The embryos(6-8mm) isolated from seeds of Diospyros kaki were cultured on Murashlge-Skoog(MS), Woody Plant Medium(WPM), Campbell Durzen(CD), Lictvay's Medium(LM), Kao-Michaluk(KM), Nitsch, White, Heller, Wolter-Skoog(WS) media. The results showed that MS and WPM media were most suitable to the development of embryos into plantlets with length of $5.4{\pm}1.2 cm$ and 5-6 leaves. However, when LM and KM media were used, the addition of 1 to $2{\mu} moles/\ell GA_3$ was required for the germination of the embryos. Superoxide dismutase (SOD) activities, one of the changing factors in leaves according to physiological status displayed to be exceptionally significant in the leaves of plantlets germinated from seeds in potting sand soil contrary to those of cultured embryos specially around germination period.
Kim, S.J.;Kim, S.J.;Han, S.K.;Kwon, Y.K.;Kwon, Y.H.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.20
no.2
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pp.31-38
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2018
This study was conducted to investigate the possibility of biochar as an alternative medium to peatmoss using for Aster spathulifolius. We cultivated A. spathulifolius in four potting media with different mixing rates (v/v) of peatmoss (P) and biochar (B) as follows: B0+P3, B1+P2, B2+P1, and B3+P0 with vermiculite 3 + perlite 3. Also, we analyzed the chemical properties of media and the plant growth characteristics. The results were as follows: In case of media's chemical condition, B0+P3 and B1+P2 treatments showed higher tendency (p < 0.05). Plant height on B0+P3 and B1+P2 treatments was much higher than that on other treatments (p < 0.05). Root length on B1+P2 treatment was higher than on B0+P3 treatment (p < 0.05). B0+P3 and B1+P2 treatments showed higher number of leaves and dry biomass than other treatments. Therefore, our results support that Biochar : Peatmoss : Vermiculite : Perlite (1/3 : 2/3 : 1 : 1, v/v) could be a more economical potting medium for A. spathulifolius than peatmoss : vermiculite : perlite (1 : 1 : 1, v/v).
Oh, Myung-Jin;Na, Hye-Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk-Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.4
no.2
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pp.125-128
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2010
Culture conditions were established for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from cell suspension cultures of Nymphoides coreana. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and calluses at a frequency of 85.6% when cultured on half-strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.3 $mg\;l^{-1}$ of 2,4-D. However, the frequency of pale-yellow globular structures and white callus formation decreased slightly with an increasing concentration of 2,4-D up to 10 $mg\;l^{-1}$ with the frequency rate falling to 16.7%. Cell suspension cultures were established from zygotic embryo-derived calluses using half-strength MS medium supplemented with 0.3 $mg\;l^{-1}$ of 2,4-D. Upon plating onto half-strength MS basal medium, over 92.3% of cell aggregates gave rise to numerous somatic embryos and developed into plantlets. Regenerated plantlets were successfully transplanted into potting soil and achieved full growth to an adult plant in a growth chamber. The high frequency plant regeneration system for Nymphoides coreana established in this study will be useful for genetic manipulation and cryopreservation of this species.
Protoplasts of Arabidopsis thaliana were easily isolated from the shoot-forming (SF) suspension-cultured cell clusters with 4 hours-shaking condition (40 rpm) on CPD enzyme solution containing 1% cellulase R-10, 0.25% pectolyase Y-23 and 0.5% driselase. Protoplasts were cultured on liquid KAO medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L kinetin, 200 mg/L spermidine and 68 g/L glucose. Also, protoplasts were cultured on 0.2 $\mu$M membrane filter placed onto CP solid medium containing the suspension cells as feeder cells in the dark at $25^{\circ}C$ for 4 weeks. Protoplast-derived-SF calli were cultured on MS medium containing 0.05 mg/L IAA, 7 mg/L 2 ip and 30 g/L sucrose under the continuous illumination for four weeks. The frequency of shoot formation was about 60%. The regenerants were transferred into potting soil to grow mature plants. The regenerants formed the silques with seeds after 8 weeks of cultures.
Immature flower buds of 'Desio' carnation were cultured on MS agar medium supplemented with 1 ㎎/L 2,L-D. Embryogenic calli were formed from 5-10% of the buds less than 20 ㎜ in length, but only non-embryogenic calli were produced from explants of shoot apex leaf, internode, and flowere buds larger than 20 ㎜. The same method was applied to 16 cultivars of cut Sower carnation and embryogenic calli were obtained in 7 cultivars. Several embryogenic callus lines were selected and maintained through subcultures over 120 weeks without loss of embryogenic competence. The embryogenic cultures were also proliferated rapidly in liquid agitation cultures using MS medium supplemented with 1mg/L 2,4-D. Numerous embryos were formed on the periphery of the cell aggregates upon transfer to auxin-free MS agar medium. Plantlets were transplanted in potting soil and grown to bloom in six months.
