Hemogram and serum composition of pregnant rabbits were studied and the results obtained were as follows: 1. Erythrocyte, hemoglobin concentration and hemotocrit value of pregnant rabbits decreased at the late stage of gestation, and 1 week after delivery the values were recovered to the normal levels. Number of erythrocyte and hematocrit value were not found to be significant, but hemoglobin concentration showed significant differences at the third and fourth week of pregnancy. 2. Total leucocytes of pregnant rabbits increased continuously as gestation progresses and 1 week postpartum the values were returned to normal. Highly significant changes were observed in the third and the fourth week of pregnancy. Neutrophil was revealed highly significant rise at the third and the fourth week of gestation and 1 week postpartum, but lympocyte was decreased highly significantlly. 3. Serum calcium of pregnant rabbits revealed the tendency of decrease as gestation progresses and 1 week after delivery the value was returned to normal, and highly significant decrease was abserved at the fourth week. Serum inorganic phosphorus of pregnant rabbits showed highly significant decrease at the fourth week of gestation, but no differences were observed at the other period of gestation and 1 week postpartum. 4. Serum protein of pregnants rabbits showed the tendency of decrease continuously pregnancy progresses, and 1 week after delivery showed the normal values. Highly significant decrease was found at the fourth week of gestation. the levels of serum lipids in pregnant rabbits was unchanged untill the third week of pregnancy, but at the fourth week and 1 week postpartum, the rise was highly significant. The level of total serum cholesterol in pregnants rabbis was shown the tendency of decrease untill the end of the second week of gestation and significantly dropped at the third week, thereafter, the value was rose significantly at the fourth week of gestation and 1 week postpartum.
We have previously described a new multilayer alginate microcapsule system, and the goals of the present study were to assess the in vitro function of islets encapsulated in its inner layer, and the angiogenic ability of FGF-1 delivered from the external layer in an omentum pouch. Following isolation and culture, islets were encapsulated in the inner core of microspheres ($500-600{\mu}m$ in diameter) with a semi-permeable poly-L-ornithine (PLO) membrane separating two alginate layers, and both unencapsulated and encapsulated islet function was assessed by a dynamic glucose perifusion. For angiogenesis experiments, one group of microcapsules without FGF-1 (control) and another (test) containing FGF-1 with heparin encapsulated in the external layer were made. One hundred microcapsules of each group were transplanted in Lewis rats (n = 5/group) and were retrieved after 14 days for assessment of angiogenesis. Glucose perifusion of unencapsulated and encapsulated islets resulted in similar stimulation indices. The release of FGF-1 resulted in increased vascular density compared to controls. In conclusion, islets encapsulated in the core of multilayer alginate microcapsules maintain functionality and the microcapsule's external layer is effective in delivery of FGF-1 to enhance graft neovascularization in a retrievable omentum pouch.
Rui Chen;Mengting Wang;Qiaoling Qi;Yanli Tang;Zhenzhao Guo;Shuai Wu;Qiyan Li
Journal of Periodontal and Implant Science
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제53권1호
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pp.20-37
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2023
Purpose: Our pilot study showed that a 3-dimensional dual drug delivery scaffold (DDDS) loaded with Chinese herbs significantly increased the regenerated bone volume fraction. This study aimed to confirm the synergistic anti-inflammatory and osteogenic preclinical effects of this system. Methods: The targets and pathways of parthenolide and naringin were predicted. Three cell models were used to assess the anti-inflammatory effects of parthenolide and the osteogenic effects of naringin. First, the distance between the cementoenamel junction and alveolar bone crest (CEJ-ABC) and the bone mineral density (BMD) of surgical defects were measured in a rat model of periodontitis with periodontal fenestration defects. Additionally, the mRNA expression levels of matrix metallopeptidase 9 (MMP9) and alkaline phosphatase (ALP) were measured. Furthermore, the number of inflammatory cells and osteoclasts, as well as the protein expression levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and levels of ALP were determined. Results: Target prediction suggested prostaglandin peroxidase synthase (PTGS2) as a potential target of parthenolide, while cytochrome P450 family 19 subfamily A1 (CYP19A1) and taste 2 receptor member 31 (TAS2R31) were potential targets of naringin. Parthenolide mainly targeted inflammation-related pathways, while naringin participated in steroid hormone synthesis and taste transduction. In vitro experiments revealed significant antiinflammatory effects of parthenolide on RAW264.7 cells, and significant osteogenic effects of naringin on bone marrow mesenchymal stem cells and MC3T3-E1 cells. DDDS loaded with parthenolide and naringin decreased the CEJ-ABC distance and increased BMD and ALP levels in a time-dependent manner. Inflammation was significantly alleviated after 14 days of DDDS treatment. Additionally, after 56 days, the DDDS group exhibited the highest BMD and ALP levels. Conclusions: DDDS loaded with parthenolide and naringin in a rat model achieved significant synergistic anti-inflammatory and osteogenic effects, providing powerful preclinical evidence.
