• 한국식품과학회지
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• 제37권3호
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• pp.389-396
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• 2005

공장식 쌈장 제조의 주원료인 된장과 고추장 반제품은 숙성기간이 경과함에 따라 수분함량과 아미노산성질소는 증가하였으며, pH는 낮아졌다. NaCl과 총질소함량에 있어서는 유의적인 차이는 없었으며 ${\alpha}$-amylase역가는 숙성 10일째 가장 높은 활성을 보였고 pretense의 활성은 숙성초기에 높은 활성을 나타냈다. 쌈장의 저장과정 중 수분함량은 경시적인 증감양상을 보였으며, 된장의 숙성기간이 긴 시험구가 수분함량이 낮게 나타났다. 저장기간이 경과하면서 pH는 시험구별로 점차 낮아지고 적정산도는 높아지는 경향을 보였으며, 된장과 고추장 반제품의 숙성일수, 살균온도, 저장온도에 따라 유의적인 차이가 있었다. 조단백질의 함량 변화는 일정하지 않았으며 된장의 함량에 따라 약간의 차이를 보였다. 저장기간이 경과함에 따라 아미노산질소는 증가하는 경향을 나타냈고, 고추장 반제품과 된장의 숙성기간, 된장 함량 및 저장온도보다는 살균온도에 의해 아미노산성질소 함량이 유의적인 차이를 보였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권4호
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• pp.290-296
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• 1998

Alkaline protease 생산력이 우수한 야생형인 A. oryzae val. oryzae의 핵을 순수 분리하여 영양요구성 변이주인 P. chrysogenum(T$yr^{-}$)의 원형질체에 전달하는 핵전이를 이용하여 종간잡종을 형성시킨 후 이들 형질전환체으로 부터 alkaline protease 고생산 균주를 획득하였다. 핵전이를 위한 원형질체 형성 및 재생 조건에서는 Novozym 234의 농도 1%, 삼투안정제는 0.6 M KCl, 효 소의 처리 시간은 180분 그리고 최적 pH는 5.8로 나타났다. 핵전이에 의한 형질전환의 빈도는 1.3~3.8$\times$$10^{-4}$으로 비교적 낮은 편이었으며, 유전적 안정성, conidia의 크기, DNA함량의 측정 그리고 핵염색의 결과 형질전환체의 핵형은 aneuploid로 추정되었다. 형질전환체의 alkaline protease 활성은 모균주와 비교하여 1.1~2.2배 증가하였다.다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제44권4호
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• pp.321-330
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• 2006

The pathogenic mechanism of granulomatous amebic encephalitis (GAE) and amebic keratitis (AK) by Acanthamoeba has yet to be clarified. Pretense has been recognized to play an important role in the pathogenesis of GAE and AK. In the present study, we have compared specific activity and cytopathic effects (CPE) of purified 33 kDa serine proteinases from Acanthamoeba strains with different degree of virulence (A. healyi OC-3A, A. lugdunensis KA/E2, and A. castelianii Neff). Trophozoites of the 3 strains revealed different degrees of CPE on human corneal epithelial (HCE) cells. The effect was remarkably reduced by adding phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF), a serine proteinase inhibitor. This result indicated that PMSF-susceptible proteinase is the main component causing cytopathy to HCE cells by Acanthamoeba. The purified 33 kDa serine proteinase showed strong activity toward HCE cells and extracellular matrix proteins. The purified proteinase from OC-3A, the most virulent strain, demonstrated the highest enzyme activity compared to KA/E2, an ocular isolate, and Neff, a soil isolate. Polyclonal antibodies against the purified 33 kDa serine proteinase inhibit almost completely the proteolytic activity of culture supernatant of Acanthamoeba. In line with these results, the 33 kDa serine proteinase is suggested to play an important role in pathogenesis and to be the main component of virulence factor of Acanthamoeba.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제2권1호
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• pp.13-17
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• 1974

토양에서 분리한 Streptomyces 속 중에 금속을 함유하고 있는 protease를 강하게 분필하는 균일 주를 선별하여 그 효소학적 성질 멸가지를 알아본 결과는 다음과 같다. 1 본 효소의 작용 최적 pH는 중성부근이며 최적온도는 37$^{\circ}C$ 부근이다. 2. 본 효소는 중성부근에서 비교적 안정하며 열에는 비교적 불안정하며 37$^{\circ}C$에서 100분간 열처리했을때 약 50% 가량 실활하였다. 3. Hg$^{＋＋}$, Cu$^{＋＋}$, Cd$^{＋＋}$, Ag$^{＋}$ 등에 의하여 강하게 조해되며, Mn$^{＋＋}$, $Mg^{＋＋}$, $Ca^{＋＋}$, Pb$^{＋＋}$, $Ba^{＋＋}$ 등에는 별 영향을 받지 않는다. 4. oxalate, citrate, 2-4-dinitrophenol, $\varepsilon$-amino caproic acid, thiourea, cysteine에 의해서는 강하게 조해되었다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제9권4호
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• pp.278-283
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• 1993

