본인은 생후 24일 된 쥐에 PMS와 더불어 estradiol을 처리하면 排卵이 예정보다 24시간 앞당겨 일어남을 보고한 바 있다. 본 실험은 이의 계속 연구로 腦下垂體前葉에서 분비되는 preovulatory LH surge가 PMS 처리 후 51$\\sim$56시간에 일어남을 보았다. 그러나 estradiol을 PMS와 동시에 처리하면 예정보다 24시간 단축된다. 卵巢를 제거한 쥐에 0, 24, 48시간에 $2.5\\sim 40\\mu g$의 estradiol을 처리하면 51$\\sim$56시간에 腦下垂體의 LH가 증가되지 않는다. 그러나 estradiol을 처리하고 이어 48시간에 1mg의 progesterone을 처리하면 卵巢를 제거한 쥐에서도 腦下垂體의 LH level은 증가된다. 본 실험의 결과로 estradiol처리가 PMS로 유도한 排卵을 24시간 앞당기는 사실은 estrogen이 progesterone과 길항작용으로 腦下垂體에서 LH분비를 24시간 앞당겨 일으키고, 따라서 排卵도 24시간 단축되는 것이라고 생각된다.
This study was to investigate the effect of soyabean isoflavones (SIF) on onset of puberty, serum hormone concentration, and gene expression in hypothalamus, pituitary and ovary of female Bama miniature pigs. Fifty five, 35-days old pigs were randomly assigned into 5 treatment groups consisting of 11 pigs per treatment. Results showed that dietary supplementation of varying dosage (0, 250, 500, and 1,250 mg/kg) of SIF induced puberty delay of the pigs with the age of puberty of pigs fed basal diet supplemented with 1,250 mg/kg SIF was significantly higher (p<0.05) compared to control. Supplementation of SIF or estradiol valerate (EV) reduced (p<0.05) serum gonadotrophin releasing hormone and luteinizing hormone concentration, but increased follicle-stimulating hormone concentration in pigs at 4 months of age. The expression of KiSS-1 metastasis-suppressor (KISS1), steroidogenic acute regulatory protein (StAR) and 3-beta-hydroxysteroid dehydrogenase/delta-5-delta-4 isomerase ($3{\beta}-HSD$) was reduced (p<0.01) in SIF-supplemented groups. Expression of gonadotropin-releasing hormone receptor in the pituitary of miniature pigs was reduced (p<0.05) compared to the control when exposed to 250, 1,250 mg/kg SIF and EV. Pigs on 250 mg/kg SIF and EV also showed reduced (p<0.05) expression of cytochrome P450 19A1 compared to the control. Our results indicated that dietary supplementation of SIF induced puberty delay, which may be due to down-regulation of key genes that play vital roles in the synthesis of steroid hormones.
배 경: Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP)은 양의 시상하부에서 추출된 신경펩타이드 호르몬으로 난소에도 존재하여 배양된 과립막 세포에서 스테로이드합성과 cyclic AMP 형성을 촉진함이 보고되었다. 목 적: 흰쥐 난소를 실험 모델로 사용하여 배란시 황체화호르몬 (luteinizing hormone; LH)에 의해 유도된 PACAP과 PACAP 수용체의 유전자 발현양상과 신호 전달경로를 규명하고자 하였다. 재료 및 방법: 미성숙 흰쥐의 배란전 난포를 체외 배양하면서 LH로 처리하고 PACAP 및 PACAP수용체의 유전자 발현을 보기 위해서는 Northern blot 분석과 in situ hybridization (ISH)을, 그리고 단백질 수준의 PACAP 검색을 위해서는 enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) 분석을 이용하였다. 결 과: LH 처리 후 Northern blot상의 PACAP 유전자 발현은 6~9시간에 일시적으로 최고치에 도달하였으며 ISH로 보아 과립막 세포에서 발현됨을 알 수 있었다. ELISA 분석 상 PACAP 단백질도 LH처리 후 6~12시간에 최고치를 나타내었으며, PACAP 수용체 mRNA 역시 3~9시간에 최고치로 과립막 세포에서 발현되었다. Adenylate cyclase (AC) 억제제인 MDL12330A 처리시 LH로 발현된 PACAP mRNA가 감소되며, AC의 활성제인 forskolin 처리에는 LH시와 유사한 PACAP mRNA의 발현양상을 나타내었다. 