Silk sericin protein was hydrolyzed by seven proteolytic enzymes in order to examine the effectiveness of the hydrolysates in binding calcium. The amino acid nitrogen content of hydrolysates from Flavourzyme was higher than that for other enzymes, and its calcium binding capacity showed a dose-dependent increase. We examined the effects of calcium binding peptide from sericin hydolysates on the bioavailability of Ca-deficient rats. Three-week-old male rats were fed an Ca-deficient diet for three weeks. Rats were divided into four groups (DD: non-treated group on calcium deficient diet; DD+MC: milk-calcium treated group; DD+OC: organic calcium made using sericin hydolysates; and DD+IC: inorganic calcium ($CaCl_2$). After oral administration of calcium supplements for one week, the calcium content of the serum and liver were significantly higher in DD+OC ($101.7{\mu}g$/mL and $49.3{\mu}g$/mL) and DD+MC ($83.6{\mu}g$/mL and $42.8{\mu}g$/mL) than DD ($86.3{\mu}g$/mL and $43.4{\mu}g$/mL). The alkaline phosphatase (ALP) content in the treated groups was significantly lower than DD, but no significant difference among groups was shown. Aspartate aminotransferase (AST) levels did not show any significant difference between groups. Alanine aminotransferase (ALT) levels were significantly reduced compared to the DD group. In conclusion, binding calcium to peptides from sericin hydrolysates seems to improve its bioavailability, and to hasten the cure of calcium deficiency in experimental rats.
동부앙금의 단백질 함량이 높을수록 물결합력과 호화 개시 온도는 높았으나 팽윤력과 용해도, 광투과도는 낮은 값을 보였다. 최고 점도와 breakdown은 낮았으나, consistency와 setback은 높은 값을 보였다. 동부겔을 24시간과 48시간 실온에서 저장하면서 실시한 관능검사 결과는 단백질 함량이 높을수록 색깔과 투명도가 더 높은 값을 보였고 저장기간이 길수록 견고성, 응집성, 탄성, 종합적인 맛에서 더 높은 값을 보였으며 기계적 물성 검사 결과는 24시간 저장한 동부겔에서는 견고성, 껌성, 씹힘성의 특성치에서 단백질 함량이 높을수록 유의적으로 높았다. 그리고 48시간 저장한 동부겔에서는 견고성, 응집성, 껌성, 씹힘성의 특성치에서 유의적인 차이를 보였는데 응집성만 단백질 함량이 높을수록 더 낮은 값을 보였다.
pH 전이공정에 따라 어육 단백질을 회수하고 드럼건조하여 분말 단백질을 제조한 후, 이들 단백질의 몇 가지 식품학적 기능성을 측정하였다. 건조 어육 단백질 분말의 용해도는 pH 7.0으로 조절한 단백질이 PH 5.5에 비하여 높았다. 유화활성지표는 $0.035\sim0.043m^2/g-protein$(pH 5.5 단백질 분말)로 비교적 낮았다. 그리고 유화안정성, 거품능 및 거품안정성은 관측되지 않았다. 점도 값은 수리미 단백질의 1/10에 불과한 $50,200\sim39,000\;cP$의 범위였다. 수분과 지방흡착능력은 각각 $2.63\sim2.89g-water/g$과 $2.13\sim2.17g-oil/g$이었고, 입자의 크기와 pH에 따른 영향은 없었다. 이 같은 실험 결과는 지방흡착을 위한 육의 대체제로 patty 제품 등에 건조 어육 단백질을 적용할 수 있을 것으로 보인다.
실리카 입자를 기공 형성제로 사용하여 다공성 키토산 및 키틴 막을 제조하였다. 다공성 막의 제조는 다음의 3단계 절차로서 수행되었다: (1) 키토산 용액에 실리카 입자를 첨가시켜 필름을 형성시킨 후, (2) 이 필름을 알카리 용액에 침지시켜 실리카 입자를 제거하여 다공성의 키토산 막을 제조하였으며, (3) 다공성 키토산 막을 acetic anhydride를 사용하여 아세틸화시킴으로서 다공성 키틴 막을 제조하였다. 물리적 강도가 우수하고, 적절한 순수 투과량을 갖는 다공성 키토산 막과 키틴 막의 최적 제막조건이 제시되었다. 단백질 친화성을 부여하기 위해 다공성 키토산 막에 반응성 염료인 Cibacron Blue 3GA를 고정화시켰으며, BSA 단백질 및 lysozyme 효소의 흡착실험을 수행하여 친화 키토산 막 및 키틴 막의 단백질 결합용량을 측정하였다. 친화 키토산 막의 BSA 단백질 결합용량은 약 22 mg/mL이었으며, 친화 키틴 막의 lysozyme 효소 결합용량은 약 26 mg/mL로서 이는 키토산 또는 키틴을 기반으로 하여 제조된 hydrogel bead의 단백질 결합용량보다 수${\sim}$수십 배 큰 값으로서, 향후 막여과 크로마토그래피용 친화 막으로의 효과적인 활용이 기대된다.
