• 제목/요약/키워드: protease treatment

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Bacillus amyloliquefaciens k의 생육(生育)과 ${\alpha}-Amylase$ 생산(生産)에 대한 Tunicamycin의 영향(影響) (Effect of Tunicamycin on the Cell Growth and ${\alpha}-Amylase$ Production of Bacillus amyloliquefaciens K)

  • 김기철;산기진수;고월소;전촌학조
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제24권4호
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    • pp.252-259
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    • 1981
  • Bacillus amyloliquefaciens K의 생육(生育)과 ${\alpha}-amylase$ 생산(生産)에 대한 Tunicamycin (TM)의 영향(影響)을 검토(檢討)한 결과(結果) 최소생육저지농도(最少生育沮止濃度)는 $0.25{\mu}\textrm{g}/m\ell$이고 생산(生産)된 ${\alpha}-amylase$의 내열성(耐熱性)은 $50^{\circ}C$이었다. TM 첨가량(添加量)이 $1{\mu}\textrm{g}/m\ell$인 액체배지(液體培地)에서 10시간(時間) 진탕배양(振湯培養)할 경우 균(菌)의 형태(形態)는 간형(桿形)에서 부정형(不定形)의 구형(球形)으로 변형(變形)되었으며 24시간배양(時間培養)으로 용해(溶解)되었다. TM와 자외선의 처리로 분리(分離)한 his-, $TM^{\tau}$ 변이주(變異株)의 생육(生育)은 친주(親株)와 같은 경향(傾向) 이었으나 ${\alpha}-amylase$, protease, 및 RNase의 생산량(生産量)은 떨어지는 경향(傾向)이다.

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Streptomyces 속균이 생산하는 Pretense에 관한 연구 (Studies on the Protease procuced by Streptomyces sp.)

  • 김광현;서정훈
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제2권1호
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    • pp.13-17
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    • 1974
  • 토양에서 분리한 Streptomyces 속 중에 금속을 함유하고 있는 protease를 강하게 분필하는 균일 주를 선별하여 그 효소학적 성질 멸가지를 알아본 결과는 다음과 같다. 1 본 효소의 작용 최적 pH는 중성부근이며 최적온도는 37$^{\circ}C$ 부근이다. 2. 본 효소는 중성부근에서 비교적 안정하며 열에는 비교적 불안정하며 37$^{\circ}C$에서 100분간 열처리했을때 약 50% 가량 실활하였다. 3. Hg$^{++}$, Cu$^{++}$, Cd$^{++}$, Ag$^{+}$ 등에 의하여 강하게 조해되며, Mn$^{++}$, $Mg^{++}$, $Ca^{++}$, Pb$^{++}$, $Ba^{++}$ 등에는 별 영향을 받지 않는다. 4. oxalate, citrate, 2-4-dinitrophenol, $\varepsilon$-amino caproic acid, thiourea, cysteine에 의해서는 강하게 조해되었다.

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$CaCO_3$가 Bacillus subtilis에 의한 청국장메주 발효에 미치는 영향 (Effect of $CaCO_3$ on the Chonggukchang Meju Fermentation by B. subtilis)

  • 이강무;이시경;주현규
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제37권6호
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    • pp.421-426
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    • 1994
  • $CaCO_3$가 청국장 메주 발효에 미치는 영향을 구명하고자 $CaCO_3$ 0, 0.01, 0.1, 1%씩 되게 각각 첨가한 청국장 메주에 B. subtilis를 접종하여 청국장 메주 발효 중의 성분 및 단백질 분해 효소력과 아미노산, 비타민 B복합체의 함량을 조사하였다. 발효중 $CaCO_3$첨가구의 품온은 대조구보다 높았으며, 적정산도는 $CaCO_3$첨가구에서 첨가 농도가 높아짐에 따라 대조구보다 감소하였고, 단백질 분해효소력 및 아미노태 질소함량은 0%<0.01%<0.1%<1%의 $CaCO_3$ 첨가 순으로 $CaCO_3$첨가구가 높았다. 아미노산 함량은 시험구 모두 증가하였으나, $CaCO_3$첨가구와 대조구간의 큰 차이는 없었다. 그러나 vitamin B복합체의 함량은 $CaCO_3$첨가구가 대조구보다 증가하였으며, 그중 0.01% 첨가구가 가장 높았다.