그러나 protein kinase C (PKC)의 억제제인 chelerythrine과 2-0-tetradecanolphorbol-13-acetate (TPA) 처리로는 PACAP 의 유전자 발현에 영향을 주지 못하였다. 5-lipoxygenase의 억제제인 MK886이나 nordihydroguaiaretic acid (NDGA)로 처리한 결과 LH로 유도된 PACAP 유전자의 발현이 감소되었으나, cyclooxygenase의 억제제인 indomethacin은 별로 영향을 주지 못하였다. MEK와 p38의 억제제인 PD98059와 SB203580도 LH로 촉진 된 PACAP의 유전자 발현을 농도 의존적으로 억제하였다. 결 론 : 배란전 난포에서 PACAP과 PACAP 수용체의 유전자 발현은 모두 LH의 폭발적 분비에 의해 유도되어 일시적으로 과립막 세포에서 나타나 배란을 위한 국소적인 조절 작용을 할 것으로 추정되며, LH로 촉진된 PACAP 유전자 발현을 위한 신호전달은 cAMP-PKA, lipoxygenase 및 MAP kinase 경로를 통하는 것으로 사료된다.
Objective : The inter-rater reliability of the modified Knosp's classification was measured before the analysis. The clinical validity of the parasellar extension grading system was evaluated by investigating the extents of resection and complication rates among the grades in the endoscopic endonasal transsphenoidal surgery (EETS) for pituitary adenomas. Methods : From November 2008 to August 2015, of the 286 patients who underwent EETS by the senior author, 208 were pituitary adenoma cases (146 non-functioning pituitary adenomas, 10 adrenocorticotropic hormone-secreting adenomas, 31 growth hormone-secreting adenomas, 17 prolactin-secreting adenomas, and 4 thyroid-stimulating hormone-secreting adenomas; 23 microadenomas, 174 macroadenomas, and 11 giant adenomas). Two neurosurgeons and a neuroradiologist independently measured the degree of parasellar extension on the preoperative sellar MRI according to the modified Knosp's classification. Inter-rater reliability was statistically assessed by measuring the intraclass correlation coefficient. The extents of resection were evaluated by comparison of the pre- and post-operative MR images; the neurovascular complications were assessed by reviewing the patients' medical records. The extent of resection was measured in each parasellar extension grade; thereafter, their statistical differences were calculated. Results : The intraclass correlation coefficient value of reliability across the three raters amounted to 0.862. The gross total removal (GTR) rates achieved in each grade were 70.0, 69.8, 62.9, 21.4, 37.5, and 4.3% in Grades 0, 1, 2, 3A, 3B, and 4, respectively. A significant difference in the extent of resection was observed only between Grades 2 and 3A. In addition, significantly higher complication rates were observed in the groups above Grade 3A. Conclusion : Although the modified Knosp's classification system appears to be complex, its inter-rater reliability proves to be excellent. Regarding the clinical validity of the parasellar extension grading system, Grades 3A, 3B, and 4 have a negative predictive value for the GTR rate, with higher complication rates.