This study was attempted to investigate the effects of enzymatic modification of milk protein with protease on functional properties. The selected functional properties were solubility, emulsifying activity (EA), emulsion stability(ES), foam expansion(FE), and foam stability(FS). These properties were measu-red from pH 3.0 to pH 8.0. The proteases used in this study were iaolated from Meju(fermemted soybean) and had specific activity of 250 units/㎎ protein at pH 7.0, 1600 units of pretense was used for 1gr. of skim milk protein. Skim milk showed 30.5％ degree of hydrolysis for 1 hr. and 36.4% degree of hydrolysis for 3.5 hrs. of protease treatment at pH 7.0. Solubility of native skim milk, control, 1 hr. and 3.5 hrs. groups were 3.37, 3.64, 10.21, 14.34％o at pH 4.0 respcetively. The emulsifying activity of native skim milk, control, 1 hr. and 3.5 hrs. groups were 38.8,42.0,43.0,46.7ft at pH 4.0, respectively. Enzymatic modification resulted in the increase of solubility and emulsifying activity at pH 4.0. However at pH 5.0 emulsifying activity of 1 hr. and 3.5 hr. group were lower than native skim milk and control groups. 1 hr. protease treatment was found to be most effective way of increasing foam expansion at pH 4.0 to 6.0. It was supported that, protease treated skim milk can be used to improve solubility, emulsifying activity, foam expansion at acid pH. meju protease. skim milk, solubility, emulsion, foam.

• 한국의류학회지
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• 제20권4호
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• pp.655-666
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• 1996

The effect of protease (subtilisin Carlsberg) on the removal of hemoglobin as protein soil was studied. The relation between the renloval and the hydrolysis of hemoglobin by subtilisin Carlsberg was discussed. The soiled babric was prepared by spotting of hemoglobin solution evenly on the cotton fabric and was denatured by steaming. The soiled fabric was washed by using Terg-0-Tometer at various conditions. The removal efficiency was evaluated by analysis of protein on the fabrics before and after washing by means of copper-Folin method. 1. The removal of hemoglobin was increased in proportion to increasing of the enzyme concentration up to a certain point, but it began to decrease above the point. 2. The hemoglobin was removed effectively by adding of subtilisin Carlsberg, and more effectively removed by adding of AOS in the enzyme solution. 3. The removal of hemoglobin deviated from the first order reaction in detergency. 4. The renloval of hemoglobin was highest at $50^{\circ}C$ in detergency, Even at low temperature the removal efficiency of enzyme was relatively higher compared with the hydrolysis of hemoglobin by the enzyme. However the removal of hemoglobin was apparently decreased with the increase of temperature over $60^{\circ}C$. 5. The removal of hemoglobin was relatively high at pH 7.0~8.0 and increased continuously with the increase of pH in detergency 6. In detergency, the removal mechanism of hemoglobin by subtilisin Carlsberg could be explained as follows: Fisrt of all, the enzyme hydrolyzed hemoglobin substrates partially by forming E-S complex at the surface of hemoglobin on the cotton fiber, and decomposed cooperative binding of hemoglobin. Subsequently, the fragments of hemoglobin were easily removed by washing. According as the enzyme penetrated to inner part of hemoglobin gradually, the hemoglobin on the cotton fiber was effectively removed by the repetition of these process. The removal of hemoglobin was more effectively increased by adding both the enzyme and AOS in the washing solution. Therefore, it was regarded that AOS molecules were adsorbed at the hydrophobic surface of denatured hemoglobin, subsequently, decomposed more effectively cooperative binding of hemoglobin, and the fragments of hemoglobin were removed more efficiently by means of the interfacial reaction of AOS.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권3호
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• pp.224-229
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• 2003

경기도 일대의 가금류 공장부근 토양로부터 keratinolytic protease 생산성이 우수한 균주 KP-364를 선별하여 본 효소를 정제하고 일반적인 특성을 조사하였다. 본 효소는 ulkafiltration, ammonium sulfate fiactionation, DEAE-cellulose ion-exchange chromatography, Sephadex G-150 gel filtration 등을 통하여 정제되었으며 회수율은 25.2%이었다 SDS-PAGE와 gel filtration으로. 단일성과 분자량을 추정한 결과 전기영동 상에 단일 band를 나타내었으며 분자량은 약 36,000 dalton이였으며 1개의 subunit로_구성되어 있었다. 효소반응의 최적조건을 검토한 결과 최적 pH는 6.5, pH 3.0에서 10.0까지 90%이상의 활성을 나타냈으며 반응 최적 온도는 $37^{\circ}C$이였고 $60^{\circ}C$에서 1시간동안 80%이상의 활성을 유지하였다. 정제된 효소의 활성은$ FeSo_4$, KCI, $Li_2$$SO_4$를 첨가하였을 때 증가하였으며 $Ag_2$$SO_4$, $CuCl_2$, $HgCl_2$에 의해 저해되었다. 또한 EDTA, EGTA에 의해 저해되는 것으로 보아 metalloprotease의 일종이라고 판단되며 $Li^{ +}$를 cofactor로 함유하고 있는 것으로 조사되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제36권1호
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• pp.147-151
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• 2004

