Mesenchymal stem/progenitor cells (MPCs) were isolated from porcine umbilical cord blood (UCB) and their morphology, proliferation, cell cycle status, cell-surface antigen profile and expression of hematopoietic cytokines were characterized. Their capacity to differentiate in vitro into osteocytes, adipocytes and chondrocytes was also evaluated. Primary cultures of adherent porcine MPCs (pMPCs) exhibited a typical fibroblast-like morphology with significant renewal capacity and proliferative ability. Subsequent robust cell growth was indicated by the high percentage of quiescent (G0/G1) cells. The cells expressed the mesenchymal surface markers, CD29, CD49b and CD105, but not the hematopoietic markers, CD45 and CD133 and synthesized hematopoietic cytokines. Over 21 days of induction, the cells differentiated into osteocytes adipocytes and chondrocytes. The expression of lineage specific genes was gradually upregulated during osteogenesis, adipogenesis and chondrogenesis. We conclude that porcine umbilical cord blood contains a population of MPCs capable of self-renewal and of differentiating in vitro into three classical mesenchymal lineages.
Background: Human umbilical cord bloods, which could be taken during the delivery are utilized as a source of hematopoietic stem cells. Also in cord blood, there are several kinds of stem cells such as endothelial and mesenchymal stem cells. Methods: We isolated the mesenchymal stem cells from human umbilical cord bloods and confirmed the differentiation of these cells into osteoblast progenitor cells. The mesenchymal stem cells derived from umbilical cord blood have the ability to differentiate into specific tissue cells, which is one of characteristics of stem cells. These cells were originated from the multipolar shaped cells out of adherent cells of the umbilical cord blood mononuclear cell culture. Results: The mesenchymal stem cells expressed cell surface antigen CD13, CD90, CD102, CD105, ${\alpha}$-smooth muscle actin and cytoplasmic antigen vimentine. Having cultrued these cells in bone formation media, we observed the formation of extracellular matrix and the expression of alkaline phosphatase and of mRNA of cbfa-1, ostoecalcin and type I collagen. Conclusion: From these results we concluded that the cells isolated from the umbilical cord blood were mesenchymal stem cells, which we could differentiate into osteoblast when cultured in bone formation media. In short, it is suggested that these cells could be used as a new source of stem cells, which has the probability to alternate the embryonic stem cells.
Endothelial progenitor cells (EPC) are a population of cells that circulate in the blood stream. They play a role in angiogenesis and, therefore, can be prognostic markers of vascular repair. Ginsenoside $Rg_3$ prevents endothelial cell apoptosis through the inhibition of the mitochondrial caspase pathway. It also affects estrogen activity, which reduces EPC senescence. Sun ginseng (SG), which is heat-processed ginseng, has a high content of ginsenosides. The purpose of this study was to investigate the protective effects of SG on senescence-associated apoptosis in EPCs. In order to isolate EPCs, mononuclear cells of human blood buffy coats were cultured and characterized by their uptake of acetylated low-density lipoprotein (acLDL) and their binding of Ulex europaeus agglutinin I (ulex-lectin). Flow cytometry with annexin-V staining was performed in order to assess early and late apoptosis. Senescence was determined by ${\beta}$-galactosidase (${\beta}$-gal) staining. Staining with 4'-6-Diamidino-2-phenylindole verified that most adherent cells (93${\pm}$2.7%) were acLDL-positive and ulex-lectin-positive. The percentage of ${\beta}$-gal-positive EPCs was decreased from 93.8${\pm}$2.0% to 62.5${\pm}$3.6% by SG treatment. A fluorescence-activated cell sorter (FACS) analysis showed that 4.9% of EPCs were late apoptotic in controls. Sun ginseng decreased the apoptotic cell population by 39% in the late stage of apoptosis from control baseline levels. In conclusion, these results show antisenescent and antiapoptotic effects of SG in human-derived EPCs, indicating that SG can enhance EPC-mediated repair mechanisms.
Hwang, Eunmi;Kim, Hyungkuen;Truong, Anh Duc;Kim, Sung-Jo;Song, Ki-Duk
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.1
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pp.123-134
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2022
Toll-like receptors (TLRs), as a part of innate immunity, plays an important role in detecting pathogenic molecular patterns (PAMPs) which are structural components or product of pathogens and initiate host defense systems or innate immunity. Precise negative feedback regulations of TLR signaling are important in maintaining homeostasis to prevent tissue damage by uncontrolled inflammation during innate immune responses. In this study, we identified and characterized the function of the pancreatic progenitor cell differentiation and proliferation factor (PPDPF) as a negative regulator for TLR signal-mediated inflammation in chicken. Bioinformatics analysis showed that the structure of chicken PPDPF evolutionarily conserved amino acid sequences with domains, i.e., SH3 binding sites and CDC-like kinase 2 (CLK2) binding sites, suggesting that relevant signaling pathways might contribute to suppression of inflammation. Our results showed that stimulation with polyinosinic:polycytidylic acids (Poly [I:C]), a synthetic agonist for TLR3 signaling, increased the mRNA expression of PPDPF in chicken fibroblasts DF-1 but not in chicken macrophage-like cells HD11. In addition, the expression of pro-inflammatory genes stimulated by Poly(I:C) were reduced in DF-1 cells which overexpress PPDPF. Future studies warrant to reveal the molecular mechanisms responsible for the anti-inflammatory capacity of PPDPF in chicken as well as a potential target for controlling viral resistance.