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효모 자가분해물의 새로운 제조방법 개발 및 품질검사 (Development of a New Processing Method and Quality Evaluation of Yeast Autolyzate)

  • 이영춘;김용수
    • 한국식품과학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.78-82
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    • 1993
  • 이 연구는 재래방법과 비교하여 수율이 높고 품질이 향상된 효모 자가분해들의 제조방법을 연구하는데 그 목적을 두었다. 제빵용 생 효모에 glucanase와 protease의 복합효소를 작용시킨 다음, 10,000 psi의 고압으로 균질하면 약 85.3%의 효모 세포벽이 파손되었다. 세포벽이 파손된 효모를 사용하여 자가분해 시키는데 가장 적당한 조건을 반응 표변방법(RSM)을 이용하여 조사한 결과는 pH 7.0, 온도 $30^{\circ}C$ 에탄올 4%, 소금 3%이었다. 세포벽이 파손된 효모를 위와 같은 최적조건에서 3일간 분해시켜 얻은 효모 자가분해물의 수율은 2.6배 향상되었으며, 총 아미노산의 함량도 현저히 증가(2.8배)하였다. 그리고 관능적인 품질도 재래방법으로 제조된 시료보다 고기 향미가 많고, 이미-이취가 현저하게 적어서 전체인 기호도에서도 상당히 우수한 것으로 평가되었다.

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Identification and Antimicrobial Activity Detection of Lactic Acid Bacteria Isolated from Corn Stover Silage

  • Li, Dongxia;Ni, Kuikui;Pang, Huili;Wang, Yanping;Cai, Yimin;Jin, Qingsheng
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제28권5호
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    • pp.620-631
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    • 2015
  • A total of 59 lactic acid bacteria (LAB) strains were isolated from corn stover silage. According to phenotypic and chemotaxonomic characteristics, 16S ribosomal DNA (rDNA) sequences and recA gene polymerase chain reaction amplification, these LAB isolates were identified as five species: Lactobacillus (L.) plantarum subsp. plantarum, Pediococcus pentosaceus, Enterococcus mundtii, Weissella cibaria and Leuconostoc pseudomesenteroides, respectively. Those strains were also screened for antimicrobial activity using a dual-culture agar plate assay. Based on excluding the effects of organic acids and hydrogen peroxide, two L. plantarum subsp. plantarum strains ZZU 203 and 204, which strongly inhibited Salmonella enterica ATCC $43971^T$, Micrococcus luteus ATCC $4698^T$ and Escherichia coli ATCC $11775^T$ were selected for further research on sensitivity of the antimicrobial substance to heat, pH and protease. Cell-free culture supernatants of the two strains exhibited strong heat stability (60 min at $100^{\circ}C$), but the antimicrobial activity was eliminated after treatment at $121^{\circ}C$ for 15 min. The antimicrobial substance remained active under acidic condition (pH 2.0 to 6.0), but became inactive under neutral and alkaline condition (pH 7.0 to 9.0). In addition, the antimicrobial activities of these two strains decreased remarkably after digestion by protease K. These results preliminarily suggest that the desirable antimicrobial activity of strains ZZU 203 and 204 is the result of the production of a bacteriocin-like substance, and these two strains with antimicrobial activity could be used as silage additives to inhibit proliferation of unwanted microorganism during ensiling and preserve nutrients of silage. The nature of the antimicrobial substances is being investigated in our laboratory.

