본 연구에서는 국내시장에서 유통되는 육류, 냉동식품, 생우유, 조개류 등과 같은 식품으로부터 L. monocytogenes들을 분리하고 혈청형을 결정하였다. RAPD 결과를 통해서 L. monocytogenes는 Listeria 속의 다른 균주들과 전체 밴드의 수와 크기에서 구별이 되었다. 또한, L. monocytogenes는 2개 그룹으로 구별되었으며, 그룹 I은 L. monocytogenes 1/2b, 4e, 4b, 그룹 II는 L. monocytogenes 1/2a, 1/2c, 3 혈청형 그룹별로 분류되었다. 결론적으로 RAPD 방법과 serotyping은 L. monocytogenes를 분류하는 데에 있어서 기존의 방법의 단점을 보완한 새로운 가능성을 제시하였다.
The study was carried out for comparison of variants and development of genetic markers using Randomly Amplified Polymorphic D사A (RAPD) analysis method. The ginseng variants used were as follows: Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101 selected by the pureline selection method, and 6 kinds of Jakyung-Chong strains Uinjakyung, Jakyung-Chong 81783, Jakyung-Chong 847913, Jaky tong-Chong 79742, Jinjakyung of USSR, and Mimaki of Japan). Four of 10 RAPD primers showed the distinctive polymorphism among 9 ginseng variants and lines, and were selected for more detailed polymorphic analysis. The sequences of 4 selected primers were TGCCGAGCTG (Primer#2), AATCGGGCTG (#4), GAAACGGGTG (U7), and GTGACGTAGG (#8). All primers produced several common bands among the strains. However, when primer # 2 was applied, the electrophoregram showed the specific band at 1.8 kb region in Chungkyung-Chong, Hwangskoog- chong, and KG101, and 1 kb in the Jakyung-Chong 847913. In primer #4, 1.1 kb band was shown in Chungkyung-Chong, Hwangskoog-Chong, KG101, and Jakyung-Chong 79742. In primer # 7, 700 bp band was appeared in Jakyung-Chong 81783 and Jinjakyung of USSR In primer # 8, 800 bp band was observed only in Mimaki, comparing to another strains. When Similarity Index (SI) was calculated, Chungkyung-Chong and Hwngskoog-Chong, and Jakyung- chong 81783 and Jinjakyung of USSR showed the most close SI, 0.11 and 0.08, respectively. The data of KG101, which showed the SI of 0.13 with the group of Chungkyung-Chong and Hwangskoog-Chong, coincided with the fact that it was released from Hwangskoog-Chong by breeding process. The data of Jakyung strains indicated the significant variation among the strains. From these results, RAPD analysis method could be succesively applied to the classification and genetic analysis for breeding of Korean ginseng.
In order to develop molecular markers related to stay green phenotype, AFLP analysis was conducted using near-isogenic lines for either stay green or non stay green trait. Both lines have characteristics of multi-ear and tillers (MET). Two out of 64 primer combinations of selective amplification identified three reproducible polymorphic fragments in MET corn with stay green. Both of E+AGC/M+CAC and E+AAG/M+CAA primer combinations produced two and one specific polymorphic fragments linked to stay green trait, respectively. For the conversion of AFLPs to sequence tag sites (STSs), primers were designed form both end sequences of each two polymorphic fragments. One fragment, which was amplified with E+AAG/M+CAA primer combinations, possessed 298 bp long and showed a $91\%$ homology with maize retrotransposon Cinful-l. One out of two polymorphic fragments produced with E+AGC/M+CAC primer combination had 236 bp long and matched a $96\%$ homology with an intron region of 22kDa alpha zein gene cluster in Zea mays. One out of two PCR fragments amplified with MET2 primer set in the stay green MET was not produced in the non-stay green MET. The developed AFLP and STS marker could be used as an efficient tool for selection of the stay green trait in the MET inbred.
