體)가 $1{\sim}2$일 배양(培養)되었을 때 광학 현미경하에서 재생(再生) 형태(形態)를 첫째, one or two directgerm tube, 둘째, bud like structure, 세째, yeast-likecell chain, 네째는 한 원형질체(原形質體)에서 direct germ tube와 yeast-like cell chain을 형성하는 형태를 관찰할 수 있었으며 $3{\sim}4$일 배양(培養)때는 균사(菌絲)가 branch를 형성하며 성장하였고 결국 완전한 균사체(菌絲體)로 되어 노랑 느타리 자실체(子實體)를 형성하였다.

• 농업과학연구
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• 제17권2호
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• pp.77-81
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• 1990

Chitin 합성 저해제인 buprofezin이 P. ostreatus 및 P. sajor-caju 균사의 생장과 원형질체 나출 및 재생에 미치는 영향을 조사한 바를 요약하면 buprofezin은 P. ostreatus 및 P. sajor-caju.의 균사생장을 심히 저해하였고 buprofezin의 첨가농도가 높을수록 균사생장 억제가 심하였다. Buprofezin 처리에 의하여 기균사가 증가하였으나 균사의 형태에는 변화가 없었다. 원형질체의 나출량은 buprofezin 200-500 ppm 첨가구의 균사에서 무처리보다 현저히 높은 결과를 보였고, 원형질체의 재생율은 buprofezin의 처리에 의하여 증가하였다.

• 한국균학회지
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• 제16권1호
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• pp.21-25
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• 1988

원형질체융합(原形質體融合)에 의한 영지(靈芝)의 육종(育種)을 위(爲)하여 기초자료를 얻고자 원형질체(原形質體)의 이출(裡出) 및 환원(還元)에 관한 실험결과(實驗結果)는 다음과 같다. 1. 원형질체이출(原形質體裡出)은 영지(靈芝)에서는 0.6M sucrose에 Novozym 234 $10mg{\cdot}ml^{-1}$를 단용(單用)하여 5시간(時間)정도 처리(處理)하고 4일간(日間) 배양(培養)한 균사체(菌絲體)를 사용(使用)하는 것이 좋았으며, G. sp.는 4일간(日間) 배양(培養)한 균사체(菌絲體)를 사용(使用)하고 0.6M sucrose에 Novozym 234와 ${\beta}-glucuronidase$를 각각 $10mg{\cdot}ml^{-1}$로 혼용(混用)하는 것이 좋았다. 2. 원형질체환원(原形質體還元)은 G. lucidum에서 0.6M sucrose를 첨가(添加)한 MCM에서 가장 양호(良好)하였으며, G. sp.에서는 0.6M sucrose를 첨가(添加)한 SCM에서 가장 효과적(效果的)이었다. 영지(靈芝)와 황지(黃芝)는 20% 이상(以上)의 무척 높은 환원률(還元率)을 보였다.

• 미생물학회지
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• 제30권6호
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• pp.514-518
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• 1992

The present study has been perromed to investigate the optimal conditions for protoplast formation and regeneration of oleandomycin-producing Streptomyces antibioticus (S. antibioticus) KCTC 1081. Mycelia were grown in YME medium containing 0.2% (w/v) glycine and converted into the protoplast by incubating at 35.deg.C for 60 minutes in protoplast buffer (P buffer) containing 4 mg/ml lysozyme. The reversion of protoplasts to the normal filamentous state was examined by the growth on various synthetic agar media. A high reversion rate was obtained by incubating the protoplasts on a hypertonic agar medium containing 20 mM $Mg^{++}$, 5 mM $Ca^{++}$ and 0.3 M sucrose at 28.deg.C for 5 days. From these experiments, we established the improved regeneration medium and a protocol which supports higher and more consistent levels of regeneration of S. antibioticus protoplasts. The regenerant showed an increased antimicrobial activity compared with that of the initial strain.n.n.