• 한국미생물·생명공학회지
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• 제29권4호
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• pp.195-200
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• 2001

본 연구는 단위 가축 사료로 이용되는 곡류 등에 존재하는 항연인자인 Phytate 함유 환경하에서의 성장 및 phytate 분해력이 우수한 유산균을 분리하고 발효사료 제조 및 가축 생균제용 균주로의 이용성을 검토하기 위하여 실시하였다. 분리 유산균은 자돈 분변으로부터 얻은 유산균들중 phytate 함유 환경하에서의 성장 및 phytate 분해력이 가장 우수한 균으로 동정결과Lactobacillus paracasei subsp, paracasei로 동정되었다. 분리 규주는 내산성, 내담증섭이 높고, 사료원료를 배지성분으로 하여 순수배양한 결과 대두박 및 밀기울의 phytate-P 분해율이 각각 27.07및 12.18%로 나타났다. 또한 분리 균주를 비육돈 사료에 첨가하여 급여한 결과 중체량 개선효과는 나타나지 않았으나 사료효율 개선효과를 얻을 수 있었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제42권4호
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• pp.627-632
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• 2013

본 연구는 phytate를 myo-inositol과 무기태인으로 분해시키는 효소인 phytase 생산균주의 분리 및 현미의 phytate 저감 최적 온도 및 pH에 관한 것이다. 먼저 phytase 활성 측정을 통하여 우수한 phytase 활성을 가지는 균주를 김치로부터 분리 및 선발하고 내산성과 내열성 실험으로 균주의 특성을 파악하고, 당 이용성 조사 및 16S rRNA sequence 분석으로 L. sakei가 동정되어 이 균주를 L. sakei Wikim001으로 명명하였다. L. sakei Wikim001에 의한 현미의 phytate 분해능을 확인하였으며, L. sakei Wikim001의 현미의 phytate 분해의 적정반응 pH는 5.0~6.5이며 온도는 $30{\sim}40^{\circ}C$.로 나타났다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제38권8호
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• pp.1118-1123
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• 2009

쌀을 이용한 새로운 probiotic food를 개발하기 위한 기초연구로 본 연구를 수행하였다. 먼저 호화시킨 현미 현탁액에 $\alpha$-amylase, $\alpha$-amylase와 glucoamylase를 처리한 후 동결 건조하여 가수분해도가 상이한 현미 분해물을 제조하였다. 김치에서 분리한 유산균인 Ln. mesenteroides KC51 균주를 4%(w/w) 현미 분해물 현탁액에 진탕배양하면서 현미의 가수분해도가 산의 생성, 균의 생육과 phytate의 분해에 미치는 영향을 조사하였다. 동시에 효소를 처리하지 않은 현미 분말 현탁액을 대조군으로 비교하였다. 배양액의 pH는 현미의 가수분해도가 증가함에 따라 감소하였으며 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해한 경우 접종 후 15시간에 pH 3.41로 급속히 감소하였다. 이때 배양액에 젖산과 초산이 각각 0.327%와 0.200% 함유되어 있었다. 적정산도의 변화도 pH의 변화와 유사하게 가수분해도에 비례하여 증가하였다. 모든 현미의 분해물에서 Ln. mesenteroides KC51 균주는 접종 후 6시간에 $4.0\sim7.2{\times}10^8$ CFU/g 수준까지 증가한 후 생육에 큰 변화는 없었으나 대조군에서는 접종 9시간 후 생균수가 다소 감소하였다. 항영양인자인 phytate의 함량은 현미가수분해도가 증가할수록 감소하여 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해하여 가수분해도가 가장 높은(48.2%) 경우 phytate의 약 50%가 분해되었으며 $\alpha$-amylase로 처리하여 가수분해도가 낮은(22.5%) 경우에서는 거의 분해되지 않았다. Ln. mesenteroides KC51 균주 배양액의 저장성은 $4^{\circ}C$에서 14일간 저장 후 pH와 적정산도, 생균수는 거의 유사하였다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제52권1호
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• pp.33-37
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• 2009