$\beta$-Glucuronidase (GUS) gene of Escherichia coli was introduced into sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) cells by particle bombardment and expressed in the regenerated plants. Microprojectiles coated with DNA of a binary vector pBI121 carrying CaMV35S promoter-GUS gene fusion and a neomycin phosphotransferase gene as selection marker were bombarded on embryogenic calli which originated from shoot apical meristem-derived callus and transferred to Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 100 mg/L kanamycin. Bombarded calli were subcultured at 4 week intervals for six months. Kanamycin-resistant calli transferred to MS medium supplemented with 0.03 mg/L 2iP, 0.03 mg/L ABA, and 50 mg/L kanamycin gave rise to somatic embryos. Upon transfer to MS basal medium without kanamycin, they developed into plantlets. PCR and northern analyses of six regenerants transplanted to potting soil confirmed that the GUS gene was inserted into the genome of the six regenerated plants. A histochemical assay revealed that the GUS gene was preferentially expressed in the vascular bundle and the epidermal layer of leaf, petiole, and tuberous root.
To obtain transformed plants, we cocultured cotyledonary explants of Codonopsis lanceolata with Agrobacterium tumefaciens LBA4404, a disamed strain harboring a binary vector pBI121 carrying the CaMV35S promoter-$\beta$-glucuronidase (GUS) gene fusion used as a reporter gene and NOS promoter-neomycin phosphotransferase gene as a positive selection marker in MS liquid medium with 1mg/L BA. After 48 h of culture, explants were transferred onto MS solid medium with Img/L BA, 250mg/L carbenicillin, and 100mg/L kanamycin sulfate and cultured in the dark. Numerous adventitious buds formed on the cut edges of the explants after 2 weeks of culture. When subjected to GUS histochemical assay buds showed a positive response at a frequency of 15%. Explants formed adventitious shoot at a frequency of 56.7%, after 6 weeks of culture. Upon transfer onto the basal medium, most of the shoots were rooted and subsequently the regenerants were transplanted to potting soil. Southern blot analysis confirmed that the GUS gene was incorporated into the genomic DNA of the GUS-positive regenerants.
Oh, Myung Jin;Na, Hye Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.87-92
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2008
An improved protocol for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of watershield (Brasenia schreberi) was developed. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and white friable callus at a frequency of 80% when cultured on halfstrength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. However, the frequency of formation of pale-yellow globular structures and white friable callus decreased slightly with increasing concentrations of 2,4-D up to $3mg\;l^{-1}$, where the frequency reached ~50% of the control. Cell suspension cultures from zygotic embryoderived white friable callus were established using half-strength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. Upon plating of cell aggregates on half-strength MS basal medium, approximately 8.3% gave rise to somatic embryos and developed into plantlets. However, the frequency of plantlet development from cell aggregates was sharply increased (by up to 55%) when activated charcoal and zeatin were applied. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to normal plants in a growth chamber. The distinctive feature of this study is the establishment of a high frequency plant regeneration system via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of water-shield, which has not been previously reported. The protocol for plant regeneration of watershield through somatic embryogenesis could be useful for the mass propagation and transformation of selected elite lines.
Shoot apical meristem dome explants from cassava plants (Ghanaian local variety) produced somatic embryos at a frequency of 32% when cultured on MS medium supplemented with 2 mg/L 2,4-D. Somatic embryo segments formed secondary embryos at frequencies of up to 93% when cultured on medium containing 1 mg/L 2,4-D for 2 to 3 weeks. Since the somatic embryos were not capable of converting into plantlets, adventitious shoot were induced from the sliced embryo segments by culturing them on medium containing 0.1 to 5 mg/L BA. After 8 weeks of culture, numerous shoots formed on the segments at frequencies up to 100%. The shoots were rooted and successfully transplanted to potting soil.
Plant regeneration system from leaf and root segments of Lycoris chejuensis via bulblet formation was established. Surface-sterilized leaf and root segments were cultured on the B5 medium containing 2,4-D. After 12 weeks of culture onto B5 medium containing 2,4-D, white globular structures and white calluses were formed on the cut surface of the explants. The highest frequency of globular structures and calluses formation from leaf explants was 32.1% when leaf explants were cultured onto B5 medium supplemented with 1 mg/L of 2,4-D. However, the higher concentration of 2,4-D (over than 3 mg/L) resulted in decrease of the frequency. In comparison to leaf explants, root segments showed the highest frequency at a rate of 36.1% when root explants were cultured onto B5 medium supplemented with 3 mg/L of 2,4-D. These structures and calluses were sub-cultured and proliferated onto the same culture medium. Upon transfer to B5 basal medium, white globular structures were developed into bulblets and normal plantlets. After 4 weeks of incubation in the light, plantlets were successfully rooted over the frequency of approximately 90%. Rooted plantlets were successfully transferred to potting soil and acclimatized in the growth chamber. The plant regeneration system of Lycoris chejuensis established in this study, might be applied to mass proliferation, conservation of genetic resources and genetic transformation for molecular breeding.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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