Objectives : The surgical results of 80 patients with growth hormone(GH)-producing pituitary adenoma were analyzed retrospectively to evaluate the clinical manifestations and to determine which preoperative factors significantly influenced the surgical outcome. Patients and Methods : The patients consisted of 39 men and 41 women and the age of patients at the time of initial operation ranged from 17 to 67 years(mean age, 40.5 years) Between January 1990 and June 1996, 77 patients underwent transsphenoidal surgery and 3 patients underwent craniotomy for GH-producing pituitary adenoma at our institution. Preoperative administration of octreotide was performed in 18 patients. Surgical control was defined as a postoperative serum basal level of GH less than 5ng/ml. A logistic regression model was used for univariate and multivariate analysis. Probability value of less than 0.05 was considered as statistically significant. Results : The most common presenting symptom was acromegaly, followed by headache, visual disturbance, and fatigability. Visual symptoms were present in 39% of the patients. Diabetes mellitus was associated in 24 patients and hypertension in 12. Preoperative mean basal level of GH was 93.2ng/ml(range 72-500ng/ml) which was closely related with tumor size(p<0.05). Grade II by Hardy's classification was the most common radiological type. Preoperative octreotide treatment significantly reduced the level of GH(p<0.05), but not enough to induce endocrinological remission. One patient died of cerebral infarction after craniotomy. The most common surgical complication was transient diabetes insipidus. The symptom of the earliest improvement after surgery was paresthesia and tightness of the hand and foot, followed by headache and easy fatigability. The preoperative visual symptom was improved in all patients. The patients who had hypertension or DM experienced alleviated symptoms in 67% and 92%, respectively. The overall rate of endocrinological remission was 44%. By multivariate logistic regression analysis, the size of tumor, extrasellar extension, and extent of removal were significant prognostic factors for endocrinologial remission. Conclusion : Early detection of a small tumor without extrasellar extension followed by a complete resection is highly recommended in order to achieve endocrinological cure of GH-producing pituitary adenomas.
무지개 송어의 뇌하수체 및 배양액에 존재하는 GTH II 농도를 측정하기 위해 Avidin- Biotin complex를 이용한 sandwich EIA 계을 개발했다. Protein A sepharose affinity chromatography을 통해서 얻어진 연어 GTH II의 rabbit IgG에 biotinylation시킨 것 (Biotin-salmon GTH II rabbit IgG)을 제2 항체로 사용하였고, Non-Biotin salmon GTH II rabbit IgG는 단지 protein A sepharose affinity chromatography에서 얻어진 IgG를 제 1 항체로 사용하였다. EIA는 sandwich법에 의해서 이루어졌으며, 효소반응 기질로는 TMB(3,3'5,5-tetramethylbenzidine)를 이용했으며, 반응후 450 nm의 흡광도에서 automatic microplate reader로 측정하였다. 그 결과, $0.12\;{\~}\;125\;ng/ml$의 범위에서 용량반응곡선을 얻었으며, 측정감도 (최소 검출량)는 거의 0.58 ng/ml 정도 였다. 그리고 뇌하수체 추출물 및 배양액 각각의 희석곡선은 GTH II 표존곡선과 일치 하였다. 또한 이러한 GTH II의 표준곡선는 뇌하수체내 다른 peptide hormone와는 교차반응을 거의 나타내지 않았다. Testosterone을 처리한 미성숙 무지개 송어의 뇌하수체 세포배양계를 이용하여 sGnRH에 의한 GTH II 분비량을 본 sandwich EIA계와 RIA계를 비교 조사한 결과, 거의 같은 분비량을 나타냈을 뿐만아니라 같은 분비 pattern을 나타냈다. 이러한 결과로부터 본 sandwich법 EIA계에 의해서 연어과 어류의 뇌하수체 추출물 및 뇌하수체 배양액 중의 GTH II 함량 및 분비량을 측정하는데 있어서 안정된 assay계라고 생각되어진다.
The objective of this study was to determine whether peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$(PPAR${\gamma}$ is involved in the regulation of weaning to estrus of primiparous sows. Twelve sows composed of 6 groups of 2 full-sibs in a similar age (325.2 d), body weight (BW; 152.4 kg) and backfat thickness (BFT; 27.0 mm) at start of lactation, were allocated to accept 31 MJ (restricted group, R-group) or 53 MJ (control group, C-group) DE/d treatment, respectively. The experimental results indicated that the low energy intake resulted in excessive losses of BW and BFT during lactation in R-group sows, which may be related to decrease of serum 15-deoxy-${\Delta}^{12,14}$-prostaglandin $J_2$ (15d-$PGJ_2$), a ligand of PPAR${\gamma}$ The obvious peak and the frequency of LH, FSH and estradiol ($E_2$) were only observed in C-group sows. Except for $E_2$ at d 1 and 2, serum FSH, LH and $E_2$ concentrations in R-group were lower than those in C-group sows after weaning. However, the serum progesterone ($P_4$) level in R-group sows was always more than that in C-group. The expression abundances of PPAR${\gamma}$and GnRH receptor (GnRH-R) in pituitary, FSH receptor (FSH-R), LH receptor (LH-R), estrogen receptor (ES-R) and aromatase in ovary of anestrous sows were lower than those of estrous sows. Neither the BFT nor the BW was associated with the mRNA abundance of PPAR${\gamma}$in hypothalamus during lactation. Expressions of PPAR${\gamma}$in pituitary and ovary were affected evidently by the BFT changes and only by the loss of BW of sows during and after lactation. Furthermore, PPAR${\gamma}$mRNA level in ovary was significantly related to the expression abundances of GnRH-R, FSH-R, ES-R and aromatase, and GnRH-R was obviously associated with PPAR${\gamma}$expression in pituitary. However, PPAR${\gamma}$expression in hypothalamus likely has no effects on these genes expression and no obvious difference for all sows. Not serum $E_2$ or $P_4$ alone but the ratios of $E_2$ to $P_4$ and 15d-$PGJ_2$ to $P_4$, and serum FSH and LH were evidently related to PPAR${\gamma}$expression in pituitary and ovary. It is concluded that PPAR${\gamma}$is associated with body conditions, reproduction hormones and their receptor expression, which affected the functions of pituitary and ovary and ultimately the estrus after weaning of primiparous sows.