Acute respiratory virus infectious diseases are a growing health problem, particularly among children and the elderly. Much effort has been made to develop probiotics that prevent influenza virus infections by enhancing innate immunity in the respiratory tract until vaccines are available. Lactobacillus plantarum GB-LP2, isolated from a traditional Korean fermented vegetable, has exhibited preventive effects on influenza virus infection in mice. To identify the molecular basis of this strain, we conducted a whole-genome assembly study. The single circular DNA chromosome of 3,284,304 bp was completely assembled and 3,250 protein-encoding genes were predicted. Evolutionarily accelerated genes related to the phenotypic trait of anti-infective activities for influenza virus were identified. These genes encode three integral membrane proteins, a teichoic acid export ATP-binding protein and a glucosamine - fructose-6-phosphate aminotransferase involved in host innate immunity, the nonspecific DNA-binding protein Dps, which protects bacteria from oxidative damage, and the response regulator of the three-component quorum-sensing regulatory system, which is related to the capacity of adhesion to the surface of the respiratory tract and competition with pathogens. This is the first study to identify the genetic backgrounds of the antiviral activity in L. plantarum strains. These findings provide insight into the anti-infective activities of L. plantarum and the development of preventive probiotics.
과맥 15개(個) 품종(品種) 또는 선발조건(選拔係統)(3개(個) 도원(道院)에서 재배(栽培)한 것)에 대(對)하여 단백질(蛋白質), 탄수화물(炭水化物) 및 P, K, Ca, Mg를 분석(分析)하고 염색법(染色法)과 Biuret에 의(依)한 단백질(蛋白質) 검정(檢定)을 하였으며 이들 상호간(相互間)의 상관관계(相關關係)를 분석(分析)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 단백질함량(蛋白質含量)은 평균(平均) 7.67%(최대(最大)백동 10.3, 최소(最少)방주 6.0%)로 대맥(大麥)보다 낮았으며 염색법(染色法)(DBC)과는 r=-0.769, Biuret과는 0.616으로 1%에서 유의성(有意性)을 보였다. 2. 단백질함량(蛋白質含量)은 $P_2O_5$와 r=0.607, MgO와 0.498로 각각 1% 및 5%에서 유의성(有意性)을 보였다. 3. 방사선(放射線) 육종(育種) 계열(係列)의 단백함량(蛋白含量)은 최대(最大) 8.40%, 최소(最少) 6.75%로 큰 차이를 보였다. 4. 과맥은 대맥(大麥)보다 탄수화물(炭水化物)이 적은 편이나 무기성분(無機成分) 함량(含量)은 높은 편이다. 5. Ca는 K와 r=-0.560의 1%에서 유의상관(有意相關)을 보여 곡실(穀實)에로의 전류(轉流) 또는 흡수(吸收)에서의 길항적(拮抗的) 관계(關係)가 있는 것 같다. 6. 탄수화물함량(炭水化物含量)은 유의성(有意性)은 없으나 단백질함량(蛋白質含量)과 최대부상관(最大負相關)을 보였다. 7. 고단백품종(高蛋白品種)(백동)보다 저단백품종(低蛋白品種)(방주)은 시비구(施肥區)(16%)에서나 무비구(無肥區)(47%)에서 수량(收量)이 높았다.
Park Jong-Sun;Cho Jae-Youl;Kim Sung-Soo;Bae Hyun-Jin;Han Jeung-Whan;Lee Hyang-Woo;Hong Sung-Youl
Archives of Pharmacal Research
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제29권5호
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pp.384-393
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2006
Protein carboxylmethylation methylates the free carboxyl groups in various substrate proteins by protein carboxyl O-methyltransferase (PCMT) and is one of the post-translational modifications. There have been many studies on protein carboxylmethylation. However, the precise functional role in mammalian systems is unclear. In this study, immunoglobulin, a specific form of $\gamma-globulin$, which is a well-known substrate for PCMT, was chosen to investigate the regulatory roles of protein carboxylmethylation in the immune system. It was found that the anti-BSA antibody could be carboxylmethylated via spleen PCMT to a level similar to $\gamma-globulin$. This carboxylmethylation increased the hydrophobicity of the anti-BSA antibody up to 11.4%, and enhanced the antigen-binding activity of this antibody up to 24.6%. In particular, the Fc region showed a higher methyl accepting capacity with 80% of the whole structure level. According to the amino acid sequence alignment, indeed, 7 aspartic acids and 5 glutamic acids, as potential carboxylmethylation sites, were found to be conserved in the Fc portion in the human, mouse and rabbit. The carboxylmethylation of the anti-BSA antibody was reversibly demethylated under a higher pH and long incubation time. Therefore, these results suggest that protein carboxylmethylation may reversibly regulate the antibody-mediated immunological events via the Fc region.