오징어 먹즙 첨가가 저 식염 오징어 젓갈의 단백질분해 특성에 미치는 영향 (Influences of Squid Ink Added to Low-Salted Squid Jeot-gal on Its Proteolytic Characteristics)

  • 오성천
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.348-355
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    • 2013
  • 오징어 젓갈에 오징어 먹즙을 2% 및 4% 농도로 첨가하고 $10^{\circ}C$에서 8주일간, $20^{\circ}C$에서 32일간 숙성시키면서 아미노태 질소와 근육단백질 변화를 분석한 결과는 다음과 같다. 오징어 먹즙이 첨가되지 않은 오징어 젓갈의 아미노태 질소는 식염 농도가 낮고 숙성온도가 높을수록 숙성 후반까지 계속 유의성 높게 증가하여 숙성이 촉진되었으며 오징어 근육의 단백질 변화는 myosin heavy chain이 숙성 초반에 현저히 분해되지만 actin의 변화는 거의 없어서 protease에 강하였다. 오징어 먹즙을 첨가한 오징어 젓갈의 아미노태 질소 함량은 숙성후반까지 계속 증가하였으나 증가폭은 무 첨가군에 비하여 적었으며 오징어 근육 단백질 중 myosin heavy chain은 숙성 중반에 현저히 분해되었으며 식염농도가 높고, 온도가 낮은 먹즙 첨가군은 분해 속도가 느렸다.

혈관내피세포에서 트롬빈이 TNF-$\alpha$에 의해 유도되는 IL-6에 미치는 영향 (Effect of Thrombin on the TNF-$\alpha$ Induced IL-6 Production in HUVECs)

  • 배종섭;박문기
    • KSBB Journal
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    • 제25권1호
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    • pp.11-17
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    • 2010
  • 본 논문에서는 혈관내피세포에서 저농도의 트롬빈이 TNF-$\alpha$가 NF-kB의 활성화를 통해 생성되는 IL-6의 생성량에 미치는 영향을 관찰하였다. TNF-$\alpha$는 혈관내피세포에서 NF-kB의 활성화를 통해 염증을 유발시킨다는 것은 잘 알려진 사실이다. 이 논문에서는 TNF-$\alpha$가 매개하는 염증작용에서 저농도의 트롬빈은 TNF-$\alpha$가 생성시키는 IL-6의 생성량을 감소시켰고, 여기에는 트롬빈의 수용체인 PAR-1이 작용하다는 것을 확인하였다. 뿐만 아니라, 세포내의 PI3-Kinase 역시 저농도 트롬빈이 관여한다는 것을 확인하였다. 이것은 저농도의 트롬빈이 수용체인 PAR-1을 활성화시키고, 활성화된 PAR-1 은 PI3-Kinase의 활성화을 통해 항염증작용을 보여준디는 것을 의미한다. 이 결과는 향후 중증 패혈증 및 각종 염증질환을 치료할 수 있는 신약개발에 있어 중요한 단서를 제공하고 혈관내피세포에서 아직 명확하게 밝혀지지 않은 트롬빈의 염증작용 및 항염증작용의 기전을 밝히는데 좋은 정보를 제공할 것이다.

폐암세포주(肺癌細胞株) H460에 대(對)한 보중익기탕(補中益氣湯)의 세포고사효과(細胞枯死效果) 및 기전연구(機轉硏究) (Study on Apoptosis Effect and Mechanism by Bojungikki-tang on Human Cancer Cell Line H460)

  • 이승언;홍재의;이시형;신조영;노승석
    • 대한한방내과학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.274-288
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    • 2004
  • Objectives : This study was designed to evaluate the effect on cytotoxicity of Bojungikki-tang(BIT) in human lung cancer H460 cells. Methods : BIT-induced cell death was confirmed as apoptosis characterized by chromatin condensation and increase of the $sub-G_1$, DNA content. It was tested whether the water extract of BIT affects the cell cycle regulators such as, p2l/Cipl, p27/Kipl, cyclin $B_1$. Results : The data showed that treatment of BIT decreased the viability of H460 cells in a dose-dependent manner. p2l/Cip1 is gradually decreased by the addition of the cells with BIT extract. Interestingly, p27/Kip1 is not detected for 24 hr after the addition of BIT extract, however, after 24 hr, p27/Kipl markedly increased. In addition, cyclin $B_1$, decreased in a time dependent manner after the addition of the water extract. The activation of caspase -3 protease was further confirmed by degradation of procaspase-8 protease andpoly(ADP-ribose) polymerase(P ARP) by BIT in H460 cells. Moreover, BIT induced the increase of Bak expression. Conclusion : These results suggest that the extract of BIT exerts anticancer effects to induce the death of human lung cancer H460 cells via down regulation of cell cycle regulators such as p2l/Cip1, and cyclin B1 or up regulation of cell cycle regulators such as p27/Kip1. Moerover results suggest that BIT induces an apoptosis in H460 cells via activation of intrinsic caspase cascades.

