To find antitumor components in the hot water extract from the basidiocarps of Hypsizigus mamomus. protein-bound polysaccharides were purified and fractionated by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepharose CL-4B gel filtration chromatography. When a dose of 20 mg/kg/day was injected intraperitoneally into ICR mice. fraction IV of the component showed the highest inhibition ratio of 73.8% against the count of hemolytic plaque forming cells in mice to 3.2 times. when IV was about 30 KD and the fraction was composed of 76.1% polysaccharide and 4.9% protein. The hexosamine was detected in all the fractions, showing that the polysaccharide and protein moieties were bound each other.
Cha, Youn Jeong;Alam, Nuhu;Lee, Jae Seong;Lee, Kyung Rim;Shim, Mi Ja;Lee, Min Woong;Kim, Hye Young;Shin, Pyung Gyun;Cheong, Jong Chun;Yoo, Young Bok;Lee, Tae Soo
Mycobiology
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제40권4호
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pp.236-243
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2012
Pleurotus nebrodensis is an edible and commercially available mushroom in Korea. This study was conducted in order to evaluate the anticancer and immunopotentiating activities of crude polysaccharides, extracted in methanol, neutral saline, and hot water (hereafter referred to as Fr. MeOH, Fr. NaCl, and Fr. HW, respectively) from the fruiting bodies of P. nebrodensis. ${\beta}$-Glucan and protein contents in Fr. MeOH, Fr. NaCl, and Fr. HW extracts of P. nebrodensis ranged from 23.79~36.63 g/100 g and 4.45~6.12 g/100 g, respectively. Crude polysaccharides were not cytotoxic against sarcoma 180, HT-29, NIH3T3, and RAW 264.7 cell lines at a range of $10{\sim}2,000{\mu}g/mL$. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides resulted in a life prolongation effect of 11.76~27.06% in mice previously inoculated with sarcoma 180. Treatment with Fr. NaCl resulted in an increase in the numbers of spleen cells by 1.49 fold at the concentration of $50{\mu}g/mL$, compared with control. Fr. HW improved the immuno-potentiating activity of B lymphocytes through an increase in alkaline phosphatase activity by 1.65 fold, compared with control at $200{\mu}g/mL$. Maximum production of nitric oxide ($14.3{\mu}M$) was recorded in the Fr. NaCl fraction at $200{\mu}g/mL$. Production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), and interleukin-6 (IL-6) was significantly higher, compared to control, and IL-6 production was highest, in contrast to TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and positive control, concanavalin at the tested concentration of the various fractions. Results of the current study suggest that polysaccharides extracted from P. nebrodensis have a strong anticancer effect and may be useful as an ingredient of biopharmaceutical products for treatment of cancer.
Kim, Jeong-Hwa;Lee, Jae-Seong;Lee, Kyung-Rim;Shim, Mi-Ja;Lee, Min-Woong;Shin, Pyung-Gyun;Cheong, Jong-Chun;Yoo, Young-Bok;Lee, Tae-Soo
Mycobiology
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제40권3호
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pp.181-188
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2012
This study was initiated in order to investigate the anticancer and immunomodulating activities of crude polysaccharides extracted in methanol, neutral saline, and hot water (hereinafter referred to as Fr. MeOH, Fr. NaCl, and Fr. HW, respectively) from the fruiting bodies of Panellus serotinus. Content of ${\beta}$-glucan and protein in Fr. MeOH, Fr. NaCl, and Fr. HW extracts of P. serotinus ranged from 22.92~28.52 g/100 g and 3.24~3.68 g/100 g, respectively. In vitro cytotoxicity tests, none of the various fractions of crude polysaccharides were cytotoxic against sarcoma 180, HT-29, NIH3T3, and RAW 264.7 cell lines at the tested concentration. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides resulted in a life prolongation effect of 23.53~44.71% in mice previously inoculated with sarcoma 180. Treatment with Fr. HW resulted in an increase in the numbers of spleen cells by 1.3 fold at the concentration of $50{\mu}g/mL$ compared with control. Treatment with Fr. NaCl resulted in improvement of the immuno-potentiating activity of B lymphocytes by increasing the alkaline phosphatase activity by 1.4 fold, compared with control, at the concentration of $200{\mu}g/mL$. Among the three fractions, maximum nitric oxide ($13.48{\mu}M$) was recorded at $500{\mu}g/mL$ in Fr. HW. Production of tumor necrosis factor alpha, interleukin-$1{\beta}$, and interleukin-6 was significantly higher, compared to the positive control, concanavalin A, at the tested concentration. Therefore, treatment with crude polysaccharides extracted from the fruiting body of P. serotinus could result in improvement of antitumor activity.
