This paper reported the establishment of mass production system of adventitious roots of Eleutherococcus sessiliflorus through the shake flask and bio-reactor culture. Induction of adventitious roots was started from the explants of germinated somatic embryos on half-strength Murashing and Skoog (MS) solid medium. The frequency of adventitious root formation was better in the explants comprising the basal hypocotyl parts than root explants alone. Among the different auxins tested (NAA, IBA and IAA), frequency of adventitious root induction was highest on medium with 0.5 mg/L NAA, and produced $16.3\pm1.9$ roots per explant. In shake-flask culture, deletion of $NH_4NO_3$ of MS medium was effective for induction of adventitious root compared with both full and half-strength MS media. Fresh weight increase of induced adventitious roots was performed well in medium with 0.5 mg/L IBA. When adventitious roots produced in shake-flask culture were transferred to 10-liter bioreactor, 5.5 times of fresh weight increase was gained after one month of culture. HPLC analysis revealed that the amount of eleutheroside E and E1 was higher in in vitro cultured adventitious roots than the 3 year-old field cultivated root barks of Eleutherococcus sessiliflorus. The content of eltutheroside B was much lower in adventitious roots than that of field cultivated one.
Comparative studies on medium supply in bioreactors (raft, immersion and ebb and flood) have revealed that multiplication and growth of Alocasia Amazonica were greatest in the raft system, while lowest in ebb and flood system. In the raft system, the basal part of the shoots was continuously in contact with medium, which enabled a constant uptake of nutrients as well as aeration to the explants. The number and the size of leaf stomata were higher in the raft system compared with immersion and ebb&flood system. In the immersion system, plantlets were deformed and epidermal cells in leaves were irregular with a large intercellular space. The results suggested that the medium supply should be controlled properly to maintain normal and healthy plantlets during liquid cultures in bioreactors Which affects morphology and physiology Of the plantlets.
Proceedings of the Membrane Society of Korea Conference
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1998.06a
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pp.113-133
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1998
In activated sludge process, sludge settling condition is affected by organic loading rate or operation condition, and if settling condition is getting worse, it is common that overall process fails due to wash-out of biomass causing low concentration in the aeration tank. Also activated sludge process has such several problems as requiring large area, consuming a lot of power and producing large volume of sludge. Increased public concern over health and the environment combined with a strong desire to reduce capital, operating and maintenance costs, have created a need for innovative technologies for building new high quality effluents which vail meet 21st century crkeria. MBR(Membrane Bioreactor) process consists of a biological reactor and ultrafiltration(UF) membrane system that replaces the conventional clarifier of an activated sludge process. The main operating advantages of this system are that the quality of the effluent is independent of the settleability of the mixed liquor and that the effluent is free of suspended solids in any operating condition. It is possible to eliminate clarifier and to reduce the volume of aeration tank because it can afford to accumulate high biomass concentration in the bioreactor(20, 000~30, 000mg/L), which would not be possible in a conventional activated sludge process. Therefore, this process reduces overall treatment plant area. In addition to those advantages, Longer SRT condition enables higher sludge digestion in MBR process so the sludge volume produced is 50 to 70% lower than that of conventional activated sludge process There are two kinds of MBR process according to the allocations of membrane. One is cross flow type MBR of which module is located outside of the bioreactor and mixed liquor is driven into the membrane module. The other is submerged type MBR process of which module is submerged in the bioreactor and mixed liquor is generally sucked from the lumen side. addition to that the cake layer is often removed by the uplifting flow of bubbling air. A submerged MBR process is superior to a crossflow MBR in regard to the power consumption because suction pressure of a submerged MBR is generally lower than that of a crossflow MBR which has recirculation pump. A submerged MBR, therefore, has the potential to be applied to small wastewater treatment plants that need low cost treatment systems.
Recently, an innovative method for wastewater treatment and nutrient removal was developed by combining the sequence batch reactor and membrane bioreactor to overcome pollution caused by shipboard sewage. This system is a modified form of the activated sludge process and involves repeated cycles of mixing and aeration. In the present study, the bacterial diversity and dominant microbial community in this wastewater treatment system were studied using the MACROGEN next generation sequencing technique. A high diversity of bacteria was observed in anaerobic and aerobic bioreactors, with approximately 486 species. Microbial diversity and the presence of beneficial species are crucial for an effective biological shipboard wastewater treatment system. The Arcobacter genus was dominant in the anaerobic tank, which mainly contained Arcobacter lanthieri (8.24%), followed by Acinetobacter jahnsonii (5.81%). However, the dominant bacterial species in the aerobic bioreactor were Terrimonas lutea (7.24%) and Rubrivivax gelatinosus (4.95%).
This experiment was carried out to develop rapid mass propagation via shoot organogenesis system from adventitious roots of Rehmannia glutinosa. The induction of adventitious roots from leaf explants was most favorable to MS solid medium supplemented with 2mg/L IBA. However, the growth of adventitious roots was highest when they were cultured on 1/3 strength MS liquid medium supplemented with 2mg/L IBA. When the adventitious roots were grown in 10L bioreactor, 10g roots as initial inoculum was increased to 225g after 6 weeks of culture. The harvested roots were cultured onto solid medium to induce plant regeneration. The optimal adventitious shoot formation was observed on MS medium supplemented with 2mg/L BA. Rooting of individual shoots was induced after transfer to half strength MS medium without growth regulators. Plantlets after acclimatization were successfully transplanted in the field and no phenotypic variation was observed among them.