쌀과 유산균을 이용한 곡류 발효 식품을 개발하기 위하여 김치에서 분리한 유산균 Ln. mesenteroides KC51를 호화, 액화, 당화시킨 현미 분말 현탁액에 배양하였다. 멸균한 현미 당화물에 KC51 균주를 접종하고 $30^{\circ}C$에서 진탕 배양한 결과, 생균수는 당화물의 농도 증가에 따라서 접종 후 9시간까지 급격히 증가하였으며 그 이후 완만하게 감소하였다. 당화물 농도가 12% 일 때 Ln. mesenteroides KC51 균주의 생육은 9.56 log CFU/g까지 증가하였다. 적정산도는 당화물의 농도가 증가함에 따라서 증가하였으며, 당화물의 농도가 12%에서 배양 18시간 째 0.93%까지 증가하였으며, pH는 3.38로 감소하였다. 이때 젖산과 초산의 함량이 각각 0.395%와 0.242%로 대략 3:2의 생성비율을 보였다. 현미 배양액 중 항영양인자인 phytate의 농도는 유산균의 증식에 따라 감소되었으며, Ln. mesenteroides KC51 균주의 최대 phytate 분해율은 당화물의 농도와 무관하게 $45{\sim}47%$를 나타내었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제48권3호
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• pp.228-232
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• 2005

Saccharomyces cerevisiae CY 균주에 의한 phytase의 생성은 진탕배양인 경우가 정치배양에 비하여 약 2배의 생성도를 보였다. CY 균주의 phytase는 세포내 효소활성이 세포외 효소활성에 비하여 약 3-4배 높게 나타났으나, 포도당이 1%로 저농도로 첨가된 배지에서는 세포내 효소활성과 세포외 효소활성의 분포비율이 1 : 1 정도로 유사한 비율로 나타났다. 세포내외로 생성된 총 phytase 활성은 포도당의 첨가농도에 상관없이 대략 1,000 mU/ml에 이르렀으며, 건조균체당 효소활성은 지수성장 말기에 170-190 mU/mg-DCW 범위에서 최대활성을 보였다. CY 균주의 세포내 효소의 최적 반응pH는 3.5이었으며, 최적 반응 온도는 $37-40^{\circ}C$이었다. 배양액에 존재하는 phytate는 성장하는 CY 균주에 의하여 배양 36시간째 4.3 mM phytate의 약 95%가 분해되었으며, 0.4 mg-DCW/ml의 균체농도를 갖는 현탁균체 반응액에서는 분해반응 12시간째 phytate의 약 90% 이상이 효율적으로 분해되었다.

• 한국유기농업학회지
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• 제16권3호
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• pp.331-339
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• 2008

본 연구는 반추가축에 있어서 단백질 Bypass처리가 광물질의 체내이용에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 반추위 Cannula를 장착한 면양 3두에 나이론백 실험방법을 이용하여 사양시험을 실시하였다. 시험사료로는 대두박과 채종박을 사용하였으며, 본 시험사료에 가열($133^{\circ}C$, $143^{\circ}C$) 처리와 포름알데이드(0.3%, 0.5%)처리를 하고 나이론 백을 사용하여 반추위내에서 배양한 후 Phytate와 P, Ca, Mg, Cu, Fe, Cu에 대해 각 항목의 반추위내의 소실율을 구하였다. 시험결과에 의하면 대두박과 채종박에 대한 단백질 Bypass처리는 Phytate를 포함한 모든 광물질에서 단백질 Bypass 처리의 강도가 높아짐에 따라 반추위내의 각 광물질의 소실율이 유의하게 감소하였다(P<0.05). 그리고 각 광물질간의 비교에서 Cu, Zn, Ca의 소실율이 타광물질에 비하여 낮은 경향을 보여 특히 본 광물질의 이용성 감소가 예상된다. 이상의 결과로 반추가축에 있어서 이용률이 매우 높은 것으로 알려진 Phytate는 단백질 Bypass처리를 함으로써 Phytate와 결합되어 사료내에 존재하는 광물질의 반추위내의 분해 율을 감소시켜 반추가축에 있어서의 광물질 부족 및 분으로의 배설 증가로 인한 토양의 오염증가가 예상된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권1호
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• pp.40-46
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• 2006