본 연구에서는 불등풀가사리 유래 다당류의 기능성식품소재로의 활용성을 향상시키고자 불등풀가사리에 5종의 상업용 효소를 처리한 다음 분리된 다당류의 이화학적 특성 및 생리활성을 조사하였다. 효소 분해 구간의 다당 수율은 52.8-66.4%로 무처리 구간 50.6%에 비해 유의적으로 증가하였다. 이화학적 특성으로 총당 및 단백질 함량은 각각 71.04% 및 7.22%, uronic acid 및 sulfate 함량은 23.18 g/100 g 및 28.27%로 효소 분해를 통해 증가하였다. DPPH radical 소거활성 및 FRAP에 의한 항산화 활성은 23.10% 및 $218.50{\mu}M$을 나타내어 무처리 구간에 비해 항산화 활성이 우수하였으며, L132 세포 사멸에 대한 보호효과는 viscozyme 효소처리 구간($1{\mu}g/mL$)에서 $H_2O_2$를 처리한 구간 대비 세포 보호효과는 85.64%로 세포 활성이 증가하여 높은 세포 보호효과를 나타내었다. NO 생산량은 viscozyme 효소 처리구간 $5{\mu}g/mL$ 농도에서 $32.13{\mu}M$ 함량을 나타내어 LPS 대비 90% 높은 생성량을 나타내었으며, 4종의 암세포(A549, SNU719, HeLa 및 MCF7) 생존율은 $25{\mu}g/mL$농도에서 각각 69.57%, 61.06%, 52.74% 및 68.64%의 유의적으로 낮은 암세포 생존율을 나타내었다. 따라서 불등풀가사리의 효소 분해를 통해 다당의 이화학적 특성 및 생리활성이 향상됨에 따라 기능성 식품소재 로 다양하게 활용 가능할 것으로 사료된다.
Eggshell-based biocomposites have become attractive due to their exquisite nanostructure and biological properties, which are mainly composed of highly organized calcium carbonate crystals controlled by organic macromolecules such as proteins and polysaccharides. Here, we designed the recombinant fusion protein of a putative eggshell matrix protein named as GG1234 and a fluorescent reporter protein of DsRed. The protein was successfully over-expressed in E. coli and purified by Ni-NTA affinity chromatography. In vitro calcium carbonate crystallization was conducted in the presence of the fusion protein, and morphological change was investigated. The protein inhibited the calcite growth in vitro, and spherical calcium carbonate micro-particles with the diameter of about $20-30{\mu}m$ were obtained. We expect that this study would be helpful for better understanding of eggshell-based biomineralization.
해송이버섯 분말의 암세포성장억제효과의 증진을 위한 성분의 추출조건을 최적화하기 위하여 반응표면분석법을 사용하였다. 중심합성계획에 따라 추출조건의 독립변수(추출온도, 추출시간, 용매비)와 이에 따라 영향을 받는 수율과 추출물의 단백질 함량을 종속변수로 설정하였다. 수율과 단백질 함량이 높은 조건을 충족시키는 최적조건은 추출온도 $51.3^{\circ}C$, 추출시간 8.2시간, 그리고 추출용매비는 46.7 mL/g 으로 나타났다. 최적조건에서 추출되어진 조추출물을 이용하여 알코올을 이용하여 침전한 후 dialysis tube를 이용하여 저분자물질을 제거하여 조다당체를 얻었으며 조다당체를 이용하여 이온교환수지를 이용하여 산성다당체와 중성다당 체를 얻어 각각의 다당체의 암세포성장억제효과를 알아보았다. 위암세포주 AGS에는 산성다당체가 0.5 mg/mL의 농도에서 73.97%로 가장 높은 세포증식억제효과를 보였으며 간암세포주 HepG2에는 조다당체가 0.5 mg/mL의 농도에서 82.45%로 가장 높은 효과를 보였다. 그러나 결장암세포주 SW480에서는 모든 분획의 시료가 20%미만의 세포성장 억제효과를 보였다.
