3-Monochloro-1,2-propanediol(3-MCPD) is a toxic compound, often present in different foods containing acid hydrolyzed(AH) protein, like seasonings and savory food products. The purpose of the present study was to investigate the effects of 3-MCPD on male fertility, sperm and testosterone secretion. In vivo male fertility test was performed for observing the adverse effects of 3-MCPD on the function of male reproductive system and pregnancy outcome. 0.01, 0.05, 0.25, 1 and 5 mg/kg b.w. of 3-MCPD was given daily by gavage to groups of 15 adult male SD rats for 4 weeks. At the end of pre-treatment period, males were mated overnight with normal females. Following morning, males demonstrating successful induction of pregnancy were sacrificed on that day to assess sperm parameters and histopathology of reproductive organs. The resulting pregnant females were sacrificed on day 20 of gestation to evaluate pregnancy outcome. As a result, four-week paternal administration with 3-MCPD resulted in adverse effects on male fertility and pregnancy outcome without remarkable histopathological changes in testes and epididymides; sperm motility, copulation index and fertility index were markedly decreased in the treated group and numbers of live fetuses showed steep dose-response curves. Also, spermatogenesis was investigated in this experiment. However, no effect was observed on production of sperm in testes treated with 3-MCPD for 4 weeks. Hormone assay was performed for observing the effects of 3-MCPD on testosterone and luteinizing hormone (LH) in blood and testes of male SD rats and cultured primary Leydig cell. In result, significant changes of related hormones did not observed by treatment of 3-MCPD. These results indicated that paternal treatment with 3-MCPD induced spermatotoxic effect, which caused an antifertility on male.
The present study was designed to elucidate the effects of the Co-60 γ irradiation and/or calciumdeficient diet on the dentin and cementum formation of rat molar. The pregnant three-week old SpragueDawley rats were used for the study. The experimental group was divided into two groups, irradiation/normal diet group and irradiation/calcium-deficient diet group. The control group was nonirradiation/normal diet group. The abdomen of the rats at the 19th day of pregnancy were irradiated with single absorbed dose of 350cGy. The rat pups were sacrificed on the 14th day after delivery and the maxillae including molar tooth germ were taken. The specimens including the 1st molar tooth germ were prepared to make tissue sections for light and transmission electron microscopy. Some of tissue sections for light microscopy were stained immunohistochemically with anti-fibronectin antibody. The results were as follows; 1. The Hertwig's epithelial root sheath cells, which are related to the differentiation of the tooth-forming cells, showed irregular cellular arrangement, decrease of intercellular junctional complex, and decreased immunoreactivity to the fibronectin after irradiation. These were more severe in the irradiation/calcium-deficient diet group. 2. The cementoblasts at the cementum-forming area showed chromatin clumpings after irradiation. The immu noreactivity to the fibronectin was weaken after irradiation, especially irradiation/calcium-deficient diet group. 3. The odontoblasts at the dentin-forming area showed increase of lysosomes in the cytoplasm and destruction of intercellular junctional complex. The irradiation/calcium-deficient diet group showed decrease of number and density of the electron dense particles and a large number of vacuoles scattered in the dentin matrix. The immunoreactivity was weaken.
The present study was designed to elucidate the effects of the Co-60 γ irradiation and/or calcium-deficient diet on the periodontal tissue formation in rat pups. The pregnant three-week old Sprague-Dawley rats were used for the study. The experimental group was divided into two groups, irradiation/normal diet group (Group 2) and irradiation/calcium-deficient diet group (Group 3). The control group was non-irradiation/normal diet group (Group 1). The abdomen of the rats at the 19th day of pregnancy were irradiated with single absorbed dose of 350 cGy. The rat pups were sacrificed on the 14th day after delivery, and the maxillae including molar tooth germ were taken. The specimens including the 1st molar tooth germ were prepared to make tissue sections for light and transmission electron microscopy. Some of tissue sections for light microscopy were stained immunohistochemically with anti-fibronectin and anti-osteonectin antibodies. The results were as follows; 1. In the periodontal ligament forming area, the fibroblasts of Group Z showed irregular arrangement and low activity. The immunoreactivity between the fibroblasts and collagen fibers was decreased, compared with Group 1. The fibroblasts of Group 3 showed atrophic change and clumped nucleus. The collagen fibers showed cystic change and low immunoreactivity to the fibronectin. 2. In the cementum forming area, the cementoblasts of Group 2 showed decrease of number and atrophic change. The cementoblasts of Group 3 showed edematous change, atrophy of cytoplasm, and clumping of nucleus. 3. In the alveolar bone forming area, the bone of Group 2 was thin and various degree of immunoreactivity to the osteonectin. Group 3 showed edematous osteoblasts, fibrous degeneration of bone marrow, and weak immunoreactivity to the osteonectin.