A major aim of cattle genome research is to identify candidate genes associated with meat quantity and quality through QTL analysis for application in the livestock industry. Therefore, this study focused on discovery of useful SNPs within the LOC534614 gene, containing 12273_165 SNP which is located on the same site as the QTL on chromosome 6, and evaluation of the association between SNP and body weight and cold carcass weight in Hanwoo (Korean cattle) As a result of a BLAST search of the NCBI web site, we discovered that the mRNA sequence of the LOC534614 gene was similar to that of the coiled-coil domain containing 158 (CCDC158) for dog and human. According to the direct DNA sequence from the CCDC158 gene, we identified 19 polymorphic SNPs within exons and their flanking regions. Among them, 17 polymorphic SNPs were selected for genotyping in Hanwoo (n = 476) and seventeen marker haplotypes containing 12273_165 SNP (frequency >0.1) were identified. As a result of the association between 17 polymorphic SNPs and Hanwoo (n = 476), g.8778G>A SNP in exon 6 was found to be a non-synonymous SNP, and was significantly associated with body weight and cold carcass weight (p<0.05). We discovered 19 polymorphic SNPs in the CCDC158 gene on the QTL region of BTA 6 in Hanwoo and identified that the g.8778G>A SNP was significantly associated with body weight and cold carcass weight (p<0.05), which causes an amino acid variation from valine to methionine. Furthermore, statistical analysis demonstrated that the CCDC158 gene is strongly associated with body weight and cold carcass weight in Hanwoo. In this regard, the g.8778G>A SNP in the CCDC158 gene can be useful as a positional candidate for body weight and cold carcass weight for marker-assisted selection in Hanwoo.
An, Hyejin;Jo, Ick-Hyun;Oh, Youn-Lee;Jang, Kab-Yeul;Kong, Won-Sik;Sung, Jwa-Kyung;So, Yoon-Sup;Chung, Jong-Wook
Mycobiology
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제47권4호
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pp.527-532
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2019
We designed 170 new simple sequence repeat (SSR) markers based on the whole-genome sequence data of button mushroom (Agaricus bisporus), and selected 121 polymorphic markers. A total of 121 polymorphic markers, the average major allele frequency (MAF) and the average number of alleles (NA) were 0.50 and 5.47, respectively. The average number of genotypes (NG), observed heterozygosity (HO), expected heterozygosity (HE), and polymorphic information content (PIC) were 6.177, 0.227, 0.619, and 0.569, respectively. Pearson's correlation coefficient showed that MAF was negatively correlated with NG (-0.683), NA (-0.600), HO (-0.584), and PIC (-0.941). NG, NA, HO, and PIC were positively correlated with other polymorphic parameters except for MAF. UPGMA clustering showed that 26 A. bisporus accessions were classified into 3 groups, and each accession was differentiated. The 121 SSR markers should facilitate the use of molecular markers in button mushroom breeding and genetic studies.
During the period from January, 1975, to June, 1989, one hundred patients with histopathologically proven polymorphic reticulosis in the upper respiratory tract were treated with radiation therapy and the analysis of treatmemt results was undertaken. One hundred patients (69 males, 31 females) with a mean age of 46 years (range 12-79 years) were presented. Nasal cavity was the most frequent site of involvement ($56{\%}$), and 44 cases had multifocal sites of involvement. The incidence of cervical lymph node metastasis at initial diagnosis was $24{\%}$. Staging was determined by Ann-Arbor classification, retrospectively. The number of patients of stage IE, IIE, IIIE and IVE were 35, 60, 1, and 4, respectively. The overall 5 year actuarial survival rates were $38.4{\%}$. The difference in 5 year survival rates between patients with stage IE and IIE, with solitary and multiple, with CR and PR after irradiation were significant statistically. For the analysis of failure patterns, failure sites include the following: local failure alone (30/55=$54.6{\%}$), systemic failure alone (9/55=$16.4{\%}$), both local and systemic failure (16/55=$29.0{\%}$). Retrograde slide review was available in 29 cases of PMR with respect to histopathologic bases, and immunohistochemical studies were performed using MT1 and DACO-UCHL-1 as T-cell markers, MB2 as a B-cell marker and alpha-1-antichymotrypsin as a histiocytic markers. All that 29 cases showed characteristic histologic features similar to those of peripheral T-cell lymphoma and showed positive reactio to the T-cell marker. These findings suggest strongly that quite a significant portion of PMR may be in fact T-cell lymphoma.
