Polyphenol oxidase was purified from an extract of tea leaf by ammonium sulfate fractionation followed by Sephadex G-150 column chromatography, which resulted in a 67-fold increase in specific activity. The enzyme had optimum pH 6.5 and was relatively heat stable. The substrate specificity of the tea leaf PPO showed high affinity toward pyrogallol and catechol. Potassium cyanide, sodium diethyldithiocarbamate, L-cysteine, 2-mercaptoethanol and ascorbic acid were potent inhibitors.
Another application of the new quantitative analytical method of prussic acid by "Microdiffusion analysis" for the determination of prussic acid in human blood was studied. The blood containing potassium cyanide was dropped in outer room of unit, and then N-sulfuric acid was added. The liberated HCN gas was absorbed into nickel sulfate solution of inner room, afterward, absorbed prussic acid was determined with EDTA by residual titration. The result was coincided with the result of Liebig Denigs' method at ordinary temperature.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.16
no.4
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pp.251-261
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1987
This study was attempted to increase the production of L-Threonine by Brevibacterium Flavum ATCC 14067, To select the strain which produce the highest threonine, mutants ere induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine treatment. The composition of media and cultural condition for its overproduction of threonine were also studied. In a threonine producer, strain B-13(Met-) was the strain producing the highest amount of threonige among methionine, lysine and isoleucine auxotrophs. The following results were obtained. 1. The wild strain and B-13(Met-) produced threonine 1.4mg/ml and 4.86mg/ml , respectively. 2. The optimum composition of medium for producing threonine by Brevibacterium Flavum B-13 was glucose 10%, ammonium sulfate 4%, potassium phosphate monobasic 0.2%, magnesium sulfate 0.05%, biotin $200{\mu}l$, thiamine $300{\mu}l$. Addition of nicotinic acid also led to increase L-threonine production. 3. In addition of organic nutrients to the fermentation medium, peptone n'ere effective and addition of methionine $100{\mu}g/ml$ produced the highest amount of L-Threonine. Aspartic acid and homoserine were also effective when these amino acid were added to the fermentstion medium. 4. Cultural conditon on threonine production by B-16 were investigated. The optimum pH was 7.0-8.0. The highest amount of threnine was produced after 4 days of cultural period.
This study was conducted to determine invertase activity in persimmon during the drying process and characterize the purified enzyme. As drying proceeded, invertase activity increased until 10 days and decreased gradually afterwards. Invertase in persimmon fruit was extracted with 250 mM potassium phosphate sulfate buffer at pH 7.4. The enzyme was purified by means of ammonium sulfate fractionation, column chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration on Sephadex G-200 column. The optimal temperature of enzyme was $40^{\circ}C$ and optimal pH was 5.0 and 6.0 for sucrose and raffinose, respectively. The enzyme was stable up to $50^{\circ}C$ and pH 3-6. The Km value of the enzyme, with sucrose as a substrate, was 2.5mM. Electrophoretic pattern of purified enzyme solution showed a single band.
Pigment concentrates with violet-red color and sweet taste were obtained from purple-fleshed sweet potato(PFSP) using ethyl alcohol and water. Extract from general potato(GP) were used as a control. The relative stability of PFSP pigment concentrate(PFSPPC) in a storage test over 15 days was confirmed in the order of dark > fluorescence > sun-light irradiation. The relative stability of GP pigment concentrate(GPPC) in a storage test over 15 days was confirmed in the order of sun-light > fluorescence > dark storage. The RRP of PFSPPC was higher than that of GPPC, but the color strength of GPPC was 1/2 that of PFSPPC. Treatment of PFSPPC with aluminum potassium sulfate(0.2~0.3%, w/w) best improved its stability. The improved RRPs of PFSPPC were 45.16~47.31% in sun light irradiation, 55.91~60.22% in fluorescence irradiation, and 76.34~75.97% in dark storage conditions. In substituting aluminum potassium sulfate for chitosan, an amount of 0.2~0.3%(w/w) was suitable, giving similar results in improving pigment stability for all concentrates tested. Also, freeze-dried PFSPPC powder was manufactured as a substitute for dextrin, and also as a substitute for chitosan to the extent of 0.25%(w/w). The results of storage stabilite for freeze-dried PFSPPC and GPPC powder over 15 days, irradiation were, PRRs of 74.47~89.36% and 61.54~76.92%, respectively. The stability improving effect of freeze dried PFSPPC powder was confirmed by the results of storage experiments at various conditions. The use of freeze-dried PFSPPC powder was therefore confirmed to be an effective treatment for general foods.