Lymphocytic hypophysitis is a clinically rare disease, and it has been known to be an autoimmune disease which mainly affects pregnant women at the end of gestation or right after delivery. The authors experienced a case of lymphocytic hypophysitis in a 29-year-old pregnant woman with rapid progressing visual disturbance. Sella MRI showed a mass-like lesion of hypophysis and hypertrophy of pituitary stalk with evidences of hypopituitarism. Cesarean section was done and then TSA was performed. The pathologic diagnosis was lymphocytic hypophysitis. After TSA, visual acuity was improved and visual field defect was recovered. She was given thyroid hormone replacement therapy because of transient partial hypopituitarism for 6 months after surgery. One must consider the probability of lymphocytic hypophysitis, if there are alteration of visual acuity and visual field defect which aggravate rapidly during pregnancy due to mass effect, decreased serum hormonal levels shown in hypopituitarism and sella MRI findings of hypertrophy of pituitary stalk and enlargement of pituitary gland.
Pituitary pars intermedia dysfunction (PPID), often referred to as equine Cushing's disease, is a common endocrine disorder often diagnosed in older horses. A 13-year-old 460 kg Warmblood gelding showed clinical signs suggestive of PPID, including hypertrichosis, fat redistribution, polyuria and polydipsia (PU/PD), and weight loss. Physical examination, complete blood cell count, and serum chemistry results were normal. However, dexamethasone suppression and plasma adrenocorticotropic hormone (ACTH) level tests confirmed PPID. Three months after the confirmed diagnosis, the horse was referred again with symptoms of laminitis. Radiography and venography were performed to evaluate the laminitis severity level. However, the foot condition continued to worsen, and the horse was eventually euthanized. The purpose of this case report is to describe clinical signs and diagnosis of PPID with laminitis.
Isolation and cloning of seven-band grouper (Epinephelus septemfasciatus) growth hormone cDNA from pituitary gland revealed an open reading frame of 612 bp coding for a pre-growth hormone of 204 amino acids with a 17 amino acid putative signal peptide. Deduced amino acid sequence showed that there was one possible N-glycosylation site at $Asn^{l84}$ and four cysteine residues $(Cys^{52},\;Cys^{160},\;Cys^{177},\;Cys^{185})$ on t e same positions as in some other species where they were involved in the stabilization of the tertiary structure. The seven-band grouper growth hormone (sbgGH) presented a $99.5\%$ amino acid sequence identity with the growth hormone of Epinephelus coioides and contained the conserved hormone domain region. Comparison of growth hormone sequences from evolutionarily diverse species revealed 25 amino acid residues conserved in jawless fishes to modern mammals. It also revealed an evolutionary trend to retain the same polypeptide sequence even in the distantly related animals while allowing alterations to occur in polypeptides of the closely related species. In order to create a recombinant system to produce high levels of the growth hormone, it was expressed in Escherichia coli (BL21) cells. The gel analysis revealed theoretically expected molecular weights for both mature and pre-sbgGHs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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