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상피세포성장인자의 수용성 외용제제화 (Formulation of Water-soluble Topical Preparations of Epidermal Growth Factor)

  • 이유철;박은석;지상철
    • Journal of Pharmaceutical Investigation
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    • 제25권3호
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    • pp.177-184
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    • 1995
  • In order to formulate an aqueous topical preparation of epidermal growth factor(EGF) for the treatment of open wound and bum, the stability of EGF in aqueous vehicles containing various stabilizers was evaluated and the pharmacological activity of gel preparations formulated with poloxamer 407 was determined with wound model. Various additives, which are known as potent stabilizers for proteins and polypeptides so far, were used to increase the stability of EGF in aqueous vehicles. The contents of EGF in the vehicles containing stabilizers were determined with an HPLC method after the storage at $37^{\circ}C$. EGF was more stable in ultrapure water than RO water or saline. All the additives studied resulted in deleterious effects on EGF stability. Therefore, it was speculated that any additives or impurities in the vehicle made EGF unstable. However, nitrogen purge of solution increased the stability of EGF in aqueous vehicles. The aqueous topical preparations of EGF were formulated with poloxamer 407 as a gel base in saline. Gelatin or amastatin was employed as a protease inhibitor. The pharmacological effect of EGF gel was studied with open wound model in mice. EGF preparations, made of oleaginous base or poloxamer gel base, showed significant healing effect compared to the control group(p<0.05). The addition of protease inhibitor in poloxamer 407 gel resulted in significant healing effect compared to the gel without it(p<0.05). Body weights of mice treated with EGF preparation were increased at the first day after the formation of open wound, while those of the control group were decreased. The EGF gel made of poloxamer 407 containing a pretense inhibitor would be a promising aqueous topical preparation for EGF.

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가축분뇨 발효제의 개발을 위한 미생물 분리 및 특성조사 (Isolation and Characterization of Microorganisms for the Development of Fermentation Accelerator of Animal Manure)

  • 김소영;김홍;채희정
    • KSBB Journal
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    • 제18권6호
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    • pp.466-472
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    • 2003
  • 본 연구에서는 가축분뇨의 비료화를 위한 분뇨의 악취와 암모니아성 질소를 제거시킬 수 있는 기능성 발효촉진 미생물의 선별을 목표로 쌀겨 자연발효 추출물로부터 총 61개의 균주를 순수 분리하였고, 순수 분리된 균주의 단백질, 지방, 탄수화물 등의 유기물 분해 효소활성 (amylase, protease, cellulase 및 lipase), 암모니아 가스의 탈취성능을 조사하여 최종적으로 NA 2, 12, 15의 3종의 균주를 선별하였다. 최종 선별된 균주에 대해서 동정실험을 수행한 결과, NA 2는 Bacillus acidocaldarius로 동정되었고, NA 15는 Planoroccus sp.로 부분동정되었다. 이들 분리된 미생물을 가축분뇨처리제로 개발하기 위한 최적의 혼합 배양 조건을 구하기 위해 반응표면계획법으로 배지 조성과 pH와 같은 조작 변수들의 영향과 상호작용 등을 포함한 데이터를 분석한 결과, 최적 배양 조건은 beef extract 4.59g/L, Peptone 8.73g/L, PH 6.3으로 결정되었다. 분리된 미생물들은 발효촉진 및 암모니아 탈취 성능이 우수하면서도 중$.$고온성 미생물들로서 가축분뇨처리에 활용가능성이 높은 것으로 판단되었다.