Peroxidase from Jerusalem artichoke tubers, which might be related to browning reaction, was purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose and Sephacryl S-200 chromatography. The optimum pH of the purified peroxidase was 5.0 and relatively stable at pH $5.0{\sim}6.0$ using substrate of p-phenylenediamine and $H_2O_2$. D-values for thermal inactivation at 60, 70 and $80^{\circ}C$ were 86, 45 and 33 sec, respectively. Activation energy was 4,111 J/mole. The enzyme showed the most sensitive specificity of substrate for p-phenylenediamine. The compounds such as 1mM potassium cyanide, 10mM sodium diethyldithiocarbamate, L-ascorbic acid, sodium hydrosulfite and L-cysteine inhibited completely while 1mM of $Ca^{2+}\;and\;Cu^{2+}$ activated the purified peroxidase.
Protoplasts were isolated from the vegetative thalli of Meristotheca papulosa using several commercial and crude enzymes. The suitable enzyme combination for the protoplast isolation was 4% abalone acetone powder, 4% Macerozyme R-10 and 4% Hemicellulase in the filtered seawater buffered with 50mM MES (pH 6.0) containing 0.6M mannitol and 0.5% potassium dextran sulfate. Yield of protoplast was $107.6{\times}10^4$ cells per gram of fresh thallus. Protoplasts were whitish ovoid in shape and ranged between $7{\mu} m$~ $24{\mu} m$ in diameter. Division of protoplasts was first observed 9 days after culture in $ASP_{12}$ medium, and the germination occurred within 25 days. The addition of Guillard's antibiotics in culture media was harmful to the regeneration of protoplasts.
Polyelectrolyte titration, which was called colloid titration is based on the stoichiometric reaction between oppositely charged polyelectrolytes, This can be used, for instance, to determine the charge density of a cationic polyelectrolyte, using an anionic polyelectrolyte of known charge density, such as potassium polyvinyl sulfate (PPVS). The technique requires a suitable method of end-point detection and there are several possibilities. In this work, two methods have been investigated: visual titrimetry based on the color change of a cationic dye (o-toluidine blue, o-Tb) and spectrophotometry based on the absorbance change corresponding to the color change of the same dye. These have been applied to several cationic polyelectrolytes with different charge density and molecular weight. In all cases, the cationic charge was due to quaternary nitrogen groups. In the case of cationic dye, it was shown that the sharpness depends on the charge density of cationic polyelectrolyte. With the polyelectrolytes of lower charge density, the binding to PPVS is weaker and binding of the dye to PPVS can occur before all of the polyelectrolyte charge has been neutralized. However, by carrying out titrations at several polyelectrolyte concentrations, good linear relationships were found, from which reliable charge density values could be derived. Effects of pH and ionic strength were also briefly investigated. For cationic polyelectrolytes (copolymers of acrylamide and dimethylaminoethy] acrylate), there was some loss of charge at higher pH values, probably as a result of hydrolysis. Increasing ionic strength causes a less distinct color change of o-Tb, as a result of weaker electrostatic interactions.
The production rates of leavening gases and textures of cookies were investigated with various chemical leavening agents(baking powders). The chemical leavening agents could be divided into three group of a fast-acting group such as potassium bicarbonate, tartaric acid, aluminium ammonium sulfate, and fumaric acid, a slow-acting group such as ammonium bicarbonate, sodium bicarbonate, $glucono-{\delta}-lactone$, and ammonium chloride. and a double-acting group such as anhydro monocalcium phosphate, disodium dihydrogenpyrophosphate, and aluminium potassium sulfate according to the different production rate of gases. The leavening rate of ammonium bicarbonate, which was the highest of all leavening agents used in this experiment, was 131.25%. But its after-taste in a cookie was not good due to the residual ammonia. $Glucono-{\delta}-lactone$ only had no after-taste. The higher leavening rate, the more peaks in texture profile graph. Ammonium bicarbonate showed the most peaks in this experiment. It was found that the number of peak had correlation with brittleness of cookies $(r^2=0.8176)$ and brittleness of cookies was different as to various chemical leavening agents.
The carbonized length and area of plywood by the various spreading concentration of water glass and the type of additives were measured in accordance with the 45° MecKel's burner method of the fire protection performance standard of the Korean National Fire Agency. As a result of treating water glass with a concentration of 20 to 50 % on plywood, the flame retardancy tended to increase in proportion to the concentration of water glass. However, the optimum concentration of water glass was determined to be 30 % due to the efflorescence and sticky on the surface of plywood treated with high-concentration water glass of more than 30 %. As a result of the experiment by adding different proportions of additives to the water glass with concentration of 30 %, the standard of flame performance standard was satisfied under the conditions with the addition of 15% potassium hydroxide and 1-10% aluminum hydroxide, respectively. On the other hand, there were no significant difference in the flame retardancy by adding magnesium sulfate. These results about the flame retardancy of plywood by water glass and additives were expected to be basic data for improving flame-retardant treated wood.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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