단위 동물의 사료 내 phytate 인의 효율적 이용으로 배출되는 인의 양을 줄여 환경오염을 감소시키기 위해 phytate의 분해활성이 뛰어난 phytase 효소 분비 미생물을 탐색하기 위하며 우분으로부터 phytate 분해활성이 뛰어난 phytase를 생산하는 균주를 분리하였다. 분리균주를 동정한 결과, API 50 CHB test에 의해 B. circulans로 분류되었고, 16S rRNA sequencing 결과, B. subtilis로 동정되어 Bacillus sp. CF 5-26으로 명명하였다. 효소생산을 위한 최적배지 조성은 10% rice bran extract, 0.1%, whey protein powder, $0.01%\;CaCl_{2},\;0.01%\;KH_{2}PO_4$ 이었다. Bacillus sp. CF 5-26이 생산하는 phytase는 ethanol 침전, Sephadex G-100, CM Sepharose CL-6B, Sephacryl S-100-HR column chromatography를 통하여 정제도 20.3배, 수율 5.6% 정제되었고, SDS-PAGE에서 분자량 66 kDa의 단일 band를 확인하였다. 정제된 phytase는 pH 5.0, 7.0, 11.0에서 안정하였으며, $100^{\circ}C$에서 1시간 처리하였을 때 50%의 잔존활성을 보였다. 기질 특이성은 inositol polyphosphate인 sodium phytate 분해활성이 뛰어났으며, tripolyphosphate와 pyrophosphate에도 약간의 활성을 보였다. Bacillus sp. CF 5-26이 생산하는 phytase의 sodium phytate에 대한 Km은 0.64 mM 이었고, Vmax는 $4.41{\mu}mol/min$ 이었다.

• 한국식품과학회지
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• 제26권5호
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• pp.603-608
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• 1994

대두식품의 가공 및 발효에 따른 phytate 함량의 변화, 그 함량이 pepsin과 pancreatin에 의한 단백질 소화에 미치는 영향, 그리고 전기영동법에 의한 단백질 분획의 변화를 조사하였다. 황색콩의 phytate 함량은 2.4%이었고 가공 및 발효에 따라 감소하여 두유 0.2%, 두부 0.7%, 비지 0.4%로, 청국장 0.9%, 메주 1.4%, 간장 0.2%, 된장 1.0%로 나타났다. Phytate/protein 비율은 pepsin에 의한 단백질 소화율과 상관성이 없었으나 pancreatin에 의한 단백질 소화율과는 부(負)의 상관관계를 나타냈다(p<0.01, r= -0.73). 전기영동 결과 콩을 물에 불리면 수용성 분획이 변화되었고 두유 제조시 비지에는 주로 저분자량 밴드들이 새로이 나타났다. 발효 과정에서는 단백질이 분해되어 밴드가 거의 나타나지 않았다.

• 핵의학기술
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• 제14권1호
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• pp.35-39
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• 2010