난백에 NaOH, 열, 및 효소를 처리하였을 때, 난백 중의 ovomucoid(OM) 및 ovalbumin(OA)의 항원성 변화를 항OM 및 항OA 항체를 이용하여 간접경합 ELISA로 조사하였다. 효소처리는 OM의 항원성을 효과적으로 감소시키지 못한 반면 OA의 항원성은 식물성, 미생물성 protease를 사용하였을 때 약 1/5,000-1/100,000로 감소되었다. 열처리를 한 난백 중 OM은 $100^{\circ}C$까지 거의 변화하지 않으나 $121^{\circ}C$ 처리에서는 난백의 항원성이 OM은 1/250으로 감소되었다. OA의 항원성은 열처리에 의해 오히려 증가되었으며 최고 100배까지 증가되는 것으로 나타났다. NaOH를 농도별로 처리한 난백 중 OM의 항원성 변화는 0.3%부터 감소하기 시작하여 1%이상에서 항원성이 거의 제거되었다. 반면 OA의 경우는 모든 NaOH 처리농도에서 항원성이 증가하였다. NaOH 처리에 추가적인 열처리($70^{\circ}C$, 15분)를 실시한 것은 난백중 OM과 OA의 항원성 감소에 다소 효과적인 것으로 나타났다.

• 한국식품과학회지
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• 제22권2호
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• pp.172-176
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• 1990

크릴에 과량 존재하는 불소를 감량시키고자 전기분해 반응에 의한 electrocondensation 방법을 이용하였다. Electrotocondensation 방법에 의한 크릴 불소의 감량정도는 불소이온의 존재형태 (이온 및 결합상태의 불소, 총불소)와 시료의 부위(육질, 키틴질, 건조크릴)에 따라 차이가 있는 것으로 나타났다. 전기분해 반응시간에 따른 불소의 감량곡선을 살펴보면, 반응초기에는 불소의 감량이 빠르게 진행되었으나 일정시간 이후부터는 서서히 감량되는 경향을 나타내어 전기분해반응 120분 후에는 반응전 초기 불소농도의 $30{\sim}70%$ 수준까지 감량시킬 수 있었다. 이상의 결과를 살펴볼 때, electrocondensation 방법으로 크릴에 과량 함유되어 있는 불소를 상당량 제거하였지만. 아직도 많은 양의 불소가 각 시료에 잔재하고 있어, 완전한 불소세거를 위해서는 보다 깊은 연구가 필요로 되는 것으로 생각되었다. 즉 Newman은 세포외 불소가 벼에 집적되는 과정에서 hydroxyl기와의 치환반응을 고찰하였고, Rehbein등은 크릴을 주 먹이사슬로 하는 남극어류의 대부분이 chitinase와 pretense등의 강한 효소활성으로 크릴을 소화하는 과정에서 불소가 유리되어 체외로 방출되는 것으로 고찰하고 있어, 불소의 이동기작 및 집적과정에 대한 깊은 연구와 더불어 electrocondensation 방법을 보다 효율적으로 이용할 수 있는 방안이 모색된다면 크릴의 불소문제는 완전히 해결될 수 있을 것으로 생각되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제11권1호
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• pp.67-74
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• 1983

Aspergillus oryzae 6균주(A, B, C, D, E, F 등 6개구)를 이용한 콩된장및 개량된장의 색상개량에 관한 연구결과를 요약하면 다음과 같다. 제국중 protease 및 $\alpha$, $\beta$-amylase 활성은 콩된장구보다 개량된장구에서 더 높았고 전반적으로 48시간까지는 그 활성이 급격히 그리고 12시간까지는 서서히 증대되었으며, A 및 C 균주구의 활성이 높았다. 그리고 숙성중 일반성분, 단백질 화합물, pH 등의 변화에 있어서 콩된장 및 개량된장 모두 균주에 따른 차이는 없었다. 균주에 따른 숙성중의 색상변화 즉 갈변현상은 균주의 차이에 따라 그 차가 심하였고 B 및 균주구에서 완만하여 색상이 우수하였으며 개량된장보다 콩된장에서 더 갈변이 심하였다. 그리고 숙성된장의 저장중에서도 같은 경향을 보였으며 내부보다는 표면에서 더욱 심하였다. 그리고 이와같은 갈변화 현상은 효소학적 반응이 주요인으로 고려되었다. 전반적으로 Aspergillus oryzae 2157(C)균주에 의한 된장 발효는 제품의 색상 개선효과가 현저하였고 관능적 특성, 효소활성등이 우수하였다.