한국의 7가지 대표적인 표고품종에 대하여 RAPD(Random Amplified Polymorpic DNA) 검정을 실시하여 품종간의 구분이 가능한 지를 시도하였다. 표고 품종간의 계통분류에 적합한 RAPD marker를 생성시키기 위하여 OPA-01에서 OPA-20까지 20개의 primer를 사용한 결과, 9가지의 primer는 품종식별에 유용한 RAPD pattern을 보였으나, 나머지 11가지의 primer는 품종 식별에 사용하기 어려운 것으로 나타났다. 9가지 primer중 7개 품종을 모두 구분할 수 있는 단일 primer는 없었지만, 9가지중 2개의 조합을 취하면 어떤 경우도 7개의 표고 품종을 구분지울 수 있음으로써 RAPD 검정법이 표고 계통의 분류에 매우 정밀한 방법임을 알 수 있다.
피속 잡초 수집종 33종을 대상으로 RAPD marker를 이용하여 피 수집종 간의 유전적변이를 알아보고, 수집종들을 판별할 수 있는 DNA marker를 선발하기 위하여 본 실험을 수행한 결과를 요약하면 다음과 같다. Operon사에서 제작된 74개의 10-mer RAPD primer 가운데에서 명확한 다형성을 보이는 6개 primer를 선발하였다. 이들 primer로 PCR에서 증폭된 밴드는 31개이었으며 이 가운데 다형성을 나타내는 band는 26개(83.9%)로 나타났다. 피 수집종 간의 유연 관계를 분석한 결과 공시된 피 수집종은 크게 3그룹으로 분류할 수 있었다.
본 연구에서 넙치와 조기의 원산지를 판별하기 위한 도구로 RAPD PCR 방법의 가능성을 확인하였다. 넙치는 한국의 주문진 자연산, 통영 양식산, 거제 양식산 그리고 북한 자연산을 실험에 사용하였다. 조기는 한국산과 중국산을 사용하였다. 넙치의 RAPD 패턴에서는 뚜렷하고 일관성이 있는 진단용 띠들을 쉽게 찾을 수 있었다. 조기의 경우에는 유전적인 이질성으로 인하여 각 개체의 RAPD 패턴에서는 일관성이 있는 진단용 띠를 찾기 어려웠지만 각 원산지별로 얻은 RAPD 패턴에서는 가능성이 있는 진단용 띠들을 찾을 수 있었다.
Phylogenetic relationships in Korean watermelons were evaluated by genetic similarity coefficients using 15 SSR(simple sequence repeat), 14 SCAR(sequence characterized amplified region) and 14 CAPS(sequence characterized amplified region) markers. The SSR markers were selected from previously reported melon and watermelon SSRs through testing polymorphisms within a set of commercial $F_1$ varieties. The SCAR and CAPS markers were developed from polymorphic AFLP(amplified fragment length polymorphism) markers between inbred lines 'BN4001' and 'BN4002'. From the AFLP analysis, 105 polymorphic fragments were identified between the inbred lines using 1,440 primer combinations of EcoRI+CNNN and XbaI+ANNN. Based on the sequencing data of these polymorphic fragments, we synthesized sequence specific primer pairs and detected clear and reliable polymorphisms in 27 primer pairs by indels(insertion/deletion) or RFLP(restriction fragment length polymorphism). A total of 43 sequence-based PCR markers were obtained and polymorphic information content(PIC) was analyzed to measure the informativeness of each marker in watermelon varieties. The average PIC value of SCAR markers was 0.41, which was similar to that of SSR markers. Genetic diversity was also estimated by using these markers to assess the phylogenetic relationships among commercial varieties of watermelon. These markers differentiated 26 Korean watermelon varieties into two major phylogenetic groups, but this grouping was not significantly correlated with their morphological and physiological characteristics. The mean genetic similarity was 66% within the complete set of 26 commercial varieties. In addition, these sequence-based PCR markers were reliable and useful to identify cultivars and genotypes of watermelon.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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