The purpose of this study was to determine the adverse effects of methylmercuric chloride(MMC) against the fetal growth and the ossification rate of fetal pectoral and pelvic girdle, stermebrae, ribs and tail in pregnant Fischer 344 rats administered orally on day 7 of gestation. The resulted obtained are as follows. The weight and size of fetus were highly reduced by MMC. The reduction of fetal weight and size were 16. 2%~24.5%(p<0.01), and 34.1%~48.8%(p<0.01), and that of the litter’s weight were 67.0%(p<0.01) and 89.2%(p<0.01) by 20 and 30mg/kg MMC, respectively. Ossification centers were never formed in pectoral and pelvic phalanges and sternebrae, and was reduced as much as 70% in tail by 30mg/kg MMC. And also those were 82.4%~ 91.2%(p<0.01) in ischium, and 52.4~66.7%(p<0.01) in the others(ilium, fenur, tibia, fibula, metatarsals)of pelvic girdle by 30 mg/kg MMC. Ossification of sternebrae was terrible. 5th bone of sternebrae was not ossificated by 20 and 30 mg/kg MMC(p<0.01), and 2nd was also not ossificated by 30 mg/kg MMC(p<0.01).And reduction of ossification rate was 84.8~97.8%(p<0.01) in the others of sternebrae by 30 mg/kg MMC. And then, the reduction of ossification rate was 26.65~49.8%(p<0.01) in fetal ribs by 30 mg/kg MMC, and they were trend to increased as following from center to each edge. In conclusion, it was observed that fetal weight, size, and ossification of each bone were highly significantly reduced by the increased dosage of MMC.
Intrauterine alcohol exposure delays bone maturation and intensifies osteoporosis and fracture risk. As most studies emphasize the neurological aspects of intrauterine alcohol exposure, there is a lack of research on the implications pertaining to osseous tissue. Previous studies investigated these effects in fetuses, with limited studies on postnatal life. Postnatal studies are crucial since peak bone growth occurs during adolescence. This study aimed at assessing the effects of prenatal alcohol exposure on the humerus proximal and distal growth plate chondrocytes in 3-week-old rats. Sprague Dawley rats (n=9) were assigned to either the ethanol group (n=3), saline (n=3), and untreated (n=3) group and time-mated. Once pregnant, as confirmed by the presence of a copulation plug, the former 2 groups were treated with 0.015 ml/g of 25.2% ethanol and 0.9% saline. The untreated group received no treatment. The left humeri belonging to 6 pups per group were used. Serial sections were cut with a microtome at 5 ㎛ thickness. These sections were stained with haematoxylin and eosin for assessment of normal morphology or immunolabeled with anti-Ki-67 and transforming growth factor β-1 (TGFβ-1) antibody. Prenatal alcohol exposure adversely effected the growth plate sizes and the number of cells in the proliferative zone. Fewer TGFβ-1 immunopositive and proliferative chondrocytes were found using the anti-Ki-67 antibody. This may explain the growth retardation in offspring exposed to gestational alcohol, showing that gestational alcohol exposure inhibits cell proliferation, aiding the diminished stature.
