Kim, Koth-Bong-Woo-Ri;Lee, So-Young;Song, Eu-Jin;Park, Jin-Gyu;Lee, Ju-Woon;Byun, Myung-Woo;Kim, Kyu-Earn;Ahn, Dong-Hyun
한국축산식품학회지
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제30권3호
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pp.397-402
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2010
Pork is an excellent source of essential nutrients such as protein. However, pork can trigger hypersensitivity and serum albumin of pork is known as major allergen. In this study, to evaluate the effect of gamma irradiation on the allergenicity of porcine serum albumin (PSA), PSA solution was irradiated at 3, 5, 7, 10, 15, and 20 kGy. The changes in the ability of PSA to bind IgG and patient's serum caused by gamma irradiation were observed by ci-ELISA and immunoblotting. SDS-PAGE was used for measuring the conformational change of gamma-irradiated PSA. The ability of 3-kGy-irradiated PSA to bind p-IgG and patient's serum was decreased to 30% and 15%, respectively. The binding ability showed no significant differences among all irradiated samples. SDS-PAGE showed that the irradiated PSA bands were degraded and aggregated. Immunoblotting of irradiated PSA revealed that IgG and patient's serum were rarely recognized at 3 kGy. Therefore, gamma irradiation could be applied to less-allergenic pork products.
This study was conducted to evaluate the changes in porcine serum albumin (PSA), a major allergen, which occur when raw pork ham is marinated with kiwi or pineapple juice, and/or when the ham is pan broiled at $300^{\circ}C$ for 4 min after marination. In this study, raw pork ham was soaked for 4 h or 8 h in marinades containing commercial marinating sauce only, commercial marinating sauce and 7% kiwi juice, or commercial marinating sauce and 7% pineapple juice. When the meat was marinated and then pan-broiled, pork ham meat protein was significantly denatured and hydrolyzed, and the level of PSA in the meat was significantly reduced. The PSA contents of pork broiled without marination, pork that had been marinated in commercial marinating sauce alone, pork that had been marinated in commercial marinating sauce with kiwi juice, and pork that had been marinated in commercial marinating sauce with pineapple juice, were 95.4, 43.3, 14.3, and 5.4 ng/mL, respectively (p<0.05). Marinating with pineapple juice was more effective than marinating with kiwi juice; and marination for 8 h was more effective than marinating for 4 h. These results indicate that the level of PSA in pork ham is effectively reduced, when the meat is first marinated in sauces that contain kiwi or pineapple extracts for 8 h, rather than 4 h, and then cooked. Further study is needed to determine whether marinated pork meat reduces allergenicity in vivo, as well.
Safety of recombinant porcine somatotropin administration on pig was studied using 32 Landrace x Yorkshire crossbred pigs. The starting body weight ranged from 55.5kg to 65.3kg. Eight pigs were allotted to each low dose group of sustained releasing rPST(SL), high dose group of sustained releasing rPST(SH), daily injection group of rPST(DI), and control group(C). Pigs in SL group and SH group were injected subcutaneously twice in 3 week-interval with 1000$\mu\textrm{g}$ and 2000$\mu\textrm{g}$ of sustained releasing rPST per kg body weight, respectively. Pigs in DI group were injected intramuscularly with 100$\mu\textrm{g}$ of rPST everyday for 6 weeks. Blood was collected from anterior vena cava just before the first treatment, and at four weeks and six weeks of experiment. Hematological parameters and blood chemical parameters indicating liver function, kidney function, electrolyte metabolism, mineral metabolism and lipid metabolism were determined. Necropsy and urinalysis were performed after final blood collection. The results were summarized as follows, and it is concluded that rPST administration does not affect pig health negatively. 1. rPST administration did not affect kidney function as manisfested by BUN, creatinine and urinalysis. 2. rPST administration did not affect liver function as manisfested by total protein, albumin, serum AST activity serum ALT activity serum ALP activity, serum LDH activity, serum GGT activity and serum SDH activity. 3. rPST administration did not affect skeletal muscle, cardiac muscle and brain as manifasted by serum AST activity and serum LDH activity. 4. rPST administration increased blood glucose level within normal range. 5. rPST administration did not affect lipid metabolism as manisfested by triglyceride, cholesterol, and phospholipid concentrati on. 6. rPst administration dia not affect mineral metabolism as manisfested by calcium, phosphorus, magnesium and iron concentration. 7. rPST administration did not affect electrolyte metabolism as manisfested by Na, K, chloride concentration. 8. rPST administration did not affect erythrocyte count, leukocyte count, thrombocyte count, and plasma fibrinogen level.