Kim, Da Yeon;Kim, Bo Min;Kim, So Jung;Choi, Jin Hee;Kwon, Sang-Mo
Journal of Life Science
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v.30
no.7
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pp.651-659
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2020
Cardiovascular disease is one of the leading causes of death across the world, and gold-standard treatments such as percutaneous coronary intervention and artery bypass grafting have various limitations including myocardial damage and subsequent maladaptive cardiac remodeling. To overcome this, stem-cell therapies are emerging as a promising strategy for cardiovascular regeneration. Endothelial progenitor cells (EPCs) have high potential to proliferate and differentiate into endothelial cells for vascularization and tissue regeneration, and several clinical trials have explored EPC function in tissue repair in relation to clinical safety and improving cardiac function. Consequently, EPC has been suggested as a feasible stem-cell therapy. However, autologous EPC transplantation in cardiovascular disease patients is restricted by risk factors such as age, smoking status, and hypertension that lead to reduced bioactivity in the EPCs. New approaches for improving EPC function and stem-cell efficacy have therefore been suggested, including cell priming, organoid culture systems, and enhancing transplantation efficiency through 3D bioprinting methods. In this review, we provide a comprehensive understanding of EPC characteristics, therapeutic approaches, and the current state of clinical research into EPCs as stem-cell therapy for cardiovascular disease.
Objective: This study was to investigate the generation of the functional neuron derived from human embryonic stem (hES, MB03) cells on in vitro neural cell differentiation system. Methods: For neural progenitor cell formation derived from hES cells, we produced embryoid bodies (EB: for 5 days, without mitogen) from hES cells and then neurospheres (for $7{\sim}10$ days, 20 ng/ml of bFGF added N2 medium) from EB. And then finally for the differentiation into mature neuron, neural progenitor cells were cultured in i) N2 medium only (without bFGF), ii) N2 supplemented with 20 ng/ml platelet derived growth factor-bb (PDGF-bb) or iii) N2 supplemented with 5 ng/ml brain derived neurotrophic factor (BDNF) for 2 weeks. Identification of neural cell differentiation was carried out by immunocytochemistry using $\beta_{III}$-tubulin (1:250), MAP-2 (1:100) and GFAP (1:500). Also, generation of functional neuron was identified using anti-glutamate (Sigma, 1:1000), anti-GABA (Sigma, 1:1000), anti-serotonin (Sigma, 1:1000) and anti-tyrosine hydroxylase (Sigma, 1:1000). Results: In vitro neural cell differentiation, neurotrophic factors (PDGF and BDNF) treated cell groups were high expressed MAP-2 and GFAP than non-treated cell group. The highest expression pattern of MAP-2 and $\beta_{III}$-tubulin was indicated in BDNF treated group. Also, in the presence of PDGF-bb or BDNF, most of the neural cells derived from hES cells were differentiated into glutamate and GABA neuron in vitro. Furthermore, we confirmed that there were a few serotonin and tyrosine hydroxylase positive neuron in the same culture environment. Conclusion: This results suggested that the generation of functional neuron derived from hES cells was increased by addition of neurotrophic factors such as PDGF-bb or BDNF in b-FGF induced neural cell differentiation system and especially glutamate and GABA neurons were mainly produced in the system.
CD82/KAI1, identified as a metastasis suppressor, was initially known only as a molecular facilitator, but its various functions have recently been revealed. CD82 plays an important role in the stem-progenitor cell, angiogenesis, and muscle. We would like to introduce the recently reported functions and roles of CD82 in this review. CD82 is a member of the tetraspanin family, which consists of four transmembrane domains. The interaction between CD82 and cell adhesion molecules suppresses the metastasis of cancer. CD82 regulates the cell cycle of stem-progenitor cells in the stem cell niche. In the bone marrow, CD82 is expressed on long-term repopulating hematopoietic stem cells (LT-HSCs), which show multipotent differentiation potential. The interaction between CD82 and Duffy antigen receptor for chemokines (DARC) induces quiescence in LT-HSCs. CD82 also regulates Rac1 activity, resulting in the homing and engraftment of HSCs into the bone marrow niche. Besides, CD82 maintains the differentiation potential of muscle stem cells and prevents angiogenesis by inhibiting the expression of cytokines, such as IL-6 and VEGF and adhesion molecules in endothelial cells. CD82 is a key membrane protein that distinguishes the hierarchy of stem-progenitor cells, and is also important for amplification and verification of cellular resources. Further studies on the function of CD82 in various organs and cells are expected to advance cell biology and cell therapy.
Kim, Chul Geun;Lee, Jong Joo;Jung, Dae Young;Jeon, Jinseon;Heo, Hyen Seok;Kang, Ho Chul;Shin, June Ho;Cho, Yoon Shin;Cha, Kyung Joon;Kim, Chan Gil;Do, Byung-Rok;Kim, Kyung Suk;Kim, Hyun-Soo
Molecules and Cells
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v.21
no.3
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pp.343-355
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2006
Stem cells are unique cell populations with the ability to undergo both self-renewal and differentiation, although a wide variety of adult stem cells as well as embryonic stem cells have been identified and stem cell plasticity has recently been reported. To identify genes implicated in the control of the stem cell state as well as the characteristics of each stem cell line, we analyzed the expression profiles of genes in human embryonic, hematopoietic ($CD34^+$ and $CD133^+$), and mesenchymal stem cells using cDNA microarrays, and identified genes that were differentially expressed in specific stem cell populations. In particular we were able to identify potential hESC signature-like genes that encode transcription factors (TFAP2C and MYCN), an RNA binding protein (IMP-3), and a functionally uncharacterized protein (MAGEA4). The overlapping sets of 22 up-regulated and 141 down-regulated genes identified in this study of three human stem cell types may also provide insight into the developmental mechanisms common to all human stem cells. Furthermore, our comprehensive analyses of gene expression profiles in various adult stem cells may help to identify the genetic pathways involved in self-renewal as well as in multi-lineage specific differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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