감시림프절 검사에는 $^{99m}Tc$-ASC, $^{99m}Tc$-Tin colloid, $^{99m}Tc$-HSA 등이 사용되었으나 공급 제한으로 간 스캔에 사용되고 있는 $^{99m}Tc$-phytate를 대체 방사성의약품으로 사용하고 있다. 이에 저자들은 phytate의 입자 크기 분포를 알아보고 200 nm 필터 사용유무에 따른 영상을 획득 분석하여 감시림프절 검사 시 필터 사용의 적절성을 판단하고자 하였다. Photal사의 ELS-8000 장비를 이용하여 phytate kit의 입자크기 분포를 측정 하였다. 동물 실험은 생후 12~15주령, 체중 250~300 g 암컷 백서를 사용하였으며, 전신 마취 후 앙와 위로 고정시켜 영상을 획득하였다. 비교군으로 여과시키지 않은 $^{99m}Tc$-phytate를 실험군으로는 200 nm 필터를 이용하여 여과시킨 $^{99m}Tc$-phytate를 백서의 발가락 사이에 피하주사 하였다. 6마리의 백서를 3~4일 간격으로 비교군과 대조군으로 그룹을 나누어 2회씩 실시 하였으며, 주사 후 1시간 지연영상을 얻은 후 서혜부에 관심영역을 설정하였으며 비정상적인 집적이 없는 부위를 선별하여 픽셀당 카운트를 얻었다. 세포 실험은 RAW 264.7 세포를 이용하여 비교군과 실험군에 $^{99m}Tc$-phytate를 넣어주고 30분 동안 배양시켜 감마카운터를 이용하여 각각의 분 당 카운트 값을 측정하였다. 이 값들은 SPSS 12.0 프로그램을 이용하여 통계 검정하였다. Phytate를 생리식염수에 용해시킨 후 측정 결과 평균 직경은 130~650 nm가 $85{\pm}5%$ 정도였으나 200 nm 필터를 이용하여 여과시킨 후의 입자 크기는 용매 내 phytate 입자의 농도가 너무 낮아 측정할 수 없었다. 획득한 영상을 분석한 결과 비교군에서는 $60.2{\pm}4.88$ count/pixel, 실험군에서는 $58.3{\pm}5.97$ count/pixel 값을 보였다. 세포 실험에서 실험군의 카운트 값은 $17,152{\pm}1,165$ cpm이고 비교군은 $16,908{\pm}1,075$ cpm을 보였다. 동물 실험과 마찬가지로 세포 실험에서도 통계적 차이는 보이지 않았다. 이번 실험을 통하여 phytate의 사이즈가 매우 분산적이며 균일하지 못 하다는 사실을 확인하였으며, 동물 실험과 세포실험을 통한 필터 사용의 적절성을 판단한 결과 phytate를 이용한 감시림프절 검사에서 필터를 사용하는 방법은 결과에 큰 영향을 미치지 않는다는 것을 확인하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제39권1호
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• pp.32-38
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• 1996

대두에 함유된 영양저해인자의 하나인 phytic acid를 감소시키기 위해 일정시간 침지시킨 대두를 microwave로 가열처리하여 phytic acid 및 phosphorus의 함량 변화를 관찰하였다. 단원콩, 만리콩 및 Amsoy의 phytic acid 함량은 각각 탈지대두 1 g중에 19.19 mg, 18.38 mg 및 16.73 mg 함유되어 있었다. 가열시간이 길어짐에 따라 콩에 함유된 phytic acid 및 phytate phosphorus 함량은 감소하는 경향을 보여서, 5분 가열시에 단원콩, 만리콩 및 Amsoy의 phytic acid 감소율은 각각 26.29%, 24.85%, 23.72%이었다. 단원콩을 12에서 30분간 autoclaving 처리하였을때 phytic acid 및 phytate phosphorus의 감소율은 18.62%와 16.95%로 microwave로 5분 처리하였을 때가 훨씬 효과적이었다. 대두의 수분함량과 microwave 가열효과와의 관계는 수분함량이 낮을수록 phytic acid의 감소 효과가 컸다. 몇가지 염용액에 12시간 침지시킨후 4분간 가열처리시 phytic acid의 감소율은 2.5% NaCl에서 24.52%, 2% $NaHCO_3$에서 26.62%, 혼합 염용액(M.S.S.)에서 28.47%로 증류수의 21.53%보다 약간 높게 나타났으며, phytate phosphorus 감소율 또한 위의 세가지 염용액에서 26.17%, 24.64% 및 26.60%로서 증류수의 19.73%보다 약간 더 효과가 있는 것으로 나타났다.