Kim Yun-Soo;Hahn Eun-Joo;Shin Cha-Gyun;Paek Kee-Yoeup
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.2
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pp.111-116
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2005
The two different ways to supply air inside the bioreactor were examined in the adventitious root cultures of Panax ginseng C.A. Meyer. First, the aeration rate varied at 0.05, 0.1, 0.2 and 0.3 vvm, respectively which were supplied during the whole culture period. Second, the amount of air supply was increased from 0.05 to 0.3 vvm at 10-day intervals in proportion to the root growth. Both the root growth and the ginsenoside accumulation were maximized to 175.8 g dry wt. of root growth and 4.3 mg/g dry wt. of ginsenoside accumulation when the aeration rate was increased gradually. The effect of the sparger pore size (15, 30 and $60\;{\mu}m$) in the bioreactor was also investigated, which suggested the greatest root growth (175.9 g dry wt.) in the $15{\mu}m$-sized sparger and the highest ginsenoside content (4.3 mg/g dry wt.) in the $60\;{\mu}m$ size. Finally, the diameter of a sparger ($15\;{\mu}m$-sized) varied at 1.5, 3.0, 5.0 and 8.0 cm, respectively. The highest root growth (191.9 g dry wt.) and the ginsenoside content (4.9 mg/g dry wt.) were obtained in the sparger diameter of 8.0 cm.
The kinetics of Ti-transformed Salvia miltiorrhiza cell cultures was studied in 250-$m\ell$ shake flasks by using B5 medium with addition of 30 gfL of sucrose. In the cell cultures, the maximum cell mass obtained was 11.5 g DW/L on day 15. The highest amount of phenolic compounds - rosmarinic acid (RA) and lithospermic acid B (LAB) reached 871.3 mg/L (day 15) and 121.3 mg/L (day 13), respectively. The total tanshinone production, i.e., intracellular plus extracellular cryptotanshinone, tanshinone 1, and tanshinone IIA, was 5.3 mg/L on day 13. For the cultivations in 2.4-L stirred bioreactors, the residual sugar level and medium conductivity were a little higher in a small turbine impeller reactor ($T_s$) than those in a large turbine impeller reactor ($T_L$), while a higher cell density was obtained in the $T_L$. For the production of tanshinones and phenolics, better results were obtained in the $T_L$ than in the $T_s$. In the $T_L$, similar or even a little higher production titers of tanshinones and phenolic compounds were achieved compared to those in the flasks. The results suggest that the shake flask results could be successfully scaled up to the $T_L$ reactor. Such a large impeller reactor like $T_L$ may be better than a small impeller one for the large-scale production of the valuable metabolites by the suspension cultures of Ti transformed S.miltiorrhiza cells. This is considered due to the beneficial culture environment in the $T_L$, such as low shear rates as estimated theoretically.
Transgenic plant cell cultures for the production of biopharmaceuticals including monoclonal antibodies, recombinant proteins have been regarded as an alternative platform in addition to traditional microbial fermentation and mammalian cell cultures. Plant-made pharmaceuticals (PMPs) have several advantages such as safety, cost-effectiveness, scalability and possibility of complex post-translational modifications. Increasing demand for the quantity and diversity of pharmaceutical proteins may accelerate the industrialization of PMP technology. Up to date, there is no plant-made recombinant protein approved by USFDA (Food and Drug Administration) for human therapeutic uses due to the technological bottlenecks of low expression level and slight differences in glycosylation. Regarding expression levels, it is possible to improve the productivity by using stronger promoter and optimizing culture processes. In terms of glycosylation, humanization has been attempted in many ways to reduce immune responses and to enhance the efficacy as well as stability. In this review article, all these respects of transgenic plant cell cultures were summarized. In addition, we also discuss the general characteristics of plant cell suspension cultures related with bioreactor design and operation to achieve high productivity in large scale which could be a key to successful commercialization of PMPs.
Prakash, Gunjan;Bhojwani, Sant S.;Srivastava, Ashok K.
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.4
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pp.185-193
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2002
With Increasing awareness towards environment-friendly and non-toxic pesticide azadirachtin obtained from neon tree (Azadirachta indica) is gaining more and more importance. Its broad-spectrum activity, Peculiar mode of action. eco-friendly and non-toxic action towards beneficial organisms has offered many advantages over chemical pesticides. All currently use commercial formulations based on azadirachtin contains azadirachtin extracted from seeds of naturally grown whole plants which is labour intensive process depending upon many uncontrollable geographical and climatic factors. Plant tissue culture can be a potential process for the pro-duction, offering consistent, stable and controlled supply of this bioactive compound, However the research on tissue culture aspects of production are in preliminary stage and requires culture and process optimization for the development of a commercially viable process. This review states the present status and future challenges of plant tissue culture for azadirachtin production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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