Long chain polyunsaturated fatty acids (LCPUFA) are important components of brain phospholipds and play important role (s) in brain function. In rats, the maximum brain growth occurs during the period of lactation even though it happens during the third trimester of gestation in human. Since milk contained docosahexaenoic acid (DHA) even through the maternal diet had no DHA and/or a very small amount of its precursor, $\alpha$-linolenic acid ($\alpha$-LnA), an emphasis was given to maternal adipose tissue as a reservoir of this fatty acid. We, therefore, investigated the mesenteric and subcutaneous adipose tissues for their fatty acid composition in dams reared with different fat diets. Diets containing various amounts of $\omega$6 and $\omega$3 fatty acids were given to adult female rats (200-250g) throughout the pregnancy and lactation periods. Diets were composed of 10% (wt/wt) corn oil (CO), soybean oil (SO), perilla seed oil (PO) containing about 60% $\alpha$-LnA, or fish oil (FO) rich in eicosapentaenoic acid (EPA) and DHA. The fatty acid ompositions of mesenteric and subcutaneous fat were measured and evaluated at Day-2 and Day-15 after parturition. In general, major characteristics of dietary fatty acid composition was reflected on the fatty acid composition of adipose tissues. Dietary fatty acid composition was reflected more on mesenteric fat as compared to subcutaneous fat. Mesenteric fat was found to contain less arachidonic acid (AA) and mesenteric fats of CO, SO and PO groups contained less DHA than did the subcutaneous fat. The P/M/S ratios of adipose tissues were similar between experimental groups while dietary P/M/S ratios differed significantly. It was noticeable that a small proportion of DHA was found in the adipose tissues of animals of CO, SO and PO groups (Day-2) and in SO and PO groups (Day-15), the groups which do not contain DHA in their diets. The percentage of DHA in mesenteric fat o CO, SO and PO groups decreased as lactation continues, while the proportion of DHA in FO group increased. Adipose tissues of FO group had higher DHA/EPA ratio as compared to the diet. Considering the fact that the body contains a large amount of adipose tissues, our present finding suggests that the adipose tissue can serve as a reservoir of DHA for pregnant and lactating rats.
This study was designed to investigate the effects of superovulation on the growing and mature follicles following gonadotrophin treatments in mature rat by immunohistochemical methods. Eighteen mature rats (Sprague-Duwely, 190~230gm) were randomly alloted into 3 groups. One group was control group, another FSH-treated group was injected intramuscularly with 0.5 units of follicular stimulating hormone(FSH) / rat, and third PMS and HCG-treated group was injected intramuscularly with 20~25IU of pregnant mare serum(PMS) / rat and then at the 48 hrs later, with 20~25IU of human chorionic gonadotropin(HCG) / rat. Half the number of rats were administrated intraperitoneally with bromodeoxyuridine(Brdur, 0.2mg/gm BW once) at 2 hours before exanguination and the remainder of rats were sacrified without Brdur administration. The investigation by immunohistochemical methods using paraffin sections of ovaries was performed by using anti-Brdur antibody and PCNA(proliferating cell nuclear antigen) antibody for labeling proliferating cells in follicles. In immunohistochemical findings, follicles squeezed by peripheral corpus luteum or follicles large follicles with loosly and irregularly distributed granulosa cells and although with compacted granulosa cells, middle follicles with dilated round or oval follicular antrum were confirmed as atretic follicles. The proportions of atretic follicles in control group were 29.8%, 21.7% and 14.2% respectivley at large, middle and small follicles and mean proportions of these all 3 grade follicles were 26.7%. The proportions of atretic follicles in FSH-treated group were 