Background: Peste des petits ruminants (PPR) is an infectious disease caused by the peste des petits ruminants virus (PPRV) that mainly produces respiratory symptoms in affected animals, resulting in great losses in the world's agriculture industry every year. Single-domain variable heavy chain (VHH) antibody fragments, also referred to as nanobodies, have high expression yields and other advantages including ease of purification and high solubility. Objectives: The purpose of this study is to obtain a single-domain antibody with good reactivity and high specificity against PPRV. Methods: A VHH cDNA library was established by immunizing camels with PPRV vaccine, and the capacity and diversity of the library were examined. Four PPRV VHHs were selected, and the biological activity and antigen-binding capacity of the four VHHs were identified by western blot, indirect immunofluorescence, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) analyses. ELISA was used to identify whether the four VHHs were specific for PPRV, and VHH neutralization tests were carried out. ELISA and western blot analyses were used to identify which PPRV protein was targeted by VHH2. Results: The PPRV cDNA library was constructed successfully. The library capacity was greater than 2.0 × 106 cfu/mL, and the inserted fragment size was approximately 400 bp to 2000 bp. The average length of the cDNA library fragment was about 1000 bp, and the recombination rate was approximately 100%. Four single-domain antibody sequences were selected, and proteins expressed in the supernatant were obtained. The four VHHs were shown to have biological activity, close affinity to PPRV, and no cross-reaction with common sheep diseases. All four VHHs had neutralization activity, and VHH2 was specific to the PPRV M protein. Conclusions: The results of this preliminary research of PPRV VHHs showed that four screened VHH antibodies could be useful in future applications. This study provided new materials for inclusion in PPRV research.
소의 중추신경계의 신경전달인자에 의한 세포막에서의 정보전달 과정에 관여하는 PLC 활성화에 G-단백질의 관여 여부를 관찰하기 위하여 소의 뇌조직의 PLC ${\beta}$, ${\gamma}$ 및 ${\delta}$를 얻어 각 isozyme의 특성을 관찰하였다. 기질용액에 phosphatidyl choline(PC)을 첨가시 PLC 각 isozyme 마다 정도의 차이는 있으나 증가 양상을 보였으며 PLC ${\delta}$는 $100{\mu}M$$Ca^{2+}$ 농도에서 높은 활성도 증가를 보였다. 세포막 소포체를 형성하기 위하여 $PIP_2$기질과 PC에 detergent로 cholate와 deoxycholate 농도에 따른 PLC 효과 관찰에서 cholate 농도 0.2%에서 1%까지 증가할 때 효소 활성도의 지속적인 상승이 관찰되었고, deoxycholate는 농도가 0.2%에서 높았다가 0.4%에서 낮아졌고 1%까지 증가함에 따라 PLC 효소 활성도는 약간 증가하였다. 기질액에 뇌추출액을 첨가하여 cholic acid 농도에 따른 PLC의 효과를 관찰한 결과 cholic acid 농도 0.2%에서 보다 1%에서 각 isozyme 모두에서 PLC활성도가 증가하였다. 소의 여러 장기에서 PLC isozyme의 분포정도를 방사면역측정방법으로 관찰하였을 때 뇌조직에 가장 많이 분포하고 있으며 특히 PLC ${\beta}$, ${\gamma}$가 많았고, PLC ${\delta}$는 부신에서 가장 많이 분포하였다. 다음으로 PLC ${\beta}$는 부신과 위, PLC${\gamma}$는 부신과 폐순이었다. PLC 효소가 활성화될 때 G-단백질의 관여 여부에 관하여 cholate 0.2%와 0.1%에서 G-단백질과 GTPrS 및 PLC의 결합정도의 관찰은 조직분쇄시료를 소의 뇌 및 부신조직을 이용하여 $^{35}S$-GTPrS 첨가시와 단세포군 항체를 이용한 경우 모두에서 1.49% 이하의 낮은 결합 정도를 관찰하였다. 그래서 정제된 PLC isozyme과 G-단백질 $Go{\alpha}$, $G{\beta}{\gamma}$, Gmix, $Gi{\alpha}$ 및 $Gt{\alpha}$ 각각에 대한 효과 관찰에 서 $Go{\alpha}$와 $G{\beta}{\gamma}$는 PLC ${\beta}$와 ${\delta}$의 활성도를 증가시켰고, PLC ${\gamma}$는 별 영향이 없었으며 Gmix에서는 세효소 모두 증가시켰다. $Gi{\alpha}$는 PLC ${\beta}$와 ${\gamma}$에서만 증가하였다. $Gt{\alpha}$는 PLC ${\beta}$ 및 ${\gamma}$에서 억제하였고 PLC ${\delta}$에서는 증가 양상을 보였다. 그러므로 PLC 활성화에 G-단백질의 관여가 인지되며 PLC isozyme과 G-단백질의 종류에 따라 대개의 경우 증가하는 경향이나 일부는 억제 내지는 별 영향이 없는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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