구름버섯 배양균사체와 야생 구름버섯 자실체로부터 얻은 protein-bound polysaccharide의 당과 단백질 함량을 비교하였을 때 배양균사체인 경우보다 야생 자실체의 경우가 당 함량이 더 높게 나타났으며 단백질 함량은 더 적게 나타났다. 구름버섯에서 부터 얻은 시료를 methanolysis시킨 후 HPLC로 분석하였을 때 배양균사체인 경우 4종류의 단당이 경출되었고 그중 mannose가 가장 함량이 많은 반면 야생 자실체인 경우 3종류의 단당이 경출되었으며 그중 glucose가 가장 많이 존재하였다. 구름버섯에서부터 얻은 시료에 lactose가 혼합되었을 경우 HPLC로 구별할 수 있었다. 구름버섯에서 얻은 시료의 구성 아미노산을 분석하였을 때 시료 모두에서동일한 17종의 아미노산이 검출되었다.
Dairy products are important diet source for human because of their balanced essential nutrients along with various vitamins and minerals. However, lactose in milk can result in diarrhea to some consumers with lactose intolerance. Soy milk has no lactose and is suitable as a substitute for diary milk in accordance with recent trend of replacing animal food with vegetable food. However, polysaccharides in soy milks are difficult for humans to digest, leading to flatulence. These polysaccharides can be decomposed into monosaccharides by lactic acid bacteria, and fermentation can improve food quality. Because mungbean has higher carbohydrate content than soybean, mung milk can be easily fermented than soy milk, resulting in vege yogurt with higher contents of lactic acid. In this study, fermentation characteristics of vege yogurt were analyzed with different ratio of soy milk and mung milk (0%, 25%, 50%, 75%, 100% and 0%+sucrose) and different fermentation time (0, 8, and 16 hours). In general, pH decreased as fermentation time increased. Overall, pH significantly decreased when the mung milk content in yogurt increased. All samples showed higher titratable acidity after fermentation and soy yogurt (mungbean 0%, 16 hours) with sucrose showed the highest value (6.825%). As fermentation time increase, viscosity increased. In 8 and 16 hours, mung milk yogurt (mungbean 100%) showed the lowest viscosity while soy milk yogurt (soybean 100%) with no sucrose showed the highest viscosity after 16 hours of fermentation. The contents of crude protein, crude fat and ash were measured for nutritional analysis. Soy milk (mungbean 0%, 0 hours) had the values of crude protein 2.9g, crude fat 1.8g, and ash 0.3g, and mung milk (mungbean 100%, 0 hours), showed the values of crude protein 1.7g, crude fat 0g, and ash 0.3g. To analyze the effect of the differences in the contents of nutrition between soy milk and mung milk on fermentation, the changes in sugar contents, and antioxidant capacity will be conducted depending on fermentation time. Our results will provide the information in researching plant beverages.
To examine influence of artificial digestive juice on the antitumor activity of Ganoderma lucidum-A(GL-A), protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum, we compared the digested protein-bound polysaccharide with undigested one both on immunopotentiating activity and influence of digestive juices. Protein-bound polysaccharide GL-B was obtained by digesting the antitumor component GL-A with artificial digestive Juices in vitro. When GL-A was administered orally to sarcoma 180 tumor-bearing ICR mice, the life prolonging effect was exhibited in a dose dependent manner Not only GL-A but GL-B increased the production of colony forming unit (CFU) to 10- and 8-fold of that of the control, respectively. Both of the protein-bound polysaccharides also showed the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 cell lines to 3.5-and 3.7-fold of that of the control, respectively: GL-A activated components of the alternative complement pathway, whereas GL-B did not. In humoral immunity GL-A increased the activity of alkaline phosphatase in differentiated B cells to 3 times and GL-B to 4 times of that of the control. These results showed that the artificial digestive juices had no influence on the antitumor activity of the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum and that its immunomodulating activity retained after treatment with artificial digestive juice. And this provides a basis of the protein-bound polysaccharide of Ganoderma lucidum as an peroral anticancer drug.
The effect of AF-toxin I produced by the strawberry pathotype of Alternaria alternata on the protein synthesis of susceptible strawberry protoplasts was examined by using the radiolabeled amino acids. The incorporation of the radiolabeled amino acids into newly synthesized proteins in the strawberry protoplasts was stimulated by the toxin treatment at relatively low concentrations (2.2$\times$10-11 to 2.2$\times$10-9 M), but not at higher concentrations (2.2$\times$10-8 to 2.2$\times$10-6 M). An one-dimensional SDS-polyacrylamide gel electrophoresis revealed no detectable differences in the proteins synthesized in both the toxintreated and untreated protoplasts. The susceptible strawberry protoplasts were treated with AF-toxin I and stained with Fluostain I to detect the extracellular polysaccharides. The toxin treatment induced the accumulation of extracellular polysccharides in a dose-dependent manner. These results indicate a transient activation of cellular metabolism in the susceptible cells by the toxin exposure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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