35.4%, 24.9% and 10.4% respectively at large, middle and small follicles and mean proportions of these all 3 grade follicles were 28.1%. The proportions of atretic follicles in PMS and HCG-treated group were 44.7%, 24.0% and 12.7% respectively at large, middle and small follicles, and mean proportions of these all 3 grade follicles were 29.7%. The above findings reveal that the group with higher proportion of atretic follicles were ordered as large, middle and small follicles in size, and these proportions were increased in hormone treated two groups with more number of more growing and mature follicles when compared with control group.
고나도트로핀제재에 의한 다배란처치는 난소 스테로이드 호르몬(estrogens, progestins 및 androgens)의 정교한 균형을 깨트림으로써 자궁에 바람직하지 못한 영향을 미친다. 따라서 이러한 다배란처치가 자궁조직에 미치는 영향을 검사하기 위하여, 28일령의 189마리 미성숙래트에 4IU, 20IU 또는 40IU의 임마혈청성 고나도트로핀 (PMSG)을 투여하고, 그후 10일까지 매 24시간 간격으로 실험동물을 희생시켰다 자궁조직의 장기적 효과는 4IU 또는 40IU의 PMSG를 투여한 12마리의 래트를 30일째에 희생시켜 검사하였다. 그리고 일부 성숙래트의 자궁은 PMSG를 투여한 미성숙래트의 자궁과 비교하는데 공시되었다. PMSG투여후 2일부터 5일까지 대조군(4IU) 자궁의 형태학적, 조직학적 변화는 성숙래트의 발정주기 동안의 변화와 거의 동일하였다. 그러나 대배란처치용량(20IU 또는 40IU)의 PMSG는 투여 후 2일째에는 자궁 간질조직의 hypertrophy와 3일째에는 자궁내강 상피세포의 focal papillary hyperplasia를 형성시켰다. 20IU와 40IU의 PMSG를 투여한 후 $17{\beta}$-estradiol 혈중농도는 투여 1일 후에 대조군(4IU)보다 현저하게(P<0.005 및 P<0.05) 증가하였고, androgen농도는 투여 1일 후에 baseline으로부터 현저하게(P<0.05 및 P<0.005) 증가하여 2일과 3일 사이에 최고에 도달하였다. 20IU PMSG 투여군에 있어서, hyperplasia현상은 투여 3일 후부터 점차 퇴행되어 10일까지는 완전히 소멸되었다. 그러나 40IU PMSG투여군에서의 hyperplasia는 투여 6일 후까지 뚜렷이 진행되었다. 이러한 결과는 혈중 estrogen 농도의 상승과 밀접한 관계가 있는 것으로 사료된다. 왜냐하면 40IU PMSG투여군에 있어서의 $17{\beta}$-estradiol 혈중농도가 투여 4일 후에 최고에 도달하였으며, 이는 4IU PMSG를 투여한 대조군과 20IU PMSG 투여군보다 현저하게(P<0.001) 높았기 때문이다. 그리고 40IU PMSG투여군에 있어서의 hyperplasia 현상은 투여 6일과 10일 사이에 약간씩 퇴행됨을 보였고, 30일까지는 완전히 소멸되었다. 본 연구결과는, 다배란처치로 인하여 난조조직으로부터 과잉 분비되는 estrogen 및 androgen에 대한 자궁조직의 사전노출이, 위에서 언급한 비정상적 hyperplasia형성의 가능한 원인적 요소가 됨을 시사한다.
미성숙 래트의 외경정맥에 카테타를 장착하고, 다음날 (28일령) 대조군에는 4IU, 다배란 처치 군에는 20IU의 PMSG를 피하주사하였다. 각 실험동물은 혈중의 LH농도 변화를 측정하기 위하여 PMSG 투여 직전 (0시간), 투여후 12시간, 그 이후 6시간 간격으로 혈액을 채취하고 72시간에 희생시켰다. 그 결과 다배란 용량의 PMSG 투여는 먼저 배란반응 및 난소중량을 대조군에 비하여 각각 4,7배 및 2.1배나 현저하게 (P<0.05) 증가시켰다. 그리고 혈청 LH농도는 Radioimmunoassay(RIA)에 의하여 결정되었는데, 먼저 두 군 모두 두 개의 분명한 peak을 가진 경시적 변화관계를 보였다. 즉 이들 두 군네 있어서 LH농도 변화는 0-18시간대에 처음으로 완만한 증가와 54-60시간대에 두번째는 급격한 증가(surge)를 보였다. 그러나 두 군간에 LH농도의 크기는 현저하게 달라, 다배란처치군의 동물에 있어서는 두번째의 LH peak에 앞서 전반적인 LH농도가 대조군보다 현저하게 (P<0.001) 높았으며, 반대로 PMSG 투여후 60시간에 일어나는 peak에 있어서는 LH농도가 대조군보다 현저하게 (P<0.001) 54%나 낮았다. 덧붙여 두 peak간의 증가폭은 대조근에 비하여 다배란 처치군에서 훨씬 낮았다. 본 열구 결과는 PMSG 처치된 래트에 있어서 두 가지의 분명한LH peak의 존재를 정의하며, 다배란 처치에 따른 난소과잉 자극과 내인성 LH surge의 감소와의 연관성을 밝힌다.
The purpose of this study was to investigate the effect of hydrocortisone in the fusion mechanism of the secondary palatine shelves in the rat. Pregnant rats were injected with 5.0 mg/100 gm body weight of hydrocortisone for 3 days between the 7th day and the 9th day of pregnancy. Between the 14th day md the 18 day of pregnancy, the fetuses were removed and decapitated to be immersed in $10\%$ formalin and Carney's solution. Preparations were stained with alizarin red S, hematoxylin-eosin and alcian blue respectively, and partly were treated for Periodic acid-Schiff reaction. The results were as followings: 1. The incomplete fusion of the palatal epithelium took place though the polarity of epithelial cells. 2. At the edge of shelves the differentiation of mesenchymal cells was observed, but the inter penetration of mesenchyme was not shown. 3. It was considered that the phenomenon of hypocalcification in matrix had relation to the decrease stainability to alizarin red S in shelves. 4. It might be concluded that the connective tissue under epithelium showed the decrease tendency to alcian blue and PAS reaction due to the inhibition of the synthesis of the mucopolysaccharide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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