Microwave,초음파 및 초고압 처리에 의한 PSA의 항원성 변화를 살펴본 결과는 다음과 같다. microwave처리에 의한 변화를 알아본 결과 처리시간이 증가함에 따라 PSA와 항체와의 결합력이 감소하였으며 특히 10분 처리 시에 약 30% 정도로 가장 낮은 결합력을 나타내었다. SDS-PAGE 결과에서는 5, 10분 처리 시에 PSA band가 많이 약화되었으며 immunoblotting에서도 5, 10분 처리한 PSA가 항체와 거의 반응하지 않았다. 하지만 열을 배제하고 microwave 처리한 경우에는 처리구 모두 큰 변화 없이 높은 결합력을 유지하였다. 초음파 처리(5, 10, 30 및 60분)에 의한 PSA의 항원성 변화를 살펴본 결과에서는 초음파 처리구 모두 약 78% 정도의 높은 결합력을 보였으나 immunoblotting에서는 초음파 처리한 PSA가 항체와 거의 반응하지 않았다. PSA에 초고압 처리(200, 300 및 400 MPa)한 후 항원성 변화를 살펴본 결과 초고압 처리구 모두 PSA와 항체와의 결합력이 약 98%로 높은 결합력을 유지하였으며 immunoblotting에서도 초고압 처리구의 PSA가 항체와 강하게 결합하였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 열을 배제한 microwave, 초음파 및 초고압 처리는 PSA의 항원성을 감소시키지 못하였으나 열을 배제하지 않은 microwave 처리는 시간이 증가함에 따라 PSA의 항원성을 크게 감소시켰으므로 이를 저 알레르기 돼지고기 식품 개발에 응용할 수 있을 것으로 사료된다.
The effect of active immunization against porcine somatostatin (SRIF-14) on somatostation and somatotropin secretion profile in 18 gilts was investigated. Gilts were assigned to the following treatments: control (sham injection, n = 6); bovine serum albumin (BSA) (injection of BSA with bacterial protein adjuvant, n = 6); SRIF (injection of BSA-SRIF-14 conjugate with bacterial protein adjuvant n = 6). Serum SRIF and pST were assayed from the blood samples taken on day 7 after the last immunization injection. Anti-SRIF antibody titres were assayed in weekly samples two weeks after the initial immunization to one week after the last immunization. Results revealed that the immunization protocol used in the present investigation failed to produce antibodies capable of neutralizing endogenous somatostatin. In addition, the porcine somatotropin assay revealed no significant differences in baseline pST concentration, mean peak amplitude and number of peaks during a 24 h secretory period among SRIF, BSA and control treatment. There were also no differences in SRIF baseline concentration, peak amplitude, and number of peaks during a 24 h secretory period among any of the three treatments. Circulating concentrations of pST and pSRIF were highly correlated (r = -0.09). Furthermore, anti-SRIF antibody titre was not detected in the serum of the gilts actively immunized against SRIF. These data, collectively, suggest that the protocol employed in the present investigation for active immunization against SRIF is not an effective method for changing SRIF and pST secretion profiles of the gilt and thus to enhance performance.
이배체 단위발생 돼지 난자를 체외 배양시 배반포 형성 단계에서 FBS (우태아 혈청), BSA (우혈청 알부민), EGF(상피세포 성장인자)를 배양액에 첨가하였을 때 이배체 단위발생 에서 총세포수, 세포사멸 및 세포사멸에 관여하는 유전자의 발현 효과를 조사하고자 본 연구를 수행하였다. 0.4% BSA를 배양액에 첨가 하였을 때 2 세포기 단계 단위발생의 발달은 배반포 까지는 강화 되었다 (p<0.01). FBS 처리 시는 배반포의 세포 수는 감소시켰으나 세포 사멸률은 증가하였다(p<0.01). 하지만 EGF가 존재할 때 BSA 처리는 총 세포수를 증가 시켰다. RT-PCR의 결과에 의하면 EGF는 0.4% BSA가 존재하는 배양액에서는 Bcl-xL mRNA 발현을 증가시키고 BSA와 EGF 가 단독으로 존재 할 때는 효과가 없었다. 하지만 FBS 처리시 Bcl-xL 유전자 발현은 감소하고 Bak 유전자의 발현은 증가시킨다. 이러한 결과 세포사멸에 관여하는 유전자의 발현은 배양액의 첨가물에 따라 유의적으로 영향을 받으며, 돼지 배아의 체외 배양시 세포사멸과 초기발달에 관여함을 시사한다.
Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) is a multifunctional cytokine that has been implicated in the regulation of pre-implantation embryo development across several species. The aim of this study was to determine the effects of mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (mGM-CSF) on development of porcine parthenotes and nuclear transferred embryos, and on their expression of implantation-related genes. In the presence of bovine serum albumin, mGM-CSF did not increase the percentage of oocytes that developed to the blastocyst stage and at day 7 did not increase oocyte cell number. Addition of 10 mM GM-CSF to protein-free culture medium significantly increased the compaction and blastocoel formation of 1- to 2-cell parthenotes and cloned embryos developing in vitro. However, cell number was not increased when they were cultured in the presence of GM-CSF. Semi-quantitative reverse transcripts polymerase chain reaction (RT-PCR) revealed that mGM-CSF enhances mRNA expression of the leukemia inhibitory factor receptor, but does not influence interleukin-6 or sodium/glucose co-transporter protein gene expression in blastocyst stage parthenotes. These results suggest that mGM-CSF may enhance viability of porcine embryos developing in vitro in a defined culture medium.
Lee, H. Y.;S. H. Jun;Y. J. Chung;X. S. Cui;Kim, N. H.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.22-22
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2003
This study was conducted to determine effects of polyvinyl alcohol (PVA), fetal bovine serum (FBS) and bovine serum albumin (BSA) on blastocoel formation, cell number, apoptosis and apoptosis-related gene expression of porcine diploid parthenotes developing in vitro. Embryos were collected from 2-cell or late 4-cell diploid parthenotes that activated with electro pulse, and in vitro cultured in the NCSU 23 medium supplemented without or with 0.1% PVA, 10% FBS or 0.4% BSA for day 7. The morphological analysis of apoptosis in embryos was carried out using propidium iodide staining and terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling. The expressions of Bcl-xL, Bak and P53 in blastocyst stage parthenotes and in vivo-derived blastocysts were determined using semiquantitative RT-PCR. The addition of 0.4% BSA to the culture medium enhanced the development of 2- or late 4-cell stage parthenotes to the blastocysts stage (P < 0.01) while FBS decreased the incidence of blastocoel formation. FBS also reduced cell numbers of blastocysts developed from both 2- (P < 0.001) and late 4-cell (P < 0.05) embryos and increased percentage of apoptosis in the blastocysts (P < 0.001). The relative abundance of Bcl-xL mRNA in diploid parthenotes cultured from 2-cell stage in the presence of BSA is similar with that in in vivo derived embryos, but is significantly higher than in parthenotes cultured with FBS, PVA or none protein supplement control. Bak mRNA showed a significant increase at the blastocyst stage in FBS supplement medium. This result suggests that apoptosis related gene expression is significantly affected by protein supplements, which may result in alteration of apoptosis and embryo viability of porcine embryos developing in vitro.
젖소, 한우, 돼지, 그리고 산양의 초유 중 단백질의 변화를 초일부터 7일까지 조사하였다. 돼지의 초유를 제외한 젖소, 한우, 그리고 산양의 초유에서 면역글로불린, 락토페린, 락토퍼옥시데이스, 혈청 알부민, IgG heavy chain, 그리고 IgG light chain은 분만 후, 초일 함량이 현저히 높았고, 2일째부터 급격히 감소하는 것을 보여 주었다. 그리고 ${\alpha}_{S2}$-카세인, ${\alpha}_{S1}$-카세인, ${\beta}$-카세인, ${\kappa}$-카세인, ${\beta}$-락토글로불린 및 ${\alpha}$-락트알부민은 분만 직후부터 7일까지 현저한 함량의 차이는 나타나지 않았다. 한편, 돼지 초유의 경우는 모든 단백질이 분만 후, 초일부터 2일까지 높은 함량을 나타내었다.
The antioxidant capacity of porcine splenic hydrolysate (PSH) was studied in vitro and in vivo. Peptide hydrolysates were prepared, using the proteolytic enzyme $Alcalase^{(R)}$. The molecular weights of PSH were 37,666, 10,673, 6,029, and 2,918 g/mol. Rats were fed a 5% (w/v) PSH diet, instead of a casein diet, for 4 wk. The food intake, body weight gain, and liver weight of rats in the PSH group were similar to those in the control (CONT) group. There were no differences in the serum total cholesterol, triglyceride, total protein, or albumin levels between PSH and CONT groups. However, the level of in vivo hepatic lipid peroxidation in PSH group was significantly lower than that in CONT. In vivo hepatic catalase and glutathione peroxidase activities in the PSH group were significantly higher than those in the control group. The in vitro protein digestibility of PSH was lower than that of casein. The in vitro trolox equivalent antioxidant capacity of PSH was significantly higher than that of the peptide hydrolysate from casein. The in vitro radical scavenging activities of PSH were significantly higher than those of the peptide hydrolysate from casein. The present findings suggest that porcine splenic peptides improve the antioxidant status in rats by enhancing hepatic catalase and GSH-Px activities, and indicate a potential mechanism of radical scavenging activity during gastrointestinal passage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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