리포솜은 수십~수백 나노미터 크기의 소포체(small vesicle)로서 약물전달에 유용한 구조체이나 체내 혈류 순환계(blood circulatory system)에서 구조적 불안정성에 의해 체내 순환시간이 짧고 세망내피계(reticuloendothelial system)에 의해 소실되어 이를 개선하기 위한 다양한 연구가 시도되고 있다. 본 연구에서는 이당류(disaccharide)로서 락토오스와 슈크로스가 1,2-디스테아로일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민(1,2-Distearoylsn-glycero-3-phosphoethanolamine, DSPE)과 공유결합된 새로운 당-DSPE 유도체를 합성하고 이를 리포솜의 구성성분으로 하는 리포솜을 제조함으로써 리포솜의 표면이 이당으로 수식된 리포솜을 제조하였다. 제조된 리포솜의 입자크기는 대략 100 nm였으며, 표면전하 값은 당이 수식되지 않은 대조군 리포솜이 -10 mV를 나타내었으나 당-DSPE 유도체를 함유한 리포솜의 경우 리포솜 표면에 존재하는 당의 수산화기에 의하여 표면전하의 값은 -25 mV를 나타내었다. 리포솜 내부에 모델약물인 독소루비신(doxorubicin)의 로딩효율은 약 90%를 나타내었다. 당-DSPE 유도체 함유 리포솜의 in vitro 안정성은 혈청 내에서 단백흡착량의 변화 및 리포솜의 입자크기를 관찰하여 평가하였다. 당-인지질 유도체를 함유한 리포솜은 당-인지질 유도체를 함유하지 않은 리포솜 또는 폴리에틸렌글리콜(PEG) 수식 리포솜에 비해 단백흡착의 양과 혈청 내 입자크기의 변화가 적은 것으로 관찰되었다. 이당이 결합된 DSPE와 이를 함유한 리포솜은 혈액내 안정성이 향상되어 체순환계 내에서 장시간 순환이 가능한 약물전달체로서 유용할 것이라 사료된다.
Cha, In Jun;Lee, Davin;Park, Sung Soon;Chung, Chang Geon;Kim, Seung Yeon;Jo, Min Gu;Kim, Seung Yeol;Lee, Byung-Hoon;Lee, Young-Sam;Lee, Sung Bae
Molecules and Cells
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제43권10호
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pp.870-879
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2020
Dendrites require precise and timely delivery of protein substrates to distal areas to ensure the correct morphology and function of neurons. Many of these protein substrates are supplied in the form of ribonucleoprotein (RNP) complex consisting of RNA-binding proteins (RBPs) and mRNAs, which are subsequently translated in distal dendritic areas. It remains elusive, however, whether key RBPs supply mRNA according to local demands individually or in a coordinated manner. In this study, we investigated how Drosophila sensory neurons respond to the dysregulation of a disease-associated RBP, Ataxin-2 (ATX2), which leads to dendritic defects. We found that ATX2 plays a crucial role in spacing dendritic branches for the optimal dendritic receptive fields in Drosophila class IV dendritic arborization (C4da) neurons, where both expression level and subcellular location of ATX2 contribute significantly to this effect. We showed that translational upregulation through the expression of eukaryotic translation initiation factor 4E (eIF4E) further enhanced the ATX2-induced dendritic phenotypes. Additionally, we found that the expression level of another disease-associated RBP, fragile X mental retardation protein (FMRP), decreased in both cell bodies and dendrites when neurons were faced with aberrant upregulation of ATX2. Finally, we revealed that the PAM2 motif of ATX2, which mediates its interaction with poly(A)-binding protein (PABP), is potentially necessary for the decrease of FMRP in certain neuronal stress conditions. Collectively, our data suggest that dysregulation of RBPs triggers a compensatory regulation of other functionally-overlapping RBPs to minimize RBP dysregulation-associated aberrations that hinder neuronal homeostasis in dendrites.
Purpose: To investigate the expression of bone morphogenetic protein (BMP)-2/4 during eary tooth development after irradiation and calcium-deficient diet. Materials and Methods: The pregnant three-week-old Sprague-Dawley rats were used for the study. The control group was non-irradiation/normal diet group (Group 1), and the experimental groups were irradiation/normal diet group (Group 2) and irradiation/calcium-deficient diet group (Group 3). The abdomen of the rats at the 9th day of pregnancy were irradiated with single dose of 350 cGy. The rat pups were sacrificed at embryonic 18 days, 3 days and 14 days after delivery and the maxillae tooth germs were taken. The tissue sections of specimen were stained immunohisto-chemically with anti-BMP-2/4 antibody. Results: At embryo-18 days, immunoreacivity for BMP-2/4 of the Group 1 was modetate in stratum intermedium of dental organ and weak in dental papilla and dental follicle, but that of Group 2 was weak in cell layer of dental organ, and no immunoreacivity was shown in dental papilla and dental follice of Group 2 and in all tissue components of the Group 3. At postnatal-3 days, immunoreacivity for BMP-2/4 of the Group 1 was strong in cell layer of dental organ, odontoblasts and developing alveolar bone, but that of Group of 2 and Group 3 was weak in odontoblasts and developing alveolar bone. At postnatal-14 days, immunoreacivity for BMP-2/4 of the Group 1 was strong in newly formed cementum, alveolar bone and odontoblasts, but that of Group 2 was weaker than that of Group 1. In the Group 3, tooth forming cell layer showed weak immunoreactivity, but other cell layers showed no immunoreactivity. Couclusion : The expression of bone morphogenetic protein (BMP)-2/4 during early tooth development was disturbed after irradiation and calcium-deficient diet.
본 연구는 특정 아미노산들로 구성된 단위체가 반복되는 형태를 가지는 반복단위 단백질을 유전공학적으로 합성하는 방법들과 응용사례들을 소개하고 있다. 유전공학적 합성법은 단위체의 반복횟수를 정확하게 제어하면서 인식부위의 제한을 없애서 원하는 단백질만을 발현할 수 있도록 발전해왔으며, 최근 소개된 RDL과 CCM 방법에 의하여 가능해졌다. 반복단위 단백질의 응용사례로는 대표적으로 ELP, SLP, Prolamin 등의 단백질을 합성하여 생체재료나 약물전달시스템을 개발하는데 응용하거나, ELFSE의 drag-tag 개발에 응용되는 연구들이 진행되고 있다. 화학적으로 합성된 고분자에 비해 유전공학적으로 합성된 반복단위 고분자의 경우, 고유의 물리적 성질과 함께 환경에 미치는 유해함이 상대적으로 적다는 점 때문에 미래의 신소재로 기대되고 있다.
Alginate/carboxymethyl scleroglucan (CMSG) hydrogels were suggested as a novel carrier for the controlled release of protein drugs. The drug release characteristics of alginate hydrogels were improved by CMSG addition. Scleroglucan (Sclg) was carboxymethylated using monochloroacetic acid in aqueous alkaline medium. Alginate/CMSG hydrogels were prepared by dropping the mixture solution of alginate/CMSG into calcium chloride solution. The swelling behaviors and drug release characteristics of the hydrogels were investigated in the buffers of pH 1.2 or 7.4. As the CMSG content increased in the hydrogels, the swelling ratio of the alginate/CMSG hydrogel increased rapidly in the buffer of pH 7.4. At pH 1.2, however, the swelling ratio significantly decreased compared to that at pH 7.4. According to in vitro release tests, only 15% of ovalbumin, investigated as a model protein drug, was released from the alginate/CMSG hydrogels at pH 1.2 within 6 h. At pH 7.4, however, the drug release significantly increased due to the rapid swelling of the hydrogels. The release and swelling behaviors of the hydrogels could be controlled by changing the CMSG content in the hydrogels. These results supported the use of alginate/CMSG hydrogels as a suitable carrier for the controlled release of protein drugs in a pH responsive manner.
Karaoz, Erdal;Tepekoy, Filiz;Yilmaz, Irem;Subasi, Cansu;Kabatas, Serdar
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제62권2호
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pp.153-165
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2019
Objective : Spinal cord injury (SCI) is a very serious health problem, usually caused by a trauma and accompanied by elevated levels of inflammation indicators. Stem cell-based therapy is promising some valuable strategies for its functional recovery. Nestin-positive progenitor and/or stem cells (SC) isolated from pancreatic islets (PI) show mesenchymal stem cell (MSC) characteristics. For this reason, we aimed to analyze the effects of rat pancreatic islet derived stem cell (rPI-SC) delivery on functional recovery, as well as the levels of inflammation factors following SCI. Methods : rPI-SCs were isolated, cultured and their MSC characteristics were determined through flow cytometry and immunofluorescence analysis. The experimental rat population was divided into three groups : 1) laminectomy & trauma, 2) laminectomy & trauma & phosphate-buffered saline (PBS), and 3) laminectomy+trauma+SCs. Green fluorescent protein (GFP) labelled rPI-SCs were transplanted into the injured rat spinal cord. Their motilities were evaluated with Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) Score. After 4-weeks, spinal cord sections were analyzed for GFP labeled SCs and stained for vimentin, $S100{\beta}$, brain derived neurotrophic factor (BDNF), 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase (CNPase), vascular endothelial growth factor (VEGF) and proinflammatory (interleukin [IL]-6, transforming growth factor $[TGF]-{\beta}$, macrophage inflammatory protein [MIP]-2, myeloperoxidase [MPO]) and anti-inflammatory (IL-1 receptor antagonis) factors. Results : rPI-SCs were revealed to display MSC characteristics and express neural and glial cell markers including BDNF, glial fibrillary acidic protein (GFAP), fibronectin, microtubule associated protein-2a,b (MAP2a,b), ${\beta}3$-tubulin and nestin as well as anti-inflammatory prostaglandin E2 receptor, EP3. The BBB scores showed significant motor recovery in group 3. GFP-labelled cells were localized on the injury site. In addition, decreased proinflammatory factor levels and increased intensity of anti-inflammatory factors were determined. Conclusion : Transplantation of PI-SCs might be an effective strategy to improve functional recovery following spinal cord trauma.
Gwanghee Kim;Yoojin Lee;Jin Sun You;Wontae Hwang;Jeewon Hwang;Hwa Young Kim;Jieun Kim;Ara Jo;In ho Park;Mohammed Ali;Jongsun Kim;Jeon-Soo Shin;Ho-Keun Kwon;Hyun Jik Kim;Sang Sun Yoon
IMMUNE NETWORK
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제23권4호
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pp.31.1-31.18
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2023
Evidence suggests that the human respiratory tract, as with the gastrointestinal tract, has evolved to its current state in association with commensal microbes. However, little is known about how the airway microbiome affects the development of airway immune system. Here, we uncover a previously unidentified mode of interaction between host airway immunity and a unique strain (AIT01) of Staphylococcus epidermidis, a predominant species of the nasal microbiome. Intranasal administration of AIT01 increased the population of neutrophils and monocytes in mouse lungs. The recruitment of these immune cells resulted in the protection of the murine host against infection by Pseudomonas aeruginosa, a pathogenic bacterium. Interestingly, an AIT01-secreted protein identified as GAPDH, a well-known bacterial moonlighting protein, mediated this protective effect. Intranasal delivery of the purified GAPDH conferred significant resistance against other Gram-negative pathogens (Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter baumannii) and influenza A virus. Our findings demonstrate the potential of a native nasal microbe and its secretory protein to enhance innate immune defense against airway infections. These results offer a promising preventive measure, particularly